本發明屬于中藥技術領域，尤其涉及一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法。
背景技術：
類風濕關節炎 (rheumatoid arthritis，RA) 是以關節慢性滑膜炎為主要表現的全身性自身免疫疾病，主要表現為對稱性、慢性、進行性多關節炎，是最常見和致殘率最高的骨關節疾病之一。RA 歸屬于中醫 “痹病” 范疇，其病機主要為正氣不足于先，復感風寒濕諸邪于后，痰濁瘀血，痹阻經絡，氣血閉阻，以致人體肌肉、筋骨失養，終至筋傷骨損。該病臨床多以虛實夾雜多見，以肝腎氣血不足為本、風寒濕痹阻為標，因此祛風除濕、補益肝腎、溫經通絡為治療 RA 的基本法則。趨化因子中 CXC 亞族主要趨化、激活中性粒細胞，并能促進粘附分子表達、細胞與基質間的相互作用、細胞骨架的重新構建、中性粒細胞的 “呼吸爆炸”以及其他炎癥反應。其受體 CXCR3 在炎癥細胞選擇性進入關節的過程中發揮重要作用。白細胞介素-8 (IL-8) 是 CXCR3 中的一種重要配體，參與RA 的炎癥反應，具有很強的中性粒細胞趨化作用和促血管增生作用。IL-8 在 RA 患者的滑膜液和滑膜組織中滴度較高。在趨化因子抑制實驗中，給予 IL-8 中和抗體后能改善膠原誘導型關節炎。
趨化因子能活化促進淋巴細胞的發育成熟，活化滑膜成纖維樣細胞，激活 T 淋巴細胞信號傳導通道，并且在血管形成中起一定作用，具有化學趨化和細胞免疫作用，在 RA 等自身免疫性疾病發病中發揮重要作用。CXCR3 被公認為 T 淋巴細胞遷移至炎性部位的標記之一。IL-8 又稱為中性粒細胞激活蛋白，由單核細胞、巨噬細胞、內皮細胞、成纖維細胞和表皮細胞等產生。在 RA 關節病灶滑液中，有大量 IL-8 異常增多。作為 CXCR3 的配體之一，IL-8 對中性粒細胞和 T 細胞具有強大趨化作用，不僅參與 RA 的炎癥期，還可以促進新血管生成，使細胞保持遷移能力并為血管翳形成提供氧。從 RA 病人的血清、滑膜液和滑膜組織中可檢測到高滴度的 IL-8。該趨化因子主要由 RA 滑膜中的巨噬細胞、滑膜細胞及血管內皮細胞合成。動物實驗表明: 將重組 IL-8注射到兔的膝關節內，可引起滑膜炎，其病理改變與人的 RA 相似。相關研究顯示: RA 滑膜細胞可產生 IL-8，滑膜中、滑膜液中 IL-8 水平增高。抗 IL-8 抗體可中和 40%RA 關節腔積液對嗜中性粒細胞的趨化活性。IL-8 在中性粒細胞粘附、穿越血管內皮細胞的過程中發揮關鍵的調節作用。IL-8 可調節 RA 中淋巴細胞粘附分子的表達。在趨化因子抑制實驗中，給予 IL-8 中和抗體后能改善鼠膠原誘導型關節炎。
三爪金龍：為葡萄科爬山虎屬植物三葉爬山虎Parthenocissus himalayana（Royle）Planch.［Ampelopsis himalayana Royle］的全株。秋、冬季采收根及莖，洗凈后切片或切段，曬干。夏、秋季采葉，曬干。【性味】 辛；溫。【功能主治】祛風除濕；散瘀通絡。主風濕痹痛；跌打損傷；骨折。【原植物形態】三葉爬山虎 落葉木質藤本。多分枝，枝粗壯，土褐色；卷須短而分枝，頂端有吸盤。掌狀3小葉互生；總葉柄長5-12cm，無毛或有毛；葉片紙質，中間小葉卵形或寬披針狀卵形，長6-12cm，寬2-7cm，先端漸尖或近尾狀，基部楔形，側生小葉不對稱，斜卵形，較中間小葉略小，邊緣有明顯而帶尖頭的鋸齒，上面無毛，下面或沿葉脈有疏柔毛；小葉柄長5-6mm。花兩性，聚傘花序常生于短枝的頂端或與葉對生；花梗較葉柄短；花淡綠色，5數，有時4數；花萼淺碟狀，全緣；花瓣長圓形；雄蕊與花瓣對生；花盤不明顯；花柱短圓柱形，花瓣脫落后先端常擴大成盤狀。漿果球形，熟時變黑褐色，具白粉，種子1-2顆。收載于中藥大辭典。
小金發蘚：為金發蘚科小金發蘚屬植物東亞小金發蘚Pogonatum inflexum（Lindb.)Lac.［Polytricum inflexum Lindb.］的全草。5-7月采收，洗凈，曬干。【性味】辛；溫。【功能主治】鎮靜安神；散瘀；止血。主心悸怔忡；失眠多夢；跌打損傷；吐血。【化學成份】 含牛磺酸。【性狀】本品為數株叢集在一起的團塊，莖長2-8cm，暗綠色或黃褐色。濕潤分離后，每株莖單一，基部密生細假根。葉闊披針形，漸尖，基部圓卵形，內凹，半鞘狀，邊緣有粗鋸齒；中肋粗，長達葉尖，腹面布滿櫛片。有的可見細長蒴柄，橙黃色。孢蒴圓柱形，蒴蓋有長喙，蒴帽密布黃色長毛。氣微，味淡。收載于中藥大辭典。
藜蘆瑟文（Protocevine）：CAS號5876-23-3，分子式C27H43NO8，分子量509.64。【成分來源】藜蘆 Veratrum nigrum。
尖葉石松堿（Acrifoline）：CAS號664-24-4，分子式C16H23NO2，分子量261.36。【成分來源】小接筋草Huperzia selago [Syn. Lycopodium selago]，兩年石松Lycopodium annotinum var. acrifolium。
咖坡林 （Capaurine ）：CAS號478-15-9，分子式C21H25NO5，分子量371.43。熔點165-167℃。【藥理作用】具有興奮子宮作用。【用途】作用于子宮 。【成分來源】罌粟科植物深山紫堇 Coxydalis pallida (Thunb.)Pers. 根，細深山紫堇 C.pallida Pers. var. tenuis Yatabe全草。
3個原料藥化學結構：
藜蘆瑟文（Protocevine）
尖葉石松堿（Acrifoline） 咖坡林 （Capaurine ）。
