專利名稱：色滿類化合物hef-04用于舒張血管平滑肌的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，涉及色滿類化合物HEF-04用于舒張血管平滑肌 的用途。
技術背景近年來，抗高血壓藥物的研究發展迅速，特別是P受體阻滯劑、鈣拮抗劑 和血管緊張素轉換酶抑制劑等新型降壓藥的問世，從根本上改變了高血壓藥物 治療的面貌，高血壓發病率高，可以造成靶器官的損害，出現腦卒中、心絞痛、 心肌梗死、心力衰竭、腎功能衰竭等嚴重合并癥，目前各類降壓藥均有不同程 度的不良反應，因此，如果能找到一種選擇性比較強，不良反應較少的降壓藥 物，應用前景會更好。色滿類化合物HEF-04的化學名稱是7-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]色滿鹽酸鹽 (7-[2-(4-morpholinyl)ethoxy]chroman hydrochloride )，是由沈陽藥禾4大學有機化 學實驗室胡春教授課題組首次合成的藥物，并已對抗血小板凝聚活性進行了初 步考察，結果表明，該化合物有較強的抗血小板凝聚活性，但至今未見有關 HEF-04舒張血管平滑肌作用的報道，申請者經多方面實驗篩選，首次發現該化 合物具有舒張血管平滑肌作用。色滿類化合物HEF-04的化學名稱是7-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]色滿鹽酸鹽 其合成方法如下室溫攪拌下，將70%的高氯酸溶液66 mL滴加到2'，4'-二羥基苯乙酮100 g 與580 mL原甲酸三乙酯的混懸溶液中。反應液顏色逐漸加深為棕紅色，并且大 量放熱。反應液冷卻至室溫后，加入無水乙醚1750mL,立即產生大量沉淀，抽 濾，濾餅揮干乙醚，加熱水1000 mL回流5分鐘后，冷卻，析出大量沉淀，靜 置過夜，得到紅色粗品31.5g,乙醇500mL重結晶，得到7-羥基色酮淺粉色晶 體16.7g,收率15.7%。 mp212-214。C。將7-羥基色酮16.94 g(O.lmol),溶于無水乙醇300 mL，加入腦Pd/C 1.75 g,充氫氣至3.5MPa,在7(TC加熱攪拌，當壓力低于2.5 MPa時補充氫氣，反 應6小時后，不再吸氫，冷卻，過濾，蒸去乙醇得棕色油狀物，用環己烷萃取， 蒸干溶劑得到7-羥基色滿白色固體8.73g,收率55.64°/。。 mp87-89。C。將7-羥基色滿0.75 g(5 mmol)、溴乙基嗎啉氫溴酸鹽1.37 g(5 mmol)、碘化 鉀0.81 g(5 mmol)、無水碳酸鉀6.65 g(0.05 mol)混合，加入干燥丙酮20 mL ,按 通法ni，硅膠柱層析分離(石油醚:乙酸乙酯=1:2)得無色透明液體，用無水乙醚 溶解，通入HC1氣體產生白色固體，抽濾，干燥后稱重0.39g,收率:26%。 mp 156-158。C。MS: 42, 56, 65, 77, 91, 100, 113(114), 263。'H-NMR (CDCl3)5(ppm):1.97(2H， m), 2.72(2H, t), 3.07 (2H, m), 3.43(2H, m)， 3.55(2H, d), 3.98(2H, m), 4.16(2H, t), 4.28(2H, m)， 4.52(2H, t), 6.3 2(1H, d, 7=2.5Hz), 6.40(1H, dd， J產2.5Hz,力-8.3Hz)， 6.94(1H， d， ^8.3Hz)， 13.45(1H，s)。
發明內容
本發明對關于色滿類化合物HEF-04提供了舒張血管平滑肌用途。血管平滑肌強烈收縮致痙攣可引起多種疾病，如高血壓及其帶來的多 種并發癥，所以研究血管平滑肌舒張藥有很大的現實意義，對治療高血壓 從而減少對靶器官的損害，降低腦卒中、心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、 腎功能衰竭等嚴重合并癥等疾病的發病率均有指導意義和參考價值。我們的研究表明HEF-04能夠降低家兔離體血管平滑肌的張力，可舒 張由致痙劑氯化鋇、氯化鉀引起的血管平滑肌收縮，HEF-04舒張血管作用 可能與ATP敏感性鉀通道無關；HEF-04舒張血管作用與EDHF釋放增加有關或由血管內皮舒張因子之間相互作用所致。其最小有效量是10—5Mol/L.
