專利名稱：一種灰樹花多糖硫酸酯及其制備方法與應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種真菌多糖衍生物及其制備方法與應用，更具體地說涉及一種灰樹花多糖硫酸酯及其制備方法與在提高免疫和抗癌中的應用。
背景技術：
灰樹花(Grifola.frondosa)屬于多孔菌屬，擔子菌，為名貴食用和藥用真菌，利用液體發酵方法可以獲得大量灰樹花菌絲體。研究表明，灰樹花中含有多種結構不同的多糖，如水溶性多糖和水不溶性多糖等。水溶性多糖中含有β-1，3-葡聚糖結構，水不溶性多糖的結構尚不明確。灰樹花水溶性多糖的結構與活性研究較多，但灰樹花不溶性多糖的結構與活性研究較少。一篇論文(無錫輕工大學學報，2003年)曾披露了一種灰樹花多糖硫酸酯的制備方法，所得產品中糖殘基之間的連接方式主要為1，6-糖苷鍵，多糖中單糖組成也不明確。目前，關于灰樹花水不溶性多糖硫酸酯的結構與活性研究尚未見報導。
發明內容
本發明的目的是提供一種灰樹花多糖硫酸酯以及制備方法與應用，能彌補現有技術的上述不足。
一種灰樹花多糖硫酸酯，其特征是它的糖鏈中含有葡萄糖、甘露糖和木糖，主鏈為α-1，3-糖苷鍵，支鏈為α-1，4-糖苷鍵。
一種灰樹花多糖硫酸酯的制備方法，其特征是將灰樹花水不溶性多糖加入到磺化劑中，在50-75℃下酯化反應2-8小時，經乙醇沉淀，中和，洗滌，干燥。
灰樹花多糖硫酸酯用作免疫調節劑。
灰樹花多糖硫酸酯用作抗腫瘤藥物。
本發明的產品結構獨特，具有免疫調節和抗癌活性。該產品制備方法簡單，容易操作，所用的原料來源豐富。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。
向100克灰樹花菌絲體中加入2000毫升濃度為85％(重量百分比，下同)的乙醇水溶液，于80℃提取2小時，離心收集沉淀，然后向該沉淀中加入1500毫升蒸餾水，于100℃回流提取2小時，離心收集沉淀，然后向該沉淀中加入1500毫升濃度為8％的NaOH水溶液，于4℃攪拌提取8小時，離心收集上清液，該上清液用稀醋酸中和并離心收集沉淀，用水洗滌，加入無水乙醇脫水干燥得到灰樹花水不溶性多糖。取甲酰胺60mL置于250mL三口瓶中，用冰鹽浴冷卻，攪拌條件下緩慢滴加12mL氯磺酸，控制滴加速度使反應體系溫度低于5℃，繼續攪拌30min得到磺化劑。稱取4g經干燥粉碎的上述多糖，將上述磺化劑升溫并加入上述多糖，控制反應溫度65℃，并攪拌反應3h，反應結束后取出燒瓶冷至室溫，加入四倍體積的95％乙醇，出現沉淀，將此沉淀用少量水溶解，用NaOH調pH至8，反復醇沉水溶4次，于60℃烘干即得本發明的灰樹花多糖硫酸酯。該產品的分子量10萬-25萬道爾頓，有機硫含量8-18％。
本實施例中所述的甲酰胺可用吡啶代替；氯磺酸與甲酰胺或吡啶的體積比為1∶5-10，所述的酯化反應溫度為50-75℃，反應時間為2-8小時。
用本發明的產品按現有的方法對小鼠作了免疫調節和抗癌活性實驗，結果如表1和表2所示。從表1和表2實驗結果可以看出，本發明的產品能明顯提高荷瘤小鼠的胸腺指數和脾指數，抑瘤率達51％，具有明顯的提高免疫和抗癌活性。
表1灰樹花多糖硫酸酯對小鼠免疫器官的影響
表2灰樹花多糖硫酸酯對小鼠抑瘤率的影響
權利要求
1 一種灰樹花多糖硫酸酯，其特征是它的糖鏈中含有葡萄糖、甘露糖和木糖，主鏈為α-1，3-糖苷鍵，支鏈為Q-1，4-糖苷鍵。
2一種灰樹花多糖硫酸酯的制備方法，其特征是將灰樹花水不溶性多糖加入到磺化劑中，在50-75℃下酯化反應2-8小時，經乙醇沉淀，中和，洗滌，干燥。
3如權利要求2所述的制備方法，其特征是所述的磺化劑由氯磺酸與甲酰胺或吡啶組成，前者與后者的體積比為1∶5-10。
4灰樹花多糖硫酸酯用作免疫調節劑。
5灰樹花多糖硫酸酯用作抗腫瘤藥物。
全文摘要
一種灰樹花多糖硫酸酯，其特征是它的糖鏈中含有葡萄糖，甘露糖和木糖，主鏈為α－1，3－糖苷鍵，支鏈為α－1，4－糖苷鍵。制備時將灰樹花水不溶性多糖加入到磺化劑中，在50－75℃下酯化反應2－8小時，經乙醇沉淀，中和，洗滌，干燥。所述的磺化劑由氯磺酸與甲酰胺或吡啶組成，前者與后者的體積比為1∶5－10。本發明的產品結構獨特，具有免疫調節和抗癌活性。該產品制備方法簡單，容易操作，所用的原料來源豐富。該產品可用于制備免疫調節劑和抗腫瘤藥物。
文檔編號C08B37/00GK1563102SQ20041002385
公開日2005年1月12日 申請日期2004年3月30日 優先權日2004年3月30日
發明者于廣利, 徐澤平, 王瑩, 趙峽 申請人:中國海洋大學