專利名稱：N－(2－芳基－丙酰基)－磺胺類化合物及其藥物組合物的制作方法
此為中國專利申請CN 99812451.6，“N-(2-芳基-丙酰基)-磺胺類化合物及其藥物組合物”，的分案申請。
本發明涉及N-(2-芳基-丙酰基)-磺胺類化合物及其藥物組合物，該組合物可用于預防和治療多形核嗜中性白細胞(PMN白細胞)在炎癥部位惡性聚集所致的組織損傷。
趨化性是一種細胞反應，它引起特定血細胞(巨噬細胞、粒細胞、多形核嗜中性白細胞)隨著化學刺激(趨化因子)順刺激劑的濃度梯度方向遷移。最具有代表性的趨化因子是補體剪切產物C5a，細菌表面裂解產生或合成的N-甲酰肽，例如甲酰基-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(f-MLP)，最重要的是稱為白介素IL-8的一類細胞因子。白介素IL-8是大多數有核細胞(成纖維細胞、巨噬細胞、內皮細胞和上皮細胞)接觸TNF-α(腫瘤壞死因子)、白介素IL-1α和IL-1β和細菌細胞壁的脂多糖(LPS)時產生，或嗜中性白細胞本身在LPS和細菌N-甲酰肽(fMPL樣肽)作用下產生的一種內源性趨化因子。這一趨化因子[又稱嗜中性白細胞活化因子(NAF)、T細胞趨化因子、單核細胞源嗜中性白細胞趨化因子(MDNCF)]控制著一系列與IL-8受體結合的IL-8樣趨化因子[GROα、β、γ和NAP-2](Chang等，免疫學雜志148451，1992)。
在趨化因子的作用下，嗜中性白細胞發生形態改變，使它們傾向于遷移和活化，最后發生脫粒、耗氧，并產生氧自由基。
所有這些作用在嗜中性白細胞接觸趨化因子后的數秒內發生，其生物化學特征在于胞內Ca2+離子、Na+離子和c-AMP水平瞬間升高，細胞膜電勢因而改變。趨化因子誘導[Ca2+]i升高后，G蛋白、磷脂酶C、A2和花生四烯酸級聯被活化，并形成環加氧酶和脂氧合酶產物(L.Harvath的“嗜中性白細胞趨化性調節”，醫學化學報道年報，ps.233-235，Vol.24，1992和該論文所引用的文獻)。嗜中性白細胞是抵擋細菌感染的第一道防線，因為它們會從外周血流通過內皮細胞界和組織基質向感染部位迅速遷移，在此發揮其特殊的作用，例如破壞微生物、清除被損傷細胞和促進組織修復(M.A.Goucerot-Podicalo等，病理學和生物學(巴黎)44，36，1996)。
在以嗜中性白細胞惡性聚集為特征的特定病理情況下，以上有益的聚集作用被組織損傷的進一步惡化所抵消，這種惡化延緩愈創過程，最嚴重時，可能導致患者死亡。
最近，有重要而可信的證據支持以下假設局部缺血和重充血損傷，以及氧過多性肺損傷與存在活化嗜中性白細胞有關，而細胞損害則是這一作用的直接后果。實驗模型[N.Sekido等，自然365，654，1993和T.Matsumoto等，實驗室研究77，119，1997]和人臨床病理學報道[A.Mazzone等，最新醫學發展85，397，1994；T.C.Fisher和H.J.Meiselmann，凝血研究74(增刊1)，S21-S34，1994；G.Ricevuti等，動脈硬化91，1，1991]證實了這一點，其中，細胞損傷與PMN白細胞浸潤的程度和范圍直接、嚴格相關，IL-8細胞因子則越來越被認為是這種浸潤的最具特異性和最強的活化劑。在這些情況的致病過程中，在諸如C5a、PAF、LTB4等激活嗜中性白細胞的各種趨化因子(它們參與嗜中性白細胞的直接遷移)之外，IL-8也具有重要作用它由單核巨噬細胞產生，而這種產生能通過產生前新IL-8和附近非免疫細胞對其產生的誘導而介導其他炎性細胞遷移[A.P.Metiko等，臨床研究雜志90，791，1992]。
在急性呼吸機能不全(ARDS)患者中，空間和肺液內嗜中性白細胞的惡性存在(疾病的特征之一)與細胞因子的高濃度顯著相關。另一方面，患者肺水腫液內NAP-1/IL-8的濃度與誘導嗜中性白細胞趨化性所需的最佳濃度相符(E.J.Miller等，呼吸疾病評論146，437，1992)；最后，死亡率與肺泡液內的高濃度IL-8之間存在著密切的關聯(A.Kurdowska等，免疫學雜志157，2699，1996)。
在這場爭論中，特別重要的是用抗IL-8抗體所得的結果，該抗體能夠在急性呼吸機能不全和管內滴注熱滅活釀膿鏈球菌(OK-432)引起內毒素血癥肺損傷的模型中中和細胞因子的作用(K.Yokoi等，實驗室研究76，376，1997)。
急性心肌梗塞患者在發作后24小時內表現出血清IL-8顯著升高(13-1100ng/L)。這一升高將在心肌細胞損傷的發展中起極其重要的作用，因為該細胞因子對嗜中性白細胞及其在組織損傷中的作用具有很強的刺激力(Y.Abe等，心臟病雜志70，132，1993)，在臨床局部缺血情況發展中，這種作用更多地取決于重充血過程而不是缺血持續時間。
最近在一個重充血模型中證明，在兔腦內點局部缺血后，用抗IL-8抗體治療能減輕腦水腫和縮小損傷面積(T.Matsumoto等，實驗室研究，77，119，1997)。該模型中觀察到的腦組織內IL-8顯著升高證明灌注組織內IL-8的局部產生及其在血管壁內活化嗜中性白細胞內的存在共同決定組織損傷的程度。
嗜中性白細胞與趨化劑之間的受體相互作用對于趨化性來說是決定性的；IL-8通過兩種人嗜中性白細胞上和部分T細胞上的不同受體(CXCR1和CXCR2)參與這一作用(L.Xu等，白細胞生物學雜志57，335，1995)。N-(2-羥基-4-硝基苯基)-N′-(2-溴-苯基)脲選擇性地抑制IL-8與嗜中性白細胞表面受體CXCR2結合，IC50為22nM，可證明這一點(J.R.White等，生物化學雜志273，10095，1998)。結果，IL-8(1nM)和GROα(10nM)激發的人嗜中性白細胞趨化性受到IC50相似(20-60nM)地抑制[補體C5a激發的趨化性的IC50則為50-330nM]，但并不抑制相同人嗜中性白細胞內IL-8或最佳濃度LTB4誘導的Ca2+i動員。
最近(1998年2月28日)的WO98/07418提出了將苯基脲用于治療白介素8(IL-8)介導的病理的專利。
在研究評價酮洛芬(S)和(R)對映體對于其外消旋體消炎活性的貢獻，以及它們在細胞因子調節中的作用時(P.Ghezzi等，實驗醫學和治療學雜志，1999，在印)，出人意料地發現，具有手性和非手性有機堿(organic bases)的單對映體的鹽劑量依賴性性地抑制IL-8在PMN白細胞內誘導的Ca2+胞內濃度升高([Ca2+]i(本申請人在意大利的專利申請n°MI98A000146(28.01.1998)。用La(鑭)離子進行的競爭研究證明這些鹽對于嗜中性白細胞IL-8應答的抑制作用既不是受體相互作用的結果也不是IL-8受體表達受阻的結果，而是選擇性抑制Ca2+作用的結果，這種抑制的程度足以阻止細胞因子激活嗜中性白細胞特有的一系列反應嗜中性白細胞趨化性和脫粒(同時釋放出彈性酶、組織蛋白酶等酶)。而且，單對映體還抑制C5a和fMLP誘導的趨化性和[Ca2+]i升高，雖然效率略低。
這兩種單對映體的主要區別在于(R)對映體作為CO酶抑制劑的效力較低(低約10-100倍)。
所以，與(S)對映體相比，(R)對映體的PG合成抑制活力較低，PG則具有抑制和控制放大(例如)嗜中性白細胞促炎作用的TNF-α等細胞因子釋放的作用。因此，在嗜中性白細胞依賴性病理和炎癥，例如牛皮癬、原發性肺纖維變性、急性呼吸機能不全、重充血損傷和血管球性腎炎等的治療中，(S)對映體的治療性作用較低。
