含有溶血卵磷脂和二氫卟吩e6的綴合物的用于治療痤瘡的脂質體組合物的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種用于治療痤瘡的脂質體組合物，所述組合物包含0.001至5重量％的溶血卵磷脂和二氫卟吩e6的綴合物、1至10重量％的蔗糖月桂酸酯、0.1至5重量％的硬脂酰谷氨酸鈉、1至10重量％的聚乙二醇?5油菜籽甾醇、1至20重量％的中鏈甘油三酸酯、1至10重量％的植物油、0.1至5重量％的脫氧膽酸鈉、3至10重量％的甘油及余量的水，本發明的脂質體組合物對治療痤瘡非常有效。
【專利說明】
含有溶血卵磷脂和二氫卟吩e6的綴合物的用于治療痤瘡的脂 質體組合物
技術領域
[0001] 本發明涉及一種含有溶血卵磷脂和二氫卟吩e6(chlorin e6)的綴合物 (查II·刻）的用于治療痤瘡的脂質體組合物，更詳細地，涉及一種用于治療痤瘡的脂質體 組合物及包含其的皮膚護理組合物，所述用于治療痤瘡的脂質體組合物包含0.001至5重 量％的溶血卵磷脂（1}^(^11〇8。1^1:丨(171(311〇1;[116，]^：)(])和二氫卟吩66的綴合物、1至10重量％ 的鹿糖月桂酸酯（sucrose laurate)、0.1至5重量％的硬脂酰谷氨酸鈉 (sodium stearoyl glutamate)、1至 10重量％ 的聚乙二醇_5油菜軒留醇（polyethylene glycol_5rapeseed sterol)、1至20重量％ 的中鏈甘油三酸酯（medium-chain triglyceride，MCT)、1至10重 量％的植物油、〇· 1至5重量％的脫氧膽酸鈉 （sodium deoxycholate)、3至10重量％的甘油 及余量的水。
【背景技術】
[0002] 光動力療法（photodynamic therapy，PDT)亦稱光化學療法 (photochemotherapy)，是一種利用光敏感性物質（photo-sensitizer)而不通過手術治療 癌癥等不治之癥、或治療痤瘡等的皮膚疾病的技術。從二十世紀初開始對這種光動力療法 (PDT)進行了廣泛的研究，目前，在癌癥的診斷和治療、自體骨髓移植、抗生素、艾滋病的治 療、皮膚移植手術或關節炎等的治療中，為了增加免疫性而使用，從而其應用范圍正逐步擴 大。尤其，用于治療癌癥的光動力療法是一種利用以下原理的治療方法:將對于光顯示出敏 感反應的物質，即光敏感性物質施用于體內，并從外部照射光時，通過體內的豐富的氧氣和 外部光的化學反應而產生單線態氧(singlet oxygen)或自由基(free radical)，這種單線 態氧或自由基誘導各種病變部位或癌細胞的細胞死亡而破壞癌細胞。
[0003] 光動力療法中使用的光敏感性物質已知有卟啉（porphyrin)衍生物、二氫卟酚 (〇111〇1'；[11)、菌綠素(^3(^61'；[0(311101'；[11)、酞菁染料(卩111：1131005^11；[116)及5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid)衍生物等。環狀四P比略衍生物作為光敏感性物質，不僅選擇性地累 積在癌細胞中，而且在化合物的特征方面，顯示出熒光或磷光，因此，具有能夠用作腫瘤的 早期診斷試劑的特征。此外，使用環狀四吡咯的內部結合有金屬的金屬卟啉 (metal loporphyrin)時，根據結合的金屬種類而顯示出各種特性，因此，利用將金屬卟啉作 為磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI)對比劑（contrasting agent)的診斷技 術還可以應用于諸如癌細胞的腫瘤細胞的早期診斷中。作為最廣為人知的光敏感性物質的 5-氨基乙酰丙酸衍生物具有使用方法簡單且分子量小而比較容易滲透皮膚，并且副作用少 而安全的優點。此外，受到關注的光敏感性物質中的一種是作為二氫卟酚系列光敏感性物 質的二氫卟吩e6。作為利用二氫卟吩e6的組合物的例子，在韓國專利申請第10-2006-0136610號中公開一種包含二氫卟吩e6或其藥學上可接受的鹽作為有效成分的用于口服給 藥的抗腫瘤組合物。