圖1為HEF-04對致痙劑收縮的家兔離體血管舒張作用的量效曲線 (n=6)圖2為格列苯脲孵育前后HEF-04舒張由氯化鋇誘導收縮的離體血管 平滑肌量效曲線(n=6)圖3為格列苯脲孵育前后HEF-04舒張由高鉀液誘導收縮的離體血管 平滑肌量效曲線(n=6)圖4為亞甲基蘭孵育前后HEF-04舒張由氯化鋇引起的離體血管收縮 的量效曲線(n=6)圖5為亞甲基蘭孵育前后HEF-04舒張由高鉀引起的離體血管收縮的 量效曲線(『6)具體實施方式
新西蘭兔，雌雄兼用，體重2.0~2.5kg,沈陽藥科大學實驗動物中心 提供，合格證號scxk(遼)2009-0002。2、 儀器HSS-1(B)型恒溫浴槽、RM6240B型多道生理信號采集處理系統、JZJ01 型肌肉張力換能器、TG-328A電光分析天平、T-500型電子天平、醫用供氧 |(95%02+5%C02)、微量移液器IIIWKY型50-250nl3、 藥品與試劑氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KC1)、硫酸鎂(MgS(V7H20)、磷酸二氫鉀 (KH2P04)、無水氯化鈣(CaCl2)、碳酸氫鈉(NaHCCb)、葡萄糖(Glucose)、氯化鋇(BaCb) 實施例1:離體實驗1.1 HEF-04對致痙劑引起的家兔離體血管平滑肌張力的影響待標本張力穩定后，將基線調節到零，記錄一段波形后，向浴管內加 入致痙劑(氯化鋇2mg/ml，氯化鉀60mmol/L)誘導收縮，當達到最大收 縮后，充分洗凈標本,待標本恢復穩定后,再次用同濃度致痙劑誘導二次收 縮，當與前一次收縮基本一致時分別累積加入HEF-04 (10—5mol/L~43*10-3mol/L)。記錄數據，以致痙劑的最大收縮幅度為100%,舒張百分數 為縱坐標，HEF-04的對數濃度為橫坐標繪制舒張量效曲線，數據以平均值 士標準誤表示并求ECso值。圖1可知HEF-04能夠降低家兔離體血管平滑肌的張力，舒張由氯化 鋇、氯化鉀收縮的家兔離體血管平滑肌。 1.2 HEF-04舒張家兔離體血管平滑肌機制初探待標本張力穩定后，將基線調節到零，記錄一段波形后，向洛管內加 入氯化鋇(2mg/ml)誘導收縮，當達到最大收縮后，充分洗凈標本,待標本 恢復穩定后,再次用同濃度致痙劑誘導二次收縮，當與前 一次收縮基本一致 時分別累積加入HEF-04 ( lCT5molZL~3*10-3mol/L)。記錄數據，以氯化鋇 最大收縮幅度為100%,的對數濃度為橫坐標繪制舒張量效曲線，并求ECso 值。待標本張力穩定后，向浴管內分別加入格列苯脲(l(rSmol/L)、亞甲基 藍(l(T5mol/L)孵育10min,再加入氯化鋇(2mg/ml)誘導收縮，當達到最大收 縮后,分別累積加入HEF-04 ( l(T5mol/L ~ 3*l(T3mol/L )。記錄數據，以氯化鋇 的最大收縮幅度為100%， HEF-04的對數濃度為橫坐標繪制舒張量效曲線， 并求EDso值。比較兩次獲得的量效曲線圖形，對EDso值進行統計學檢驗， 判定差異顯著性以確定HEF-04作用與鉀通道、NO通路的關系。 1.2.1與鉀通道的關系圖2>圖3可知格列苯脲孵育前后，色滿類化合物HEF-04U0-5-3*10-3mol/L)舒張由致痙劑氯化鋇(2mg/mL)、高鉀引起的血管收縮量效 曲線均未發生顯著性改變，格列苯脲不影響HEF-04對血管的舒張作用。 1.2.2與NO通路的關系由圖4、圖5可知亞甲基藍孵育后沒有抑制色滿類化合物HEF-04舒張 血管的作用反而使致痙劑高鉀引起的血管收縮量效曲線左移，EC5o分別為 3.48±0.06和3.90士0.10并存在顯著性差異，但對氯化鋇引起的收縮量效曲 線無影響。小結色滿類化合物HEF-04有明顯的舒張血管作用，HEF-04舒張平滑肌的作用可能同ATP敏感鉀通道無關，可能通過血管舒張因子相 作用繼而 舒張血管或內皮細胞超極化因子(EDHF)釋放增加所致。
權利要求
1、色滿類化合物HEF-04在制備治療血管平滑肌痙攣性疾病藥物中的應用。
2、 根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述的血管平滑肌痙 攣性疾病包括高血壓及其高血壓帶來的腦卒中、心絞痛、心肌梗死、心力 衰竭、腎功能衰竭的合并癥。
3、根據權利要求1所述的用途，其特征在于其最小有效劑量為 10-5Mol/L。
全文摘要
本發明涉及醫藥技術領域，是色滿類化合物HEF-04用于舒張血管平滑肌的用途。在動物離體實驗中，HEF-04能夠舒張氯化鋇、氯化鉀收縮的家兔離體血管平滑肌，亞甲基藍孵育后沒有抑制色滿類化合物HEF-04舒張血管的作用反而使致痙劑高鉀引起的血管收縮量效曲線左移，孵育前后EC<sub>50</sub>值存在顯著性差異，文獻報道NO、PGI2的存在可減弱EDHF的產生，NO、PGI2受到抑制后，EDHF所致的內皮依賴性血管松弛作用更突出，提示HEF-04舒張血管作用可能與EDHF釋放增加有關或由血管內皮舒張因子之間相互作用所致。
文檔編號A61K31/5377GK101618041SQ200910012768
公開日2010年1月6日 申請日期2009年7月28日 優先權日2009年7月28日
發明者付守廷, 蘭惠瑜, 冰 王, 春 胡 申請人:沈陽藥科大學