現在發現，2-芳基-丙酸的N-酰基-磺胺類化合物是IL-8誘導的嗜中性白細胞趨化性和脫粒有效的抑制劑。如W.H.Pirke和J.Mc Cune(層析法469，67，1989)所述，R(2)-[(4-異丁基)苯基]丙酰胺也具有類似的特性。所以，本發明也涉及它在治療嗜中性白細胞依賴性病理中的用途。
更具體地說，本發明涉及以下通式(1)所示的新N-(2-芳基-丙酰基)-磺胺類化合物
其中，R2是芳基；R是直鏈或分支C1-16烷基，三氟甲基，環己基，鄰甲苯基，3-吡啶基，2-吡啶基乙基，對氰基苯基甲基，對氨基苯基甲基，3-氰基-1-丙基，4-氨基丁基，烷氧基亞乙基CH3-(CH2)ni-(OCH2CH2)mi-，其中ni是0或1，mi是整數1-3，或是P1P2N-CH2-CH2-，其中P1和P2各自是H、C1-3烷基，芐氧基羰基α-、β-或γ-吡啶基羰基，羧基羰基或烷酯基羰基，P1和P2或者與相連的N原子構成苯二甲酰亞氨基、哌啶子基、嗎啉代基；R′是H或直鏈或分支C1-3烷基，以H為佳。
“芳基”以可被1-3個相同或不同取代基取代的苯基為佳，這些取代基選自H，C1-4烷基，C1-4烷氧基，羥基，C1-7酸基，氰基，硝基，氨基，C1-3酰基氨基，鹵代C1-3烷基，鹵代C1-3烷氧基，苯甲酰基，或如異布洛芬、酮洛芬、萘普生、舒洛芬、卡洛芬、吡洛芬、芬洛芬等已知消炎性2-芳基丙酸的芳基部分。
較好的2-芳基丙酸的芳基是4-異丁基苯基，3-苯甲酰基苯基，5-苯甲酰基-2-乙酸基苯基，3-苯氧基苯基，5-苯甲酰基噻吩-2-基，4-噻吩甲酰基(thienoyl)苯基，1-氧-2-異二氫氮雜茚基苯基，3-氯-4-(2，5-二氫-1H-吡咯-1-基)苯基，6-甲氧基-β-萘基，5-苯甲酰基-2-苯硫基，1-羥基苯基，或以下通式所示的基團 其中，A是芐基、苯甲酰基或苯甲酰基-肟、1-羥基-1-苯基甲基，B是H、羥基、C1-3酸基或氨基。
R2以上述已知消炎性2-芳基丙酸的芳基為佳。
特別優選的R2是4-(2-甲基丙基)-苯基，3-苯氧基-苯基，2-[4-(1-氧-2-異二氫氮雜茚基)苯基]，5-苯甲酰基噻吩-2-基，4-噻吩甲酰基苯基。
優選的C1-3酸基是乙酰基；優選的直鏈或分支C1-16烷基是甲基、己基、十二烷基和十六烷基；優選的C1-3烷基是甲基。
本發明中最為優選的通式(1)所示化合物是甲基所在的碳原子為R構型的那些。
本發明化合物可用已知方法制得，例如等分子量的通式(2)酸
其中，R2′與R2相同，或是可通過去保護轉化為R2的基團，與通式(3)磺酰胺 其中，R和R′與前文所述的相同，在惰性溶劑中，在等分子量和/或略過量的碳二亞胺(例如二環己基碳二亞胺)、可溶性碳二亞胺(例如鹽酸N-(3-二甲基-氨基-丙基)-N′-乙基碳二亞胺)或1，1′-羰基二咪唑等縮合劑和選自三乙基胺、4-(N，N-二甲基氨基)-吡啶、1，8-二氮雜二環[5.4.0]十一-7-烯和1，5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯的抗衡堿存在下反應生成。
或者，同樣有效的另一過程包括通式(3)所示的磺胺陰離子 其中，R如前述，與通式(2)酸的適當反應性形式在惰性溶劑中反應；更具體地說，在制備本發明手性N-酰基磺胺類化合物的過程中，通式(2)酸的氯化物是最佳反應形式，不會發生在通式(4)磺酰氯與通式(5)酰胺陰離子反應中可能發生的部分外消旋作用 當以上過程所得化合物中的R2′是苯甲酰基時，所述苯甲酰基可通過已知的肟化反應或在合適催化劑存在下吸收1到2當量氫而發生的羰基還原成醇成烷(芐基)的反應，形成另一種不同的通式(1)化合物。
通式(1)所示化合物的N-酰基磺氨基是一個酸性足以與L-賴氨酸、L-精氨酸、三羧甲基氨甲烷或手性胺(例如麻黃堿、弱金雞納堿、金雞納啶等)等強堿和中強堿形成加成鹽的基團，因而能夠將該磺胺化合物光學拆分成(R)和(S)對映體。可用任選手性載體進行的TLC或多種柱層析等各種層析技術(參見W.H.Pirkle和J.McCune的前述論文)純化和分離單對映體和非對映體，并用R-(-)-2-[(4′-異丁基)苯基]丙酰胺作為標準參照物評定其光學純度。
烷基磺酸、芳基磺酸和雜芳基磺酸的氯化物，以及它們的酰胺是已知化合物，可以購得或方便地制得。所以，例如在將通式為CH3-(CH2)ni-(OCH2CH2)mi-OH(其中ni和mi如前所述)的聚氧乙烯醇轉化為相應的甲苯磺酸酯或鹵化物(X＝Cl，Br或I)后，轉化產物與過量硫脲反應，可生成相應的異硫脲鎓鹽CH3-(CH2)ni-(OCH2CH2)mi-S-(C＝NH)-NH2·HX，該產物再通過室溫下的氯化直接轉化為相應的磺酰氯CH3-(CH2)ni-(OCH2CH2)mi-SO2Cl，然后轉化為相應的磺酰胺(J.M.Sprague和T.B.Johnson，美國化學協會雜志59，1837，1937)。
通式為P1P2-N-CH2-CH2-SO2NH2的2-烷基-氨基乙磺酰胺是已知的化合物，或者可用已知方法方便地制得，其中，P1和P2是C1-3烷基，或者如前所述，P1和P2與相連的N原子形成環。有關氨基乙磺酰胺的合成，參見例如Miller等在化學協會雜志75，1941中所述；A.Le Berre和C.Porte(Bull.Soc.Chim(法國)II-602，1978)揭示了一種在乙烯-磺酰胺[CH2＝CH-SO2NH2]中加入仲胺(二甲基胺、哌啶和嗎啉)的方法，作為制備2-二烷基氨基乙磺酰胺的一般方法，乙烯-磺酰胺的合成可參見A.S.Matlack，有機化學雜志23，729，1958，以及該論文所引用的文獻所述。
通式(3)磺酰胺和通式(4)磺酰氯是已知的化合物，或者可用熟知的方法制得。
通式(2)所示的2-芳基丙酸是熟知用作鎮痛和消炎藥的化合物。已知許多它(包括其單對映體和外消旋體)的制備方法。已知許多光學拆分外消旋體的有效方法。對映體選擇性合成主要涉及芳基丙酸(S)對映體的合成，但通過適當選擇反應試劑(手性助劑)，也可改用于獲得(R)對映體參見，例如，用烷基芳基酮作為基質合成α-芳基烷酸，參見B.M.Trost和J.H.Rigby，有機化學雜志14，2936，1978；有關Meldrum酸的α-芳基化，參見J.T.Piney和B.A.Rowe，Tetrah.lett.，21，965，1980；有關酒石酸作為手性助劑的用途，參見G.Castaldi等，有機化學雜志52，3018，1987；有關α-羥基酯作為手性助劑的用途，參見R.D.Larsen等，美國化學協會雜志111，7650，1989和美國專利4,940,813以及其中引用的文獻。
更具體地說，其中R2為3-苯甲酰基-2-羥基-苯基或3-苯甲酰基-2-氨基苯基的通式(2)所示芳基酸是已知化合物；其制備方法可參見本申請人的意大利專利1,283,649(23.04.1998)。
本發明化合物的具體例子是