技術實現要素：
本發明的目的是克服背景技術的不足，提供一種有效治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法。
本發明是采用如下技術方案實現的：
制成該治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：
三爪金龍85-90重量份 小金發蘚60-68重量份 咖坡林4-8重量份 尖葉石松堿2-3重量份 藜蘆瑟文1-2重量份。
優選的用于治療類風濕性關節炎的藥物組合物，是由如下重量份的原料藥組成：
三爪金龍88重量份 小金發蘚64重量份 咖坡林6重量份 尖葉石松堿2.5重量份 藜蘆瑟文1.5重量份。
一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學的常規方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。
一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化學藥或中藥組成的治療類風濕性關節炎藥物。
一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：
原料藥的組成和重量份為：三爪金龍85-90重量份 小金發蘚60-68重量份 咖坡林4-8重量份 尖葉石松堿2-3重量份 藜蘆瑟文1-2重量份；
制備方法：
（1）按原料藥配比取三爪金龍、小金發蘚、咖坡林、尖葉石松堿、藜蘆瑟文，混勻，用重量百分比濃度28%乙醇作為溶劑，30℃溫浸提取，提取次數為32次，每次提取時間為43小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的79倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.08，濾過，藥液通過YWD-11大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度36%乙醇溶液洗脫YWD-11大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度36%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；
（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度63%乙醇作為溶劑，加熱回流提取13次，每次提取時間為0.2小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的85倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.13，濾過，藥液通過HZ-802大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫HZ-802大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；
（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。
優選的一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：
原料藥的組成和重量份為：三爪金龍88重量份 小金發蘚64重量份 咖坡林6重量份 尖葉石松堿2.5重量份 藜蘆瑟文1.5重量份；
制備方法：
（1）按原料藥配比取三爪金龍、小金發蘚、咖坡林、尖葉石松堿、藜蘆瑟文，混勻，用重量百分比濃度28%乙醇作為溶劑，30℃溫浸提取，提取次數為32次，每次提取時間為43小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的79倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.08，濾過，藥液通過YWD-11大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度36%乙醇溶液洗脫YWD-11大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度36%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；
（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度63%乙醇作為溶劑，加熱回流提取13次，每次提取時間為0.2小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的85倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.13，濾過，藥液通過HZ-802大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫HZ-802大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；
（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。
