61.17(C6，，）。
[0052] 綜合鑒定為槲皮素-3-0-葡萄糖苷，化合物的分子式為C21H2qO12，分子量464.0959， 結構式如下
[0053]
ο
[0054] 槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制備
[0055] 稱取銀杏葉提取物IOg，溶于50mL 40%的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶液， 濃度為200mg/mL，過0.45μηι微孔濾膜，進行一維液相色譜分離。一維液相色譜采用以硅膠為 基質的親水型色譜填料50 X 250mm，ΙΟμπι(華譜新創科技有限公司），流動相采用乙腈（含 〇.1%甲酸)為有機相，水(含〇.1%甲酸)為水相，梯度洗脫方式 :〇-15!^11有機相濃度從95% 降至90%臺階梯度進行。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為室溫，進樣量 為500yL/針，流動相流速為90mL/min，收集28 - 30分鐘的組分和殘余組分，將收集到的28 - 30分鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖 苷粗品。用50%的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6"-二鼠李糖基葡萄糖苷粗品，濃度為 80mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質的親水型色譜 填料(50 X 150πιπι，5μπι，華譜新創科技有限公司）流動相采用乙腈(含0.1 %甲酸）為有機相， 水(含0.1 %甲酸)為水相，采用0-60min20 %有機相等度洗脫。采用DAD紫外檢測器360nm選 擇吸收波長，制備溫度為室溫，進樣量為1000 yL/針，流動相流速為90mL/min，收集保留時間 在40-45min的組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。
[0056] 分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，其中質譜、 1H-NMR譜圖如圖4和5所示，
[0057] 13C-NMR (MeOD)解析如下，
[0058] 槲皮素母環：157.04(C2)，133.07(C3)，177.88(C4)，161.73(C5)，98.38(C6)， 164.24(C7)，93.32(C8)，157.53(C9)，104.51(C10)，122·16(C1'），116.04(C2'），144·51 (C3'），148.14(C4'），114.68(C5'），122.08(C6'）
[0059] 葡萄糖：101.24(C1"），72.48(C2"），75.66(C3"），70.47(C4"），72.67(C5"），66.89 (C6，，）。
[0060] 2，，-鼠李糖：100.85(C1"，），78.64(C2"，），70.74(C3"，），71.01(C4"，），68.32 (C5"'），16.13(C6"'）。
[0061] 6" -鼠李糖：99.10 (Cl""），77.51 (C2""），70.87 (C3""），70.91 (C4""），68.56 (C5""），16.43(C6""）。
[0062]綜合鑒定為槲皮素 -3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷，化合物的分子式為 C33H4QO2Q，分子量756.2103，結構式如下
[0064] S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法
[0065] 將所述殘余組分和所述剩余組分旋轉蒸發去除容積后混合，并干燥得到輔助品， 將所述輔助品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷 混合得到本實施例的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物。
[0066] 采用高效液相色譜對本申請的中藥組合物進行檢測，以所述中藥組合物的質量百 分比計，銀杏總黃酮24%，銀杏內酯6%，銀杏酸小于5ppm，槲皮素-3-0-葡萄糖苷1 %的，槲 皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷2.11 %的，銀杏內酯Al. 4 %的，銀杏內酯Bl. 8 %的和 銀杏內酯Cl. 3 %的，還檢測有白果內酯和蘆丁等化學成分。
[0067] 實施例2
[0068]槲皮素-3-0-葡萄糖苷的制備
[0069] 稱取銀杏葉提取物lg，溶于IOOmL體積濃度80%的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取 物溶液，濃度為10mg/mL，過0.45μηι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以 硅膠為基質的親水型色譜填料(50乂25〇 111111，1(^111，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙 醇為有機相，水為水相，有機相濃度為90 %等度，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長， 制備溫度為40°C，進樣量為200yL/針，流動相流速為60mL/min，收集15~20分鐘的組分和剩 余組分，將收集到的15~20分鐘的組分，進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品。用40 %的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品，濃度為20mg/mL，經 微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相填料（50 X 150mm，ΙΟμπι，華譜新創科技有限公司），流動相選擇含0.1 %體積濃度甲酸的乙醇為有機相， 含0.1%體積濃度甲酸的水為水相，采用等度洗脫方式，有機相濃度為20%共60分鐘。采用 DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為室溫，進樣量為1000 yL/針，流動相流速為 100mL/min，收集保留時間30-40min的組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-葡萄糖苷化合 物。
[0070] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為懈皮素 _3_0_匍萄糖苷。
[0071] 槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制備