R(-)-N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺及其L(+)-賴氨酸鹽；R(-)-N-2-[(3-苯甲酰基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺；R(-)-N-(2-[3-(1ξ-羥基-1ξ-苯基)甲基]-丙酰基)-甲磺酰胺；R(-)-N-甲基，N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-芐基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺；(±)N-[2-(5′-苯甲酰基-2′-乙酸基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺；鹽酸R(-)-N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-2-氨基乙基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-2-苯二甲酰亞氨基乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基苯基)-丙酰基]，N′-芐酯基氨基乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯氧基苯基)-丙酰基]，N′-芐酯基氨基乙磺酰胺；R(-)-N-[2-[4-(1-氧-2-異二氫氮雜茚基)苯基]丙酰基]，N′-芐酯基氨基乙磺酰胺；N-[2-(5-苯甲酰基-噻吩-2-基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；N-[2-(4-噻吩甲酰基-苯基)丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基苯基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯氧基苯基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；N-[2-(5-苯甲酰基-噻吩-2-基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；N-[2-(4-噻吩甲酰基-苯基)丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-環己基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-十二烷基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-對氰基苯基甲磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-3-氰基-1-丙磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-2-甲氧基乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-3，6-二噁-庚基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-3，6-二噁-辛基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-3，6，9-三噁-癸基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-3，6，9-三噁-十一烷基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-2-二甲基氨基乙基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-2-(哌啶-1-基)-乙基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)-丙酰基]-2-(嗎啉-4-基)-乙基磺酰胺。
用葡聚糖進行肝素化健康供血者血液沉降，用如此制得的PMN細胞研究本發明的化合物；用Ficoll/Hypaque去除單核細胞，通過低滲溶液處理去除紅細胞。用Turk和臺盼藍排除法計算PMN白細胞的細胞活力，在用Diff Quinck染色后計算細胞離心產物中的PM細胞核百分比(W.J.Ming等，免疫學雜志138，1469，1987)。
在后文所述的各“體外”試驗中，PMN與本發明化合物都在37℃一起培養10分鐘。
在趨化性試驗以及評價Ca2+離子胞質溶膠水平的試驗中，用人重組IL-8(Pepro Tech.)作為刺激劑將凍干蛋白質溶解在HBSS(Hank′s平衡鹽溶液)中達100ng/ml濃度，以HBSS稀釋至10ng/ml用于趨化性試驗，稀釋至25-50ng/ml用于評價[Ca2+]i細胞修飾的試驗。
在趨化性試驗(按照W.Falket等，免疫學方法雜志33，239，1980)中采用5mm孔徑的PVP濾膜和適合進行48份相同試驗的樹脂玻璃顯微照相機。顯微照相機有一片48孔的樹脂玻璃片，各孔容量為25μl，配有一塊48孔的蓋玻片，這樣，蓋上蓋玻片并旋緊后即在顯微照相機內形成50μl的上部空間。
在含有PMN懸浮液的上部和下部的孔內加入相同濃度的被測化合物，上部孔內含有PMN懸浮液，下部孔內含有載體，其中加有或沒有IL-8(或其他刺激劑)。
例如，10-6-10-11M濃度的R(-)-N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺(DF1681)，劑量依賴性地抑制IL-8(10ng/ml)誘導的趨化性。結果表示為遷移PMN的數量，是3次獨立實驗的平均值±S.D.，參見
圖1中的柱狀圖。
(S)(+)-N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺和R(-)-N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺的IC50為10-7-10-8M。
圖2中的結果證實本發明化合物選擇性地抑制IL-8誘導的趨化性，而不抑制C5a(10-9)或f-MLP(10-8)誘導的趨化性，至少10-6-10-7M濃度的DF1681是如此[結果表示為遷移PMN的數量，是3次獨立實驗的平均值±S.D.]。
按照C.Bizzarri等(血液86，2388，1995)所述的實驗模型測定胞質溶膠[Ca2+]i變化用貼附有PMN的玻片，加入1μMfura-2AM來實時測定[Ca2+]i的變化。將PNM細胞離心產物重懸在含5％FCS(胎牛血清)的RPMI1640培養液中達3×106個細胞/ml，然后(平板)接種到25mm直徑的圓形玻片上，將其在37℃培養箱內放置30分鐘。用BBS(平衡鹽溶液)洗滌3次去除非貼附細胞后，所有貼附細胞繼續培養至多4小時，然后加入Fura-2AM。
例如，后文表格中記錄了用3名不同供血者的人PMN白細胞，用R(-)-N-2-[3-(苯甲酰基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺(DF1661)和R(-)-N-2-[(4-異丁基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺(DF1681)所得的結果。據信，當刺激物導致[Ca2+]i高出基線值34％時，這些白細胞被對IL-8是有反應。