一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學的常規方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。
一種治療類風濕性關節炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物與化學藥或中藥組成治療類風濕性關節炎藥物。
藥物組合物治療類風濕性關節炎療效顯著。
具體實施方式
實施例1：治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法
治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：三爪金龍88g 小金發蘚64g 咖坡林6g 尖葉石松堿2.5g 藜蘆瑟文1.5g；
制備方法：
（1）按原料藥配比取三爪金龍、小金發蘚、咖坡林、尖葉石松堿、藜蘆瑟文，混勻，用重量百分比濃度28%乙醇作為溶劑，30℃溫浸提取，提取次數為32次，每次提取時間為43小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的79倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.08，濾過，藥液通過YWD-11大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度36%乙醇溶液洗脫YWD-11大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度36%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；
（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度63%乙醇作為溶劑，加熱回流提取13次，每次提取時間為0.2小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的85倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.13，濾過，藥液通過HZ-802大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫HZ-802大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；
（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。
實施例2：治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法
治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：三爪金龍85g 小金發蘚68g 咖坡林4g 尖葉石松堿3g 藜蘆瑟文1g；
制備方法：
（1）按原料藥配比取三爪金龍、小金發蘚、咖坡林、尖葉石松堿、藜蘆瑟文，混勻，用重量百分比濃度28%乙醇作為溶劑，30℃溫浸提取，提取次數為32次，每次提取時間為43小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的79倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.08，濾過，藥液通過YWD-11大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度36%乙醇溶液洗脫YWD-11大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度36%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；
（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度63%乙醇作為溶劑，加熱回流提取13次，每次提取時間為0.2小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的85倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.13，濾過，藥液通過HZ-802大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫HZ-802大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；
（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。
實施例3：治療類風濕性關節炎的藥物組合物及其制備方法
治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：三爪金龍90g 小金發蘚60g 咖坡林8g 尖葉石松堿2g 藜蘆瑟文2g；
制備方法：
（1）按原料藥配比取三爪金龍、小金發蘚、咖坡林、尖葉石松堿、藜蘆瑟文，混勻，用重量百分比濃度28%乙醇作為溶劑，30℃溫浸提取，提取次數為32次，每次提取時間為43小時，每次溶劑用量為原料藥總重量的79倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對密度1.08，濾過，藥液通過YWD-11大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度36%乙醇溶液洗脫YWD-11大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度36%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；