[0004] 如上所述，雖然提出了應用于作為光動力療法的適應癥中的一種的痤瘡等的皮膚 病的治療中，但是到目前為止，還沒有關于這方面的成功使用案例。
[0005] [在先技術文獻]
[0006] [專利文獻]
[0007] 韓國專利申請第10-2006-0136610號
【發明內容】
[0008] 要解決的技術問題
[0009] 因此，本發明要解決的技術問題是提供一種將作為光敏感性物質的二氫卟吩e6有 效地傳遞到細胞內，能夠對痤瘡治療顯示出優異效果的組合物。
[0010] 技術方案
[0011] 為了實現上述目的，本發明提供一種用于治療痤瘡的脂質體組合物，所述組合物 包含0.001至5重量％的溶血卵磷脂和二氫卟吩e6的綴合物、1至10重量％的蔗糖月桂酸酯、 0.1至5重量％的硬脂酰谷氨酸鈉、1至10重量％的聚乙二醇-5油菜籽留醇、1至20重量％的 中鏈甘油三酸酯、1至10重量％的植物油、0.1至5重量％的脫氧膽酸鈉、3至10重量％的甘油 及余量的水。
[0012] 此外，提供一種包含本發明的所述脂質體組合物的皮膚護理組合物。
[0013] 以下，對本發明進行詳細說明。
[0014] 本發明中，二氫卟吩e6與溶血卵磷脂形成綴合物。通過將二氫卟吩e6與溶血卵磷 脂結合，從而能夠將二氫卟吩e6有效地傳遞到細胞內，并且有助于脂質體的形成。溶血卵磷 脂和二氫卟吩e6的綴合物的形成，例如可以通過在催化劑二環己基碳二亞胺(DCC)和二甲 基氨基吡啶(DMAP)的存在下，將溶血卵磷脂和二氫卟吩e6進行反應而得到，并將結果表示 在下述反應式1中。
[0015]
量％，更優選包含0.5至2重量％。本發明中，硬脂酰谷氨酸鈉能夠提高脂質體與皮膚的親和 力。本發明中，如果包含的硬脂酰谷氨酸鈉的量少于0.1重量％，則在脂質體的皮膚親和力 方面會存在問題，如果包含的硬脂酰谷氨酸鈉的量超過5重量％，則在形成脂質體方面會存 在問題。
[0020] 本發明的脂質體組合物包含1至10重量％的聚乙二醇-5油菜籽留醇，優選包含1.5 至8重量％，更優選包含2至6重量％。本發明中，聚乙二醇-5油菜籽留醇有助于脂質體囊泡 (vesicle)的形成，并且對脂質體雙層膜賦予穩定性。本發明中，如果包含的聚乙二醇-5油 菜籽留醇的量少于1重量％，則形成脂質體時，由聚乙二醇-5油菜籽留醇帶來的效果會微 弱，如果包含的聚乙二醇-5油菜籽留醇的量超過10重量％，則脂質體會不穩定。
[0021] 本發明的脂質體組合物包含1至20重量％的中鏈甘油三酸酯，優選包含3至15重 量％，更優選包含5至12重量％。中鏈甘油三酸酯作為甘油的6-12個碳原子的脂肪酸酯，在 本發明中有助于脂質體滲透皮膚。本發明中，如果包含的中鏈甘油三酸酯的量少于1重 量％，則在脂質體滲透皮膚方面會存在問題，如果包含的中鏈甘油三酸酯的量超過20重 量％，則在形成脂質體方面會存在問題。