表IL-8(50ng/ml) 254±23(n＝20)DF1661(10-6M)+IL-8(50ng/ml) 184±16(n＝10)DF1681(10-6M)+IL-8(50ng/ml) 159±16(n＝10)以應答細胞平均值和標準差(SEM)為反應數據，表示為與[Ca2+]i基線值相比的百分比；其中n是試驗重復次數。在這些試驗中，不同組中無應答細胞百分比互不相同只用IL-8處理的組為30％，DF1661預處理組為40％，DF1681預處理組則為70％。
本發明的通式(1)所示的N-2-芳基丙酰基磺酰胺具有能夠“體外”抑制白介素-8激發的PMN人白細胞趨化性的特征。本發明的酰基磺酰胺劑量依賴性地抑制PMN人白細胞趨化性，IC50(具有50％作用的劑量)為10-7-10-9M，并對IL-8誘導的趨化性具有顯著的選擇性和特異性。要“體外”抑制其他趨化因子(5Ca，細菌來源或合成的甲酰肽(f-LMP))誘導的趨化性，則濃度需提高1至2個數量級。本發明化合物能夠抑制受IL-8刺激的人PNM內的胞內[Ca2+]i升高，這一升高與人PMNL的活化有關(J.H.Liu等，傳染病雜志166，1089(1992))，這證明了本發明化合物的特異性。
與甲基的絕對構象無關，本發明化合物對CO和PG的產生沒有顯著作用。實際上，在LPS刺激的鼠巨噬細胞內(1mg/ml)，本發明化合物(評價濃度為10-5-10-7M)對PGE2產生的抑制通常低于統計學顯著性，而且從未超過基線值的10-15％。
(LPS刺激的)鼠巨噬細胞并非增強促進嗜中性白細胞活化和趨化性以及IL-8合成的TNFα合成的適宜刺激物，此時，這一非相關性PGE2合成抑制是本發明相比部分2-芳基-丙酸的優點。在由過氧化氫刺激的TNF-α合成中也存在這種作用(TNF-α合成的非增強作用)。
根據以上實驗證據，以及，已知白介素-8(IL-8)及其同類物參與牛皮癬(B.J.Nickoloff等，美國病理學雜志138，129，1991)、類風濕性關節炎(M.Selz等，臨床研究雜志87，463，1991)，潰瘍性結腸炎(Y.R.Mahkla等，臨床科學82，273，1992)，急性呼吸機能不全(ARDS)和原發性纖維變性(P.C.Carre等，臨床研究雜志88，1802，1991和E.J.Miller等，美國呼吸疾病論述，同上)，血管球性腎炎(T.Wada等，實驗醫學雜志180，1135，1994)，本發明化合物可用于以上疾病的治療。
為了以上治療目的，可用常規技術和賦型劑，例如“Remington藥學手冊”，Mack出版社，第18版，1990所述，將本發明化合物配制成藥物組合物。
本發明的組合物的給予形式可以是肌內或靜脈推注，皮膚病制劑(霜劑、液劑、噴霧劑和藥膏)，以及以膠囊、片劑、糖漿、控釋劑等形式口服。
平均日用量取決于多種因素，例如疾病的嚴重程度和患者情況(年齡、性別和體重)。該劑量一般為每日1或數毫克(mg)至1500mg本發明化合物，可以分多次給予。因為本發明化合物的毒性很低，所以，可以給予更高的劑量，甚至可以用于長期治療。
以下實施例進一步說明了本發明。
制備按照J.M.Sprague和T.B.Jonson在J.A.C.S.59，1837，1937和E.Miller等在ibidem62，2099(1940)中所述的方法制備烷基-、芳基烷基-、雜芳基烷基-磺酰胺和通式為CH3-(CH2)ni-(OCH2-CH2)mi-SO2NH2的烷氧基-聚氧乙烯磺酰胺，其中，ni是0或1，mi是整數1-3。
因此，例如，2-乙氧基乙基氯與略微過量的硫脲在醇中回流反應，可得到2-鹽酸2-乙氧基乙基硫脲。在該鹽的溶液中在25℃冷卻并通入Cl2，于是分離出黃色油狀物，將該物質溶于乙醚，以硫酸鈉干燥。揮發去除溶劑，得到2-乙氧基乙基磺酰氯，將其緩慢加入氫氧化銨溶液，得到2-乙氧基乙磺酰胺，根據需要，可對其進行稀釋醇重結晶或柱層析純化。采用以上過程制備了以下化合物2-甲氧基-乙磺酰胺，2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙磺酰胺或3，6-二噁-庚基磺酰胺；2-(2-乙氧基-乙氧基)-乙磺酰胺或3，6-二噁-辛基磺酰胺；3，6，9-三噁-癸基磺酰胺；3，6，9-三噁-十一烷基磺酰胺。
實施例1制備N-酰基磺酰胺的一般方法A)通式(2)酸的氯化物與通式(3)磺酰胺陰離子反應R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺a)制備通式(2)酸的氯化物R(-)-2-(4-異丁基苯基)丙酸(R-異吡洛芬，4g，0.019mol)的亞硫酰氯(7.4ml)懸浮液回流4小時；然后室溫下自然冷卻。真空蒸發過量的亞硫酰氯。用數滴無水二噁烷洗滌殘留物數次并真空蒸發溶劑，以去除最后的微量亞硫酰氯。得到4.66g(0.019mol)R(-)-2-(4-異丁基苯基)丙酰氯黃色油狀物，將其溶于數ml無水四氫呋喃(THF)中。
b)制備磺酰胺陰離子將甲磺酰胺(2.3g，0.0243mol)加入叔丁氧鉀(2.73g，0.0244mol)的THF(28ml)懸浮液中，混合物室溫下攪拌30分鐘。然后，攪拌加入R(-)-2-(4-異丁基)丙酰氯(4.66g，0.019mol)溶液，反應混合物室溫下攪拌過夜。
過濾出分層的無機鹽，真空蒸發去除溶劑，將油狀殘留物分配在CH2Cl2(30ml)和磷酸二氫鈉飽和溶液之間。用水洗滌(2×10ml)有機相，用CH2Cl2萃取(2×10ml)水相。合并有機萃得液，以硫酸鈉干燥，并真空蒸發溶劑，然后，在油狀殘留物的無水MeOH(10ml)溶液中加2微滴濃硫酸，將微量未轉化的R(-)-2-(4-異丁基苯基)丙酸都酯化成甲酯。混合物在室溫下放置過夜，小心地真空蒸發溶劑，將殘留物分配在水(10ml)和二氯甲烷(25ml)之間。棄水相，用NaHCO3飽和溶液萃取(2×20ml)有機相。合并堿相，用濃鹽酸酸化，并用CH2Cl2萃取(3×15ml)。常規洗滌至中性后，以Na2SO4干燥合并的有機萃得液，真空蒸發溶劑后得1.86g(0.0066mol)R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺m.p.103-105℃(dec.)；[α]D＝-68°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.3(d，2H J＝8Hz)；7.09(d，2H J＝7Hz)；3.42(q，1H，J＝8Hz)；2.8(s，3H)；2.45(d，2H，J＝7Hz)；1.55(m，1H)；1.3(d，3H，J＝Hz)；0.95(d，6H，J＝7Hz)。
B)在縮合劑存在下，通式(2)酸與通式(3)磺酰胺直接縮合將N，N-二甲基氨基吡啶(2.363g，0.0194mol)，鹽酸N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺(3.721g，0.0194mol)和甲磺酰胺(1.845g，0.0194mol)依次加入R-(-)-異吡洛芬(4g，0.0194mol)的無水CH2Cl2溶液(30ml)；混合物攪拌過夜。蒸發溶劑，殘留物用乙酸乙酯(40ml)皂化，合并的有機相用水(15ml)和20％檸檬酸水溶液(2×10ml)洗滌，并用硫酸鈉干燥，然后蒸發溶劑，得到2.2g(0.0076mol)R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺m.p.103-105℃(dec.)；[α]D＝-68°(c＝1；CH3OH)。
