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云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP?OA2及其制備方法與應用與流程

文檔序號:11095818閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2,其特征在于,所述抗氧化多肽AOP-OA1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一種云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

1)原料預處理:取云南臭蛙皮膚分泌物,溶解于質量濃度為0.9%的生理鹽水,真空冷凍干燥,-80℃保存備用;

2)Sephadex G50分子篩:將步驟1)中制備得到的云南臭蛙皮膚分泌物凍干粉溶解于去離子水中,上Sephadex G50柱子,用Tris-HCl緩沖液進行洗脫,流速為2.0毫升/10分鐘,每10分鐘收集一管,測定其在280nm下的吸光度,收集合并具有抗氧化活性的洗脫峰;

3)高效液相色譜反相層析:將步驟2)中制備得到的洗脫液上樣于Hypersil ODS2柱子,實驗儀器為Waters 1525高壓液相系統,在流速為1毫升/分鐘的條件下,用乙腈在線性梯度條件下進行洗脫,監測波長為215納米,收集合并具有抗氧化活性的洗脫峰,濃縮干燥后得到目標物。

3.根據權利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2的制備方法,其特征在于,步驟2)中的Sephadex G50柱子預先用20mM、pH6.8、含0.1M NaCl的Tris-HCl緩沖液平衡24小時。

4.根據權利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2的制備方法,其特征在于,步驟3)中的Hypersil ODS2色譜柱需預先用含體積濃度為0.1%三氟乙酸的超純水平衡。

5.根據權利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2的制備方法,其特征在于,步驟3)中的乙腈為含0.1%三氟乙酸的乙腈。

6.根據權利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2的制備方法,其特征在于,步驟3)中的線性梯度洗脫具體為:乙腈濃度從0%升至60%所消耗的時間為60min。

7.一種如權利要求1所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA2在制備與抗氧化相關藥物、保健品、化妝品中的應用。

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