[0022] 本發明的脂質體組合物包含1至10重量％的植物油，優選包含1.5至8重量％，更優 選包含2至6重量％。本發明中，植物油起到幫助脂質體滲透皮膚的作用，例如，可以使用葵 花籽油、橄欖油、山茶油、澳洲堅果油、蓖麻油、荷荷巴油、扁桃仁油、杏仁油、綠茶油、白芒花 籽(meadowfoam seed)油、阿甘油（argan oil)或它們的混合物，但并不限定于此。本發明 中，如果包含的植物油的量少于1重量％，則在脂質體滲透皮膚方面會存在問題，如果包含 的植物油的量超過10重量％，則在形成脂質體方面會存在問題。
[0023] 本發明的脂質體組合物包含0.1至5重量％的脫氧膽酸鈉，優選包含0.2至3重 量％，更優選包含0.3至2重量％。本發明中，脫氧膽酸鈉使得脂質體柔韌，從而使脂質在角 質細胞間容易通過。本發明中，如果包含的脫氧膽酸鈉的量少于〇. 1重量％，則在脂質體滲 透皮膚方面會存在問題，如果包含的脫氧膽酸鈉的量超過5重量％，則脂質體會不穩定。
[0024] 本發明的脂質體組合物包含作為溶劑的甘油及水。本發明的脂質體組合物包含3 至10重量％的甘油，優選包含5至9重量％，更優選包含6至8重量％。本發明中，例如包含25 至92.999重量％或56至82.1重量％的水。
[0025] 本發明的脂質體組合物根據需要，可以進一步包含賦形劑、甜味劑及香料等的添 加劑。
[0026] 本發明中，脂質體的顆粒直徑優選為100至300nm。
[0027]根據本發明的另一方面，提供一種包含本發明的脂質體組合物的皮膚護理組合 物。本發明中，皮膚護理組合物可以列舉如化妝水、洗劑、潤膚露、乳霜及精華等，但并不限 定于此。皮膚護理組合物中，優選包含1至30重量％的根據本發明的脂質體組合物。本發明 中，如果皮膚護理組合物包含的脂質體組合物的量少于1重量％，則由二氫卟吩e6帶來的治 療痤瘡的效果會甚微，即使包含的二氫卟吩e6的量超過30重量％，也難以期待治療痤瘡的 效果與添加二氫卟吩e6的量成比例而增加，因此對于經濟上來說不優選。
[0028] 有益效果
[0029]本發明的脂質體組合物能夠將二氫卟吩e6穩定有效率地傳遞到皮膚內，從而有效 地治療痤瘡。
【附圖說明】
[0030]圖1為使用Photal ELS-Z測定本發明的脂質體的顆粒直徑大小的結果。
[0031]圖2為使用Photal ELS-Z測定本發明的脂質體的ZETA電勢的結果。
[0032]圖3為測定本發明的脂質體的穩定度的結果。
[0033] 圖4為使用冷凍電子顯微鏡放大拍攝本發明的脂質體組合物的照片。
[0034] 圖5為示出將本發明的脂質體組合物的治療痤瘡的效果與發光二極管光療（LED phototherapy)比較的圖表。
[0035] 圖6為拍攝本發明的脂質體組合物的治療痤瘡的效果的照片，左側為治療前的照 片，右側為治療后經過兩周后的照片。
【具體實施方式】
[0036]以下，將通過實施例具體地說明本發明。然而，實施例僅是為了幫助理解本發明而 例示的，本發明的范圍并不限定于實施例。
[0037] 制備例:LPC_Ce6的制備
[0038] 將10mg的溶血卵磷脂(L-a-lysophosphat idyl choline)溶解于10ml的無水二氯甲 燒（anhydrous dichloromethane)中，并且將10mg的二氫卟吩e6(Ce6)、作為催化劑的 5 · 35mg的Ν,Ν'-二環己基碳二亞胺（Ν,Ν7 -dicyclohexylcarbodiimide，DCC)及5 · 35mg的4_ 二甲基氨基吡啶(4-dimethylaminopyridine:DMAP)加入到10ml的無水二氯甲燒中，并攪拌 4小時。然后，將溶解于無水二氯甲烷中的二氫卟吩e6溶液與溶解于無水二氯甲烷中的溶血 卵磷脂溶液混合，并且在常溫下反應48小時。反應后，在40°C的蒸發(evapration)下，蒸發 無水二氯甲烷30分鐘后，在4°C下冷藏制備的綴合物直到使用。
[0039][反應式2]
>.