實施例2按照實施例1的方法，制備以下混合物S(+)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]甲磺酰胺m.p.；109-111℃(dec.)；[α]D＝+73°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ7.65(bs，1H，NH)；7.2-7.0(m，4H)；3.65(q，1H，J＝8Hz)；3.25(s，3H)；2.5(d，2H，J＝7Hz)；1.85(m，1H)；1.5(d，3H，J＝8Hz)；0.95(d，6H，J＝7Hz)。
R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺淺黃色油狀物；[α]D＝-73°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ8.25(bs，1H，NH)；7.80-7.35(m，9H)；3.80(q，J＝7Hz，1H)；3.21(s，3H)；1.55(d，J＝7Hz，3H)。
S(+)-N-[2-(3-苯甲酰基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺淺黃色油狀物；[α]D＝+67°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ8.5(bs，1H，NH)；7.9-7.45(m，9H)；3.75(q，J＝7Hz，1H)；3.21(s，3H)；1.55(d，J＝7Hz，3H)。
S(+)-N-[2-(2-氟-4-聯苯基)丙酰基]-甲磺酰胺m.p.130-132℃(dec.)；[α]D＝+44°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ7.8(bs，1H，NH)；7.50-7.30(m，5H)；7.05-6.90(m，3H)；3.65(q，1H，J＝7Hz)；3.20(s，1H)；1.50(d，3H，J＝7Hz)。
R(-)-N-[2-(2-氟-4-聯苯基)丙酰基]-甲磺酰胺m-p.106-108℃；[α]D＝-42°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ7.9(bs，1H，NH)；7.50-7.30(m，5H)；7.10-6.95(m，3H)；3.65(q，1H，J＝7Hz)；3.20(s，1H)；1.50(d，3H，J＝7Hz)。
實施例3R(-)-N-甲基，N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺N-酰基磺酰胺的酸性足以按以下過程與重氮烷反應生成N-酰基-N-烷基磺酰胺。
將冰浴冷卻(4℃)的R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(0.3g，0.001mol)的無水乙醚溶液滴加到0.67N的重氮甲烷的乙醚溶液中，直至得到穩定的黃色。向以上冷卻溶液中加入數滴冰醋酸以破壞過量的重氮甲烷。溶液在室溫下靜置，蒸發去除溶劑。將殘留物重溶于甲苯，真空蒸發去除微量乙酸。柱層析(正己烷/CH2Cl27∶3)純化油狀殘留物，得到R(-)-N-甲基-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺(0.24g，0.00076mol)，無色油狀物。[α]D＝-60°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ7.2-7.09(m，4)；4.15(q，1H，J＝8Hz)；3.2(s，3H)；2.9(s，3H)；2.45(d，2H，J＝7Hz)；1.75(m，1H)；1.35(d，3H，J＝8Hz)；0.95(d，6H，J＝7Hz)。
按照實施例1的方法，用等摩爾量的N-甲基-甲磺酰胺代替甲磺酰胺，可制得相同的化合物。
實施例4R(-)-N-(2-[3-(1ξ-羥基-1ξ-苯基)甲基]-苯基)丙酰基]-甲磺酰胺在0.5g N-(R(-)-2-[3-(苯甲酰基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺的乙醇溶液中加入0.05ml三乙基胺和催化量的5％Pd/C，將此溶液保持在H2氣氛下，直至吸收掉1mol當量氣體。用celite濾掉催化劑，將洗脫液蒸干。將殘留物分配在乙醚和5％NaH2PO4水溶液之間，從有機相可制得0.4g R(-)-N-(2-[3-(1ξ-羥基-1ξ-苯基)甲基]-苯基)丙酰基]-甲磺酰胺。
實施例5R(-)-N-2[3-(芐基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺；在0.5g N-(R(-)-2-[3-(苯甲酰基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺的乙醇溶液中加入0.05ml三乙基胺和催化量的5％Pd/C，將此溶液保持在H2氣氛下，直至吸收掉至少2mol當量氣體。用celite濾掉催化劑，將洗處液蒸干。將殘留物分配在乙醚和5％NaH2PO4水溶液之間，從有機相可制得0.4g R(-)-N-2[3-(芐基苯基)丙酰基]-甲磺酰胺。
實施例6(±)N-2-[(5′-苯甲酰基-2′-乙酸基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺6g(±)4-乙酸基-3-(1′-甲基-2′-丙烯-1-基)-二苯甲酮的CH2Cl2(125ml)溶液中加入等體積的水，在此溶液中邊劇烈攪拌邊依次加入冰醋酸(12ml)，Aliquat336(0.37g)，和分成小份的高錳酸鉀(總量9.5g，0.060mol)。混合物室溫下攪拌20小時，直至起始物完全消失。加入偏亞硫酸氫鈉水溶液(7.2g溶于水，15ml)使反應混合物褪色，再加入CH2Cl2(10ml)，于是分層。有機相用鹽水(2×25ml)洗滌，并用硫酸鈉干燥，真空蒸發溶劑后得到高純度的6.2g(±)N-2-[(5′-苯甲酰基-2′-乙酸基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺油狀物。HPLC(H2O/CH3CN t＝0 60 40，t＝120100，t＝15 0 100。Bondapak C18 20cm，l＝254nm，室溫，5.5分鐘)。TLC(CH2Cl2/CH3OH/9∶1)Rf＝0.2；1H-NMR(CDCl3)δ7.95(s，1H)；7.85(dd，2H，J′＝7Hz)；7.75(dd，1H，J′＝7Hz)；7.6(m，1H)；7.45(7，2H，7Hz)；7.25(s，1H)；3.9(q，1H，8Hz)；2.35(s，3H)；1.5(d，3H，J＝8Hz)。