（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度63%乙醇作為溶劑，加熱回流提取13次，每次提取時間為0.2小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的85倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對密度1.13，濾過，藥液通過HZ-802大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫HZ-802大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；
（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。
實施例4：片劑的制備
取實施例1藥物組合物354g，加入淀粉410g，混勻，制粒，干燥，加微晶纖維素150g，硬脂酸鎂20g，混勻，壓制成4500片， 即得藥物組合物片劑。
實施例5：膠囊的制備
取實施例2藥物組合物170g，加入淀粉263g，混勻，制粒，干燥，整粒，加入適量硬脂酸鎂，混勻，裝膠囊1200粒，即得藥物組合物膠囊。
實施例6：滴丸的制備
稱取聚乙二醇 6000 250g水浴(80℃)加熱煮熔，加入實施例3藥物組合物11.3 g，充分攪拌均勻，以液體石蠟為冷卻劑，置玻璃管（4*80cm）中，冷卻溫度為-5℃，滴口內外徑為7.0/2.0(mm/mm)，滴口距液面為2.5cm，滴速以每分56滴為最佳條件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝劑，即得藥物組合物滴丸。
實施例7：治療類風濕性關節炎的藥物組合物
治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：
咖坡林 30重量份 尖葉石松堿2重量份 藜蘆瑟文4重量份。
實施例8：治療類風濕性關節炎的藥物組合物
治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：
咖坡林2重量份 尖葉石松堿10重量份 藜蘆瑟文1重量份。
實施例9：治療類風濕性關節炎的藥物組合物
治療類風濕性關節炎的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：
咖坡林10重量份 尖葉石松堿12重量份 藜蘆瑟文3重量份。
實驗例1：治療類風濕性關節炎的試驗研究
1 材料與方法
1.1 藥物
甲氨蝶呤( MTX) 片由上海醫藥 (集團) 有限公司信誼制藥總廠生產，批號: 090634；藥物組合物(實施例1藥物組合物) 批號091104。
1.2 主要試劑與儀器
牛Ⅱ型膠原、弗氏完全佐劑均購自美國 Sigma 公司；Trizol 試劑盒購自廣州合達生物科技有限公司；SYBR Premix Ex Taq( Perfect Real Time)試劑盒購自日本 TaKaRa 公司；M-MLV 逆轉錄酶試劑盒購自美國 Invitrogen公司；LDZS-2 型離心機為中國北京醫用儀器廠產品；YLS-7B足趾容積測量儀為中國成都泰盟科技有限公司產品；Giotto Image 高頻鉬靶數字化乳腺機為意大利 IMS 公司產品；7500 Real-time PCR System 擴增儀為美國 ABI 公司產品；MR5000 型酶標儀為美國Dyntech 公司產品；脫水機、包埋機、切片機、染色機、LX70倒置顯微鏡均為德國Leica 公司產品。
1.3 動物及分組
SPF 級 Wistar大鼠 54只，雄性，體質量(90±10)g，購自南方醫科大學實驗動物中心，許可證號: SCXK (粵)2006-0015。隨機分為 6 組，即正常組，模型組，MTX 組，藥物組合物低、中、高劑量組，每組 9 只。
1.4 抗原注射液制備
電子天平稱取牛Ⅱ型膠原25 mg，放入試管，用 0.1mol/L醋酸5 mL 逐漸加入并攪拌溶解。加入等量的弗氏完全佐劑混合研磨，制成濃度為2 mg/mL的抗原注射液，于冰浴中充分乳化，封裝備用。
1.5 造模與給藥
正常組大鼠尾根注射生理鹽水 0.1mL/只。其他組大鼠用體積分數 75%酒精消毒尾根部，將配制好的抗原注射液按膠原蛋白每只0.2 mg 劑量皮下注射于距大鼠尾根部 1cm 處。造模當天開始灌胃給藥，正常組、模型組每日給予生理鹽水10mL/kg，MTX 組每周給予 MTX 片0.625mg/kg，藥物組合物低、中、高劑量組分別給予藥物組合物0.2、0.4、0.8g/kg。全部動物喂藥36 d。末次給藥 24 h 后，用 100mg/L水合氯醛麻醉大鼠，腹主動脈無菌采血3 mL，處死。取大鼠左踝關節，剝去皮毛，以體積分數 10% 甲醛固定，常規切片，蘇木精—伊紅(HE)染色，光鏡下做組織病理學檢查。取大鼠右膝關節，剝去皮毛，打開膝關節腔，完整剝離滑膜組織，冰箱凍存備用。
1.6 觀察指標
1.6.1 大鼠一般情況及足腫
觀察大鼠的毛色、活動、飲食、排便、體質量變化等。以容積法采用足腫容積測量儀每 3d 測 1 次大鼠足部容積變化以判斷大鼠足腫情況。