[0040]
[0041 ] 實施例1:含有LPC_Ce6的脂質體組合物的制備
[0042]在80°C下，溶解蔗糖月桂酸酯、聚乙二醇-5油菜籽留醇、葵花籽油及中鏈甘油三酸 酯。然后將甘油、精制水、脫氧膽酸鈉及硬脂酰谷氨酸鈉加熱至80°C以上，并且投入到油相 中后，在100 °C下濕潤1小時。將所述混合物冷卻至40 °C后，投入LPC-Ce6，并進行乳化后，在 1，000巴下連續通過高壓微乳化器（衛舀〇|劃異空PI )3次，然后進行冷卻和脫氣，從而 獲得脂質體組合物。
[0043]表 1
[0044]
[0045] 比較例:含有LPC_Ce6的乳劑的制備
[0046] 按照下述表2中的組成成分，將各成分加入到容器中后，在80°C的溫度下使其溶 解。然后，利用高速攪拌機(homo-mixer)混合5分鐘后，進行冷卻、脫氣，從而獲得乳劑。
[0047] 表 2
[0048]
[0049] 實施例2:含有脂質體的化妝水的制備
[0050] 根據下述表3中的組成成分，制備含有本分明的脂質體的化妝水。
[0051] 表 3
[0052]
[0053] 實施例3:含有脂質體的洗劑的制備
[0054] 根據下述表4中的組成成分，制備含有本分明的脂質體的洗劑。
[0055] 表 4
[0056]
[0057] 實施例4:含有脂質體的潤膚露的制備
[0058] 根據下述表5中的組成成分，制備含有本分明的脂質體的潤膚露。
[0059] 表 5
[0060]
[00611 實施例5:含有脂質體的乳霜的制備
[0062] 根據下述表6中的組成成分，制備含有本分明的脂質體的乳霜。
[0063] 表 6
[0064]
[0065] 實施例6:含有脂質體的精華的制備
[0066] 根據下述表7中的組成成分，制備含有本分明的脂質體的精華。
[0067] 表 7
[0068]
[0069]
[0070] 實驗例1:脂質體的粒子分布測定
[007?]利用Photal ELS-Z測定實施例1中制備的脂質體的顆粒分布，并在圖1中示出。進 行測定的結果，可以知道，平均顆粒大小為153.9nm。
[0072] 實驗例2:脂質體的穩定性測定
[0073]為了測定實施例1中制備的脂質體的穩定度，利用Photal ELS-Z測定ZETA電勢，并 將其結果表示在圖2中。進行測定的結果，可以知道，顆粒的電位為-57.53mV，是穩定的。 [0074] 實驗例3:脂質體的穩定度測定
[0075 ]為了測定實施例1中制備的脂質體的穩定度，使用穩定性分析儀(Turb i s c an)進行 測定的結果，可以知道脂質體是穩定的（圖3)。
[0076] 實驗例4:脂質體顆粒拍攝
[0077]拍攝實施例1中制備的脂質體。由于脂質體顆粒大小過于微細，因此不能通過通常 的光學顯微鏡進行測定。因此利用冷凍電子顯微鏡(JEM 1010,日本電子株式會社(JE0L)， 日本)進行拍攝(圖4)。從圖4中可知，脂質體以均勻的大小很好地形成。
[0078] 實驗例5:促進經皮吸收的效果實驗