將該化合物用在實施例1的方法中，可制得(+)N-2-[(5′-苯甲酰基-2′-乙酸基苯基)-丙酰基]-甲磺酰胺。
實施例7L(±)賴氨酸R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]甲磺酰胺鹽將L(+)賴氨酸(129mg，0.88mmol)的水溶液(1.3ml)加入R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]甲磺酰胺(250mg，0.88mmol)的1ml甲醇溶液。蒸發去除溶劑，殘留物溶于乙醚(5ml)，室溫下攪拌過夜。氮氣氛下迅速濾出分離產生的強吸濕性晶體，用無水乙醚洗滌濾得物，50℃真空干燥2小時，得到360mg R(-)-N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]甲磺酰胺的L(±)賴氨酸鹽，呈淺黃色粉末狀。[α]D＝-17.3°(c＝1.15；CH3OH)；1H-NMR(D2O)δ7.30(dd，4H，J＝8Hz)；3.77(t，1H，J＝7Hz)；3.65(q，1H，J＝7Hz)；(m，4)；4.15(q，1H，J＝8Hz)；3.2(s，3H)；2.9(s，3H)；2.45(d，2H，J＝7Hz)；3.05(m，5H)；2.52(d，2H，J＝7Hz)；1.92(m，2H)；1.75(m，2H)；1.50(m，3H)；1.40(d，3H，J＝7Hz)；0.90(6H，d，J＝7Hz)。
實施例8R(-)-2-[(4′-異丁基)苯基]丙酰胺用28％NH4OH水溶液代替實施例1中的磺酰氨基陰離子，按以下方法制備通式(2)酸的酰胺。將1g R(-)-2-[4-異丁基-苯基]丙酰氯溶于無水乙腈(1.5ml)的溶液滴加到28％NH4OH水溶液(3ml)中，冷卻至0-5℃，滴加速度保持反應混合物溫度不超過5℃。化合物室溫攪拌1小時，減壓蒸發溶劑，將所得殘留物溶于乙酸乙酯(5ml)。將該溶液冷卻至0-4℃，析出白色晶體沉淀，過濾并真空干燥后得到(1.218g；5.93mmol)R(-)-2-[(4′-異丁基)苯基]丙酰胺m.p.125-127℃；[α]D＝-28°(c＝1；CH3OH)；1H-NMR(CDCl3)δ7.20-7.05(m，4H)；5.25(bs，2H，NH2)；3.6(q，J＝8Hz，1H)；2.5(m，2H)；1.9(m，1H)；1.55(d，J＝8Hz，3H)；0.93(d，J＝7Hz，6H)。
實施例9鹽酸R(-)N-[2-(4-異丁基苯基)丙酰基]-(2-氨基)乙基磺酰胺按照Winterbottom等(美國化學協會雜志69，1393-1401(1947))所述的方法，將21.4g鄰苯二甲酸酐(0.145mol)加入氨基乙磺酸(17g，0.137mol)和乙酸鉀(14.2g，0.145mol)在冰醋酸(48ml)中所成的懸浮液中，回流加熱。加熱持續至反應物完全消失(2.5小時)；冷卻至0-5℃后產生沉淀，過濾分離，用冰醋酸和無水乙醇洗滌，真空下空氣干燥(50℃)，得到31.2g 2-鄰苯二甲酰亞氨基乙磺酸鉀(m.p.＞300℃；1H-NMR(D2O)d7.85(m，4H)，4.05(t，3H，J＝8Hz)，5.25(t，2H，J＝8Hz)。5g該鹽在苯(50ml)中的懸浮液通過共沸蒸餾干燥，在其中加入2.56g五氯化磷(0.015mol)，回流1小時。然后加入第二份五氯化磷(2.56g，0.015mol)。混合物再回流90分鐘，然后真空和減壓蒸發溶劑和反應物。混合物再回流1.3小時，冷卻至室溫，減壓蒸發溶劑。用30g精細研磨的冰吸收殘留物，生成細小固體(過濾，水洗，干燥)狀的2-鄰苯二甲酰亞氨基乙磺酰氯(3.71g，m.p.＝158-159℃)。
將乙腈(15ml)中的28％氨溶液(15.5ml)滴加到2-鄰苯二甲酰亞氨基乙磺酰氯的乙腈(30ml)溶液中，冷卻至0-4℃，混合物在0-4℃攪拌30分鐘，蒸發溶劑，將殘留物加入熱水，析出沉淀2-鄰苯二甲酰亞氨基乙磺酰胺(0.8g)(m.p.＝206-209℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.95(m，4H)，7.15(bs 2H，NH2)，4.05(t，3H，J＝8Hz)，3.35(t，2H，J＝8Hz))。
在惰性氣氛下，將0.75g(0.00295mol)該化合物加入叔丁氧鉀(0.331g，0.00295mol)的無水THF(7ml)懸浮液中；攪拌1小時，然后加入R(-)2-(4-異丁基-苯基)-丙酰氯(0.47g酸(0.00227mol)與亞硫酰氯反應新鮮制備的)的無水THF(2ml)溶液。混合物室溫下攪拌24小時；濾出固體殘留物，將溶劑蒸干，將殘留物分配在水和乙酸乙酯之間。合并有機相，用水(2×25ml)和鹽水(25ml)洗滌，用硫酸鈉干燥，真空蒸發溶劑，得到油狀殘留物，快速層析(洗脫劑CH2Cl2/CH3OH98∶2)純化，得到透明油狀物，即0.6g N-[R(-)2-(4-異丁基-苯基)-丙酰基]-2-鄰苯二甲酰亞氨基-乙磺酰胺。1H-NMR(CDCl3)δ8.05(m，4H)，7.15(m，4H)，7.05(bs，1H，NH)，4.05(t，3H，J＝8Hz)，3.35(m，3H)，2.50(d，2H，J＝7Hz)，1.92(m，1H)，1.20(d，3H，J＝8Hz)，0.95(d，6H，J＝7Hz)。
在該化合物(0.5g，1.12mmol)的乙醇(4ml)溶液中加入85％水合肼(0.4ml)，回流1小時。真空蒸發去除溶劑后，用水稀釋，用2N鹽酸酸化，過濾分離鄰苯二甲酰肼。將濾液蒸干，得到0.332g鹽酸R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)-丙酰基]-(2-氨基)乙磺酰胺，又名鹽酸R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)-丙酰基]-牛磺酰胺。
實施例10按實施例9的方法，用按照H.McIlwain(化學協會雜志75，1941)所述方法制備的N′-芐酯基氨基乙磺酰胺和選自以下所述的2-芳基丙酸氯化物R(-)2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酸，R(-)2-(3-苯氧基-苯基)-丙酸，R(-)2-[4-(1-氧-2-異二氫氮雜茚基)苯基]丙酸，2-(5-苯甲酰基噻吩-2-基)丙酸，2-(4-噻吩甲酰基-苯基)-丙酸和R(-)2-(4-異丁基-苯基)丙酸，分別獲得以下化合物R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯氧基苯基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-[4-(1-氧-2-異二氫氮雜茚基)苯基]丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；N-[2-(5-苯甲酰基-噻吩-2-基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；N-{2-[4-(2-噻吩甲酰基-苯基)]-丙酰基}-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-2-[4-(異丁基-苯基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺。