[0072] 稱取銀杏葉提取物lg，溶于IOOmL體積濃度80%的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取 物溶液，濃度為10mg/mL，過0.45μηι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以 硅膠為基質的親水型色譜填料(50乂25〇 111111，1(^111，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙 醇為有機相，水為水相，有機相濃度為90 %等度，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長， 制備溫度為40°C，進樣量為200yL/針，流動相流速為60mL/min，收集28~32分鐘的組分和殘 余組分，將收集到的28 - 32分鐘的組分，進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品。用40 %的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李 糖基葡萄糖苷粗品，濃度為20mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以 硅膠為基質鍵合C18反相填料(50 X 150mm，ΙΟμπι，華譜新創科技有限公司），流動相選擇乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采用等度洗脫方式，有機相濃度為20% 共60分鐘。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為室溫，進樣量為lOOOyL/針， 流動相流速為100mL/min，收集保留時間40-45min的組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。
[0073] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷。
[0074] S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法
[0075] 將所述殘余組分和所述剩余組分旋轉蒸發去除容積后混合，并干燥得到輔助品， 將所述輔助品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷 混合得到本實施例的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物。
[0076] 采用高效液相色譜對本申請的中藥組合物進行檢測，以所述中藥組合物的質量百 分比計，銀杏總黃酮40 %，銀杏內酯16 %，銀杏酸I Ippm，槲皮素-3-0-葡萄糖苷1.68 %的，槲 皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷3.53 %的，銀杏內酯A3 %的，銀杏內酯Bl. 8 %的和銀 杏內酯Cl. 3 %的，還檢測有白果內酯和蘆丁等化學成分。
[0077] 實施例3
[0078]槲皮素-3-0-葡萄糖苷的制備
[0079] 稱取銀杏葉提取物100g，溶于200mL 50 %的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為500mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料（50Χ 250mm，10μ，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1 %甲酸)為有機相，水(含0.1 %甲酸)為水相，采用95%有機相等度方式洗脫。采用 DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為30°C，進樣量為3000yL/針，流動相流速為 120mL/min，收集15~20分鐘的組分和剩余組分，將收集到的15~20分鐘的組分進行旋轉蒸 發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品。用60 %的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品，濃度為80mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以 硅膠為基質鍵合C18反相填料(50 X 150mm，10μ，華譜新創科技有限公司），流動相選擇乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采用有機相從20%升至80%梯度洗脫。 采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為25°C，進樣量為3000yL/針，流動相流 速為120mL/min，收集保留時間35-40min的組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-葡萄糖苷 化合物。
[0080] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為懈皮素 _3_0_匍萄糖苷。
[0081] 槲皮素 -3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制備
[0082] 稱取銀杏葉提取物100g，溶于200mL 50 %的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為500mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料（50Χ 250mm，10μ，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1 %甲酸)為有機相，水(含0.1 %甲酸)為水相，采用95%有機相等度方式洗脫。采用 DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為30°C，進樣量為3000yL/針，流動相流速為 120mL/min，收集28~32分鐘的組分和殘余組分，將收集到的28 -32分鐘的組分進行旋轉蒸 發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品。用60 %的乙醇一水 溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品，濃度為80mg/mL，經微孔濾膜過濾， 進行二維液相色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相填料(50 X 150_，10μ，華譜新 創科技有限公司），流動相選擇乙醇(含0.1 %甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采 用有機相25%等度洗脫。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為25°C，進樣量 為3000yL/針，流動相流速為120mL/min，收集保留時間40-45min的組分，旋轉蒸發至干，得 到槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。
[0083] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷。
[0084] S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法
[0085] 將所述殘余組分和所述剩余組分旋轉蒸發去除容積后混合，并干燥得到輔助品， 將所述輔助品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷 混合得到本實施例的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物。
[0086] 采用高效液相色譜對本申請的中藥組合物進行檢測，以所述中藥組合物的質量百 分比計，銀杏總黃酮36%，銀杏內酯12%，銀杏酸O.lppm，槲皮素-3-0-葡萄糖苷1.55%的， 槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷2.31 %的，銀杏內酯A2.4%的，銀杏內酯Bl. 6 %的 和銀杏內酯Cl