[0079] 利用8周齡左右的雌性無毛豚鼠 （strain IAF/HA-hrBR)。切取豚鼠的腹部皮膚，并 安裝到弗朗茲型擴散池（Franz-type diffusion cell)(精密儀器實驗室（Lab Fine Instruments)，韓國）中而進行實驗。在弗朗茲型擴散池的接收容器(5ml)中加入50mM的磷 酸鹽緩沖液(PH7.4，0.1M氯化鈉）后，在32 °C，600rpm下，進行混合并分散，并且將50μ1的實 施例1的脂質體及比較例的乳劑加入到供體(donor)容器中。根據預定的時間進行吸收及擴 散，并且使得發生吸收及擴散的皮膚達到0.64cm 2。完成有效成分的吸收擴散后，用干燥的 拭凈紙(kimwipes)或10ml的乙醇清洗因沒有被吸收而留在皮膚上的乳化物，并且使用尖式 均質器(tip-type homogenizer)均化吸收擴散有有效成分的皮膚，然后使用4ml的二氯甲 燒提取吸收到皮膚內部的二氫卟吩e6的量。之后，用0.45μηι的尼龍膜(nylon membrane)過 濾膜過濾提取液，并且在以下條件下，用高效液相色譜法測定含量之后，將其結果表示在表 8中。
[0080]表 8
[0081]
[0082]從所述表8中可以看出，本發明的脂質體經皮吸收與一般的乳劑相比優異。
[0083] 實驗例6:痤瘡治療效果測定
[0084]將20名具有嚴重痤瘡的10歲年齡段及20歲年齡段的男女作為對象，以每組10名分 為兩個組，然后，對一組中涂布實施例3的洗劑，所述涂布每日進行三次。對另一組進行發光 二極管光療(LED phototherpy)。治療開始后的2周、4周及6周時，用肉眼評價治療效果，并 且將痤瘡程度最嚴重的情況設為5，沒有痤瘡的情況設為0，從而分成等級進行評價后，將其 結果表示在圖5中。圖6為使用含有本發明的二氫卟吩e6的脂質體來進行治療的組的實驗對 象中的一名患者的治療前和治療2周后的拍攝照片。
[0085]從圖5及6中可以看出，含有本發明的二氫卟吩e6的脂質體對治療痤瘡非常有效。
【主權項】
1. 一種用于治療瘦瘡的脂質體組合物，其特征在于，所述組合物包含:0.001至5重量％ 的溶血卵憐脂和二氨化吩e6的綴合物、1至10重量％的薦糖月桂酸醋、0.1至5重量％的硬脂 酷谷氨酸鋼、1至10重量％的聚乙二醇-5油菜巧醬醇、1至20重量％的中鏈甘油Ξ酸醋、1至 10重量％的植物油、0.1至5重量％的脫氧膽酸鋼、3至10重量％的甘油及余量的水。2. 根據權利要求1所述的用于治療瘦瘡的脂質體組合物，其特征在于，所述溶血卵憐脂 和二氨化吩e6的綴合物為下述化學式1: [化學式1]所述化學式1中，R為C6-C22的脂肪酸鏈。3. 根據權利要求1所述的用于治療瘦瘡的脂質體組合物，其特征在于，所述植物油選自 葵花巧油、橄攬油、山茶油、澳洲堅果油、藍麻油、荷荷己油、扁桃仁油、杏仁油、綠茶油、白芒 花巧油、阿甘油，W及它們的混合物。4. 根據權利要求1所述的用于治療瘦瘡的脂質體組合物，其特征在于，所述組合物包含 0.1至2重量％的溶血卵憐脂和二氨化吩e6的綴合物、2至6重量％的薦糖月桂酸醋、0.5至2 重量％的硬脂酷谷氨酸鋼、2至6重量％的聚乙二醇-5油菜巧醬醇、5至12重量％的中鏈甘油 Ξ酸醋、2至6重量％的植物油、0.3至2重量％的脫氧膽酸鋼、6至8重量％的甘油及56至82.1 重量％的水。5. 根據權利要求1所述的用于治療瘦瘡的脂質體組合物，其特征在于，脂質體直徑的大 小為100至300nm。6. -種皮膚護理組合物，其特征在于，所述組合物包含權利要求1至5中任一項所述的 用于治療瘦瘡的脂質體組合物。7. 根據權利要求6所述的皮膚護理組合物，其特征在于，所述組合物包含1至30重量％ 的用于治療瘦瘡的脂質體組合物。
【文檔編號】A61K9/127GK105939707SQ201580000550
【公開日】2016年9月14日
【申請日】2015年1月22日
【發明人】池洪根, 柳孝暻, 禹玲瓏, 金貞東, 曹世熙, 羅建, 樸炯
【申請人】H&A帕瑪科株式會社