實施例112g R(-)-N-2-[4-(異丁基-苯基)-丙酰基]-(2-芐酯基氨基)-乙磺酰胺和0.1g鈀黑在水(20ml)、甲醇(20ml)和乙酸(6ml)的混合物中形成懸浮液，氫氣氛下攪拌；30分鐘后，二氧化碳放氣停止。過濾懸浮液，去除Pd，真空蒸發溶劑。NaOH存在下，將殘留物保持在真空中。將此殘留物溶于乙醇(5ml)，用HCl飽和的乙醇溶液處理，分離并過濾收集R(-)-N-[2-[4-(異丁基-苯基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺。
按實施例10的方法，使用芐酯基氨基乙磺酰亞胺，得到以下以下化合物的鹽酸鹽R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯氧基-苯基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；R(-)-N-[2-[4-(1-氧-2-異二氫氮雜茚基)苯基]丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；N-[2-(5-苯甲酰基-噻吩-2-基)-丙酰基]-(2-氨基)-乙磺酰胺；N-{2-[4-(2-噻吩甲酰基-苯基)]-丙酰基}-(2-氨基)-乙磺酰胺；實施例12在實施例1的方法中，使用選自以下所述的磺酰胺環己基磺酰胺，己基磺酰胺，十二烷基磺酰胺或十六烷基磺酰胺，對氰基苯基甲磺酰胺，3-氰基-1-丙磺酰胺，2-甲氧基乙磺酰胺，3，6-二噁-庚基磺酰胺，3，6-二噁-辛基磺酰胺，3，6，9-三噁-癸基烷基磺酰胺，3，6，9-三噁-十一烷基磺酰胺，得到以下化合物R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-環己基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-己基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-十二烷基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-十六烷基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-對氰基苯基甲磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-3-氰基-1-丙磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-2-甲氧基乙磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-3，6-二噁-庚基磺酰胺；
R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-3，6-二噁-辛基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-3，6，9-三噁-癸基烷基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-3，6，9-三噁-十一烷基磺酰胺。
如有必要，當選自R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-對氰基苯基甲磺酰胺和R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-3-氰基-1-丙磺酰胺的氰基磺酰胺在含HCl汽體的乙醇中，在氧化鉑存在下氫化時，可得到以下磺酰胺的鹽酸化物R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-對氨基-甲基苯基甲磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-4-氨基-1-丁磺酰胺。
實施例13在實施例1方法中，用選自2-二甲基氨基-乙基磺酰胺、2-(哌啶-1-基)-乙基磺酰胺和2-(嗎啉-4-基)-乙基磺酰胺的磺酰胺，得到R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-2-二甲基氨基-乙基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-2-(哌啶-1-基)-乙基磺酰胺；R(-)-N-[2-(4-異丁基-苯基)丙酰基]-2-(嗎啉-4-基)-乙基磺酰胺。
實施例14在實施例1的方法中，用R(-)-2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰氯和選自三氟甲基磺酰胺、鄰甲苯基磺酰胺、3-吡啶基磺酰胺和4-吡啶基乙磺酰胺的磺酰胺得到以下化合物R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]-三氟甲基磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]-鄰甲苯基磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]-(3-吡啶基)-磺酰胺；R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]-2-(4-吡啶基)-乙磺酰胺。
實施例15在0.35g R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]-三氟甲基磺酰胺在5ml吡啶中所成的溶液中加入0.11g鹽酸羥基胺。混合物室溫反應12小時，然后將該溶液滴加到40ml 2N H2SO4中。用乙酸乙酯萃取(3×8ml)生成的沉淀。合并有機相，用水洗至中性，以硫酸鈉干燥并蒸干，得到0.36g R(-)-(Z，E)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]三氟甲基磺酰胺肟。
用以上方法，用R(-)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]-甲磺酰胺，可制得R(-)-(Z，E)-N-[2-(3-苯甲酰基-苯基)丙酰基]甲磺酰胺肟。