1.6.2 病理觀察
HE 染色關節滑膜組織病理分級計分標準: ①關節滑膜上皮未見增生，滑膜間質內未見炎細胞浸潤 (－)，計0分；②關節滑膜上皮增生不明顯，間質內少量慢性炎性細胞浸潤(+)，計1分；③關節滑膜上皮細胞增生不明顯，間質內小血管擴張、充血，較多慢性炎性細胞浸潤(+ +)，計2 分；④關節滑膜上皮細胞增生成多層，間質內有密集的慢性炎性細胞浸潤 (+ + +)，計3分。HE染色關節軟骨病理分級計分標準: ①關節軟骨面光滑，軟骨細胞未見增生、變性(－)，計 0分； ②關節軟骨局灶性變性，軟骨陷窩內細胞缺失(+)，計1 分；③關節軟骨脫失，被長入的血管豁(肉芽腫) 取代(+ +)，計 2 分；④關節腔面軟骨及肉芽組織增生，關節腔閉鎖 (+ + +)，計3 分。
1.6.3 血清 IL-8 含量檢測
大鼠腹主動脈無菌采血3mL，分離血清，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清IL-8 含量。
1.6.4 關節滑膜組織 IL-8 mRNA 基因表達的檢測
采用實時熒光定量 PCR 法檢測大鼠滑膜組織IL-8mRNA 表達。取凍存關節滑膜組織，液氮研磨，取0.1g 組織直接放入研缽中，加入少量液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，再研磨，如此3 次進行樣本制備。按Trizol 試劑盒提供方法提取總 RNA，采用紫外分光光度計測定其 D 值，以D260/D280確定 RNA 的純度。IL-8 的PCR產物片段為 385 bp。β-Actin 的 PCR 產物片段為 570 bp。引物序列: IL-8上游: 5'-ATGACTTCCAACCTGGCCGTG-3'，下游: 5'-TTCTCAGCCCTCTTCAAAAAC-3'。 采用逆轉錄試劑盒進行逆轉錄反應，進行 cDNA 的合成。反應體系(25μL): 第1鏈cDNA 1μL，2×SYBR Green Mix 5 mol/L 12.5μL，上下游引物(10μm)各1μL，DEPC-free水9.5μL。擴增件: 95℃預變性 30 s，然后 95℃、5s，60℃、30s，40個循環。擴增結束后由儀器內置軟件繪制標準曲線和溶解曲線。采用熒光定量 PCR 分析軟件對結果進行分析。
1.7 統計方法
采用 SPSS 16.0 軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差(x±s)描述，多組比較采用方差分析法，多組間兩兩比較采用Bonferroni 法分析。對于等級資料多組間比較采用秩和檢驗進行分析，多組間兩兩比較采用 Mann-Whituey U 檢驗，對檢驗水準根據比較次數進行校正。
2 結果
2.1 各組對 CIA 大鼠一般情況的影響
造模初期，各組大鼠表現不愛活動、倦怠、食欲減退、注射部位發紅。造模后，各組大鼠后肢從足趾部分開始，逐漸出現紅、腫等癥狀，皮毛松散、稀疏，易激惹，體質量增長減慢。造模前，各組大鼠體質量無明顯差異，至造模第 8 天，個別大鼠出現足腫現象，但未影響其進食，故體質量未見明顯差異。造模第 14 天后，除正常組外，各組大鼠陸續開始發病，影響其進食，大鼠體質量出現增長減慢，各組間大鼠體質量比較差異無統計學意義。至第27 天，因藥物干預病情得以控制，飲食、動作逐漸恢復，體質量也相應有所增加，各組間大鼠體質量比較差異無統計學意義。
2.2 各組對 CIA 大鼠足腫脹度的影響
結果顯示，造模后，模型組的足腫脹度呈現明顯的上升趨勢，第 19天起平均腫脹程度顯著高于正常組 (均P＜0.05)。MTX 組和藥物組合物低、中、高劑量組的足腫脹度在第 31 天后的不同時間段均顯著降低，與模型組比較差異有統計學意義 (P＜0.05)。
2.3 各組對 CIA 大鼠關節滑膜與軟骨病理變化的影響
RA 早期病變部位滑膜炎性細胞浸潤，過度增生、增厚，軟骨面破壞是造成關節損害的主要病理基礎之一。結果顯示: 正常組大鼠關節滑膜上皮未見增生，滑膜間質內未見炎細胞浸潤； 關節軟骨面光滑，軟骨細胞未見增生、變性。模型組關節滑膜上皮細胞增生成多層，間質內有密集的慢性炎性細胞浸潤； 關節腔面軟骨及肉芽組織增生，關節腔閉鎖。MTX 組及藥物組合物低、中、高劑量組大鼠關節滑膜上皮細胞增生不明顯，間質內小血管擴張、充血，較多慢性炎性細胞浸潤； 關節軟骨局灶性變性，軟骨陷窩內細胞缺失，甚則被長入的血管翳取代。各組大鼠關節滑膜、軟骨病理情況的統計結果顯示: 模型組大鼠關節滑膜及軟骨組織病理積分均顯著升高 (P＜0.05)，各給藥組均可顯著降低滑膜病理積分(P＜0.05 或P＜0.01)，中藥高劑量組可顯著降低軟骨病理積分值(P＜0.01)。
2.4 各組對 CIA 大鼠外周血IL-8水平的影響
結果顯示: 模型組大鼠血清 IL-8 水平顯著高于正常組(P＜0.0l)。藥物組合物高劑量組大鼠血清IL-8 水平顯著低于模型組大鼠(P＜0.05)。而MTX 組，藥物組合物低、中劑量組大鼠血清 IL-8 水平雖有下降，但與模型組比較差異均無統計學意義(P＞0.05)。
2.5 各組對 CIA 大鼠滑膜組織 IL-8 mRNA 表達的影響
結果顯示: 模型組大鼠IL-8 mRNA 表達顯著升高 (P＜0.05)。MTX 組，藥物組合物低、中、高劑量組大鼠 IL-8 mRNA 表達均顯著低于模型組大鼠 (P＜0.05)，而藥物組合物高劑量組大鼠 IL-8 mRNA表達顯著低于 MTX 組及藥物組合物低、中劑量組 (P＜0.05)。