實施例16R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-煙酰基-氨基)乙磺酰胺煙酸(0.565g，4.6mmol)的亞硫酰氯(3.07ml，42.3mmol)溶液回流3小時，冷卻至室溫并真空干燥后，得到淺黃色固體狀的煙酰氯(0.65g)。將該煙酰氯(0.64g，4.52mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(DMF，1ml)中所成的混合物滴加到R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-氨基)乙磺酰胺(0.6g，1.92mmol)和三乙基胺(1ml)在DMF(10ml)中所成的溶液中。所得混合物室溫攪拌24小時。真空蒸發DMF，柱層析(洗脫液CHCl3/CH3OH/環己烷/NH4OH 60∶14∶24∶2)純化粗制殘留物，得R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-煙酰基-氨基)乙磺酰胺[α]D＝-10.7°(c＝0.15，EtOH)；呈無色油狀(0.56g，1.34mmol)，MW＝417.53，MS＝m/z 418.5(ES)1；TLC(CHCl3/CH3OH/環己烷/NH4OH 60∶14∶24∶2)Rf＝0.4。1H-NMR(CD3OD)δppm9.2-9.0(bs，1H，NH)；8.7-8.5(bs，1H，NH)；8.4(d，1H，J＝8Hz)；7.9(m，1H)；7.5-7.4(m，1H)；7.35(s，1H)；7.25(d，2H，J＝8Hz)；7.05(d，2H，J＝8Hz)；3.8-3.5(m，5H)；2.5(d，2H，J＝7Hz)；1.95-1.8(m，1H)；1.45(d，3H，J＝7Hz)；0.9(d，6H，J＝7Hz)。
在以上方法中，用異煙酸和甲基吡啶酸代替煙酸，得到以下化合物R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-異煙酰基-氨基)乙磺酰胺；R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-甲基吡啶酰基-氨基)乙磺酰胺。
實施例17R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-羧基羰基氨基)乙磺酰胺將草酸乙酯酰氯(0.62g，4.52mmol)的DMF(1ml)溶液滴加到攪拌著的R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-氨基)乙磺酰胺(0.6g，1.92mmol)和三乙基胺(1ml)在DMF(10ml)中所成的溶液中。所得化合物在室溫下攪拌24小時。真空蒸發DMF，粗制殘留物以水稀釋，以乙醚萃取(3×10ml)。收集有機萃得液，用水(2×15ml)、鹽水(20ml)洗滌，硫酸鈉干燥，真空蒸發后得無色油狀R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-乙基草酰基氨基)乙磺酰胺(0.51g，1.25mmol)。
在以上R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-乙基草酰基氨基)乙磺酰胺(0.5g，1.22mmol)的二噁烷(1.55ml)溶液中加入1N NaOH(1.55ml)，室溫下攪拌過夜。真空蒸發二噁烷，然后用水稀釋水性殘留物；加4N H2SO4，直至pH2；用二氯甲烷萃取(4×15ml)水相，收集有機相，用水(2×15ml)和鹽水(15ml)洗滌，硫酸鈉干燥，真空蒸發，得到R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-羧基羰基氨基)乙磺酰胺油狀物(0.426g，1.1mmol)；TLC(CHCl3/CH3OH/H2O 65∶25∶4)Rf＝0.5；[α]D＝-60°(c＝1，CH3OH)；1H-NMR(CD3OD)δppm10.55-10.0(bs，1H，COOH)；7.25(d，2H，J＝8Hz)；7.05(d，2H，J＝8Hz)；3.8-3.5(m，5H)；2.5(d，2H，J＝7Hz)；1.95-1.8(m，1H)；1.45(d，3H，J＝7Hz)；0.9(d，6H，J＝7Hz)。
實施例18R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-芐氧基羰基氨基)乙磺酰胺將氨基乙磺酸(1g，8mmol)溶于2N NaOH(4.3ml)，冰/水浴冷卻后，同時滴加4N NaOH(2.14ml)和芐氧基羰基氯(3.27ml，8mmol)的甲苯(3ml)溶液。然后，混合物在0-5℃攪拌1小時。加入乙醚終止反應。混合物于是分層。將水相冷卻至0-5℃，加入37％HCl直至pH2。用乙酸乙酯萃取(3×10ml)酸性相，收集有機萃得液，用水(2×15ml)和鹽水(15ml)洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發，得2-(N-芐氧基羰基氨基)乙磺酸粗產物，乙醚研磨得白色固體純產物(1.46g，5.64mmol，得率70.5％)。
將2-(N-芐氧基羰基氨基)乙磺酸(0.6g，2.31mmol)懸浮在無水甲苯(6ml)中，加入PCl5(0.65g，3.11mmol)。該混合物回流2小時，直至反應物完全溶解。室溫冷卻后，真空蒸發溶劑，得到粗制2-(N-芐氧基羰基氨基)乙磺酰氯，其程度足以進行下一步反應。
將粗制2-(N-芐氧基羰基氨基)乙磺酰氯溶于乙腈(10ml)。所得溶液在冰/水浴中冷卻，滴加1∶1的28％NH4OH(5ml)和乙腈(5ml)。攪拌30分鐘后，真空蒸發溶劑，粗制殘留物在甲醇中重結晶，得到白色粉末狀2-(N-芐氧基羰基氨基)乙磺酰胺(0.51g，1.96mmol)。
將R(-)異吡洛芬(0.32g，1.55mmol)溶于無水二氯甲烷(7.5ml)，在其中加入N，N-二甲基氨基吡啶(0.19g，1.55mmol)和二環己基碳二亞胺(0.32g，1.7mmol)，所得混合物攪拌30分鐘。然后，加入2-(N-芐氧基羰基氨基)乙磺酰胺(0.4g，1.55mmol)，將該混合物攪拌過夜。濾出沉淀的N，N-二環己基脲，濾液經真空蒸發得粗制殘留物，以乙腈稀釋；濾出第二批N，N-二環己基脲，濾液經溶劑蒸發后用二氯甲烷稀釋。有機相用2N HCl(2×10ml)、鹽水(15ml)洗滌，硫酸鈉干燥，真空蒸發，得白色粉末狀R(-)2-(4′-異丁基)苯基丙酰基-(2″-N-芐氧基氨基甲酰基氨基)乙磺酰胺(0.44g，0.98mmol)；m.p.＝107-109℃；TLC(CH2Cl2/CH3OH 98∶2)Rf＝0.2；[α]D＝-47.4°(c＝1，EtOH)；1H-NMR(CD3OD)δppm7.45-7.30(m，5H)；7.25-7.05(m，5H，NH)；5.4-5.3(bs，1H，NH)；5.1(s，2H)；3.75-3.5(m，5H)；2.45(d，3H，J＝7Hz)；1.95-1.8(m，1H)；1.5(d，3H，J＝7Hz)；0.9(d，6H，J＝7Hz)。
權利要求
1.R(-)-2-[(4-異丁基)苯基]丙酰胺作為白介素8誘導的嗜中性白細胞趨化性和脫粒作用抑制劑的用途。
全文摘要
通式(1)所示的化合物可用于預防和治療因多形核嗜中性白細胞(PMN白細胞)在炎癥部位惡性聚集造成的組織損傷，化合物中的R和R
文檔編號A61K31/4035GK1615833SQ20041008563
公開日2005年5月18日 申請日期1999年10月14日 優先權日1998年10月23日
發明者R·貝爾蒂尼, C·比薩里, V·薩巴蒂尼, S·波熱焦, G·卡塞利, M·阿萊格蒂, M·C·切斯塔, C·A·甘多利, M·曼托瓦尼, F·科洛塔 申請人:冬姆佩股份公司