279] 無效：〈20 %
[0280](七)不良反應的觀察。
[0281] 如實記錄各種不良反應及其出現時間、嚴重程度及處理方法、效果
[0282] (八）統計方法：。
[0283] 采用SSPS/PC+軟件，對有關數據進行配對資料t檢驗。
[0284] 三、試驗結果
[0285] 試驗結束共收集資料914例，不符合入選標準的病例60例，中途退出77例。療效統 計病例數為777例。
[0286] (一) 一般資料本試驗共觀察777例。
[0287] 本試驗觀察冠心病心絞痛患者190例，隨機分為銀杏葉注射液加硝酸甘油治療組 與硝酸甘油對照組。治療組127例，其中男77例，女50例；年齡41~73歲，平均56.23±8.62; 勞累型心絞痛103例，自發型心絞痛24,對照組63例，其中男38例，女25例;年齡42~75歲，平 均55.21±8.03;勞累型心絞痛56例，自發型心絞痛7例。兩組別在男女比例、年齡分布、疾病 類型上無差異，具有可比性。
[0288] 本試驗觀察缺血性腦血管病（急性腦梗塞）患者587例，隨機分為舒血寧注射液治 療組306例，其中男171例，女135例;年齡37~80歲，平均67.63±8.52歲；發病至就診時間6 小時~48小時，平均19.63土 14.49小時；合并有高血壓病201例、糖尿病112例。對照組281 例，其中男156例，女125例;年齡39~80歲，平均65.93 ± 9.76;發病至就診時間6小時~48小 時，平均20.51 ± 14.19小時;合并有高血壓病186例、糖尿病90例。兩組患者在性別、年齡、病 程、并發癥方面均無明顯差別，具有可比性。
[0289] (二)療效統計
[0290] 1、冠心病心絞痛療效統計
[0291] (1)治療前后兩組心絞痛癥狀療效比較見表1。
[0292]表1治療前后兩組心絞痛癥狀比較(X2)
[0294] 治療前后兩組冠心病心絞痛癥狀療效經滬檢驗，P<0.05,顯示治療組顯效率及總 有效率均優于對照組。
[0295] 2、治療前后兩組心電圖療效比較見表2。
[0296] 表2治療前后兩組心電圖療效比較(X2)
L0298」治療前后兩組冠心病心絞痛心電圖療效經Γ檢驗，P<0.05,顯示治療組顯效率、 有效率及總有效率均優于對照組。
[0299] 3、治療組治療前后對患者心率、血壓的影響見表3。
[0300] 表3治療組治療前后患者心率、血壓變化情況(X土S)
[0302] 治療組治療前后患者心率、血壓經t檢驗，P>0.05，顯示治療前后心率、血壓無明 顯變化。
[0303] 4、兩組治療前后血液流變指標變化結果見表4。
[0304]表4兩組治療前后血液流變指標變化比較
[0306] 兩組治療后比較經t檢驗P<0.05;治療組治療前后比較經t檢驗P〈0.05。顯示治療 組治療后血液流變指標改善優于對照組，治療組治療后血液流變指標改善優于治療前。
[0307] 2、缺血性腦血管病(急性腦梗塞)療效統計
[0308] (1)治療組與對照組臨床療效比較見表5。
[0309]表5兩組臨床療效比較(X2)
[0311] 兩組患者臨床療效經浐檢驗，P<0.05，有顯著性差異，說明治療組臨床基本治愈、 顯效及總有效率優于對照組。
[0312] (2)兩組患者治療前后神經功能缺損評分變化比較見表6。
[0313] 表6治療前后神經功能缺損評分比較(X土S)
[0315] 治療前后治療組、對照組組間神經功能缺損變化經t檢驗分別為p〈0.01和P〈0.05， 均有顯著性差異，說明治療后兩組神經功能較入院時有顯著好轉;治療前后兩組神經功能 缺損變化比較經t檢驗P〈0.05,也有顯著差異，說明治療組神經功能缺損變化優于對照組。
[0316] ⑶兩組治療前后日常生活活動能力評定見表7。
[0317] 表7日常生活活動Baxthe 1指數記分變化比較(X 土 S)
[0320] 治療前后兩組間日常生活活動能力比較經t檢驗P〈0.05，兩組日常生活活動能力 均有明顯改善;治療后治療組有對照組日常生活活動能力比較經t檢驗P〈0.05,說明治療組 療效優于對照組。
[0321 ] (4)兩組治療前后對血脂水平影響見表8。
[0322]表8治療前后血脂水平變化比較(x±S)
[0324] 治療后治療組與對照組血脂水平比較經t檢驗*P〈0.05、#P〈0.01，說明治療組降 低甘油三脂、膽固醇、低密度脂蛋白作用優于對照組。
[0325] (5)兩組治療前后對血液流變學的影響見表9。
[0326] 表9兩組治療前后血液流變指標變化比較(X土S)
[0329] 治療組治療前后血液流變學變化經t檢驗P〈C0.05，說明治療組有改善血液流變學 指標，降低血液黏度的特性。
[0330]四、安全性評估
[0331]本治療組在臨床觀察期間，發現有3例應用舒血寧注射液后，感覺稍有頭痛、頭昏、 皮膚有輕微灼熱感但未特殊處理及中斷治療，短暫精神興奮1例。未見引起顱內出血者。觀 察期間血、尿常規檢查及部分肝腎功能檢查未發現異常改變，也未發現其它不良反應。在治 療組中還發現部分患者應用銀杏葉注射液后，有明顯降低糖尿病腎病患者的蛋白尿。
[0332] 根據銀杏葉注射液臨床觀察，該藥治療缺血性腦血管病安全可靠，療效顯著，無毒 副作用，價格低廉，臨床使用范圍廣、價值大，值得推廣應用。
[0333] 顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明所作的舉例，而并非對實施方式的限定。對 于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或 變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或 變動仍處于本發明創造的保護范圍之中。
【主權項】
1. 一種由銀杏葉提取物形成的中藥組合物，以占所述中藥組合物的質量百分比計，包 括，24-40 %的銀杏總黃酮，6-16 %的銀杏內酯，銀杏酸小于5ppm。2. 根據權利要求1所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物，其特征在于，所述中藥組 合物中包括，1-1.68%的槲皮素-3-0-葡萄糖苷，2.11-3.53%的槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李 糖基葡萄糖苷。3. 根據權利要求1或2所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物，其特征在于，所述中 藥組合物中包括，1.4-3 %的銀杏內酯A，0.9-1.8 %的銀杏內酯B和1.2-1.3 %的銀杏內酯C。4. 根據權利要求1-3任一所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物，其特征在于，還包 括白果內酯和蘆丁。5. -種權利要求1-4任一所述由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法，包括， S1所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷的制備方法， (1) 將銀杏葉提取物溶于體積濃度為40-80%的乙醇-水溶液中，制備得到銀杏葉提取 物的濃度為10-1 〇〇〇mg/mL的提取物溶液； (2) 對所述步驟（1)得到的提取物溶液進行一維液相色譜分離，得到一維粗產品，本步 驟中一維液相色譜分離的條件為，色譜柱采用以硅膠為基質的親水型色譜填料;流動相中 的有機相為乙醇或甲醇，水相為水;洗脫條件以〇_15min有機相95%降至90%梯度進行或等 度進行;收集保留時間為15~20min的組分和剩余組分，將收集到的保留時間為15~20min 的組分去除溶劑干燥得到含有槲皮素-3-0-葡萄糖苷的一維粗產品； (3) 將步驟(2)得到的一維粗產品溶解在體積濃度為40-80%的甲醇-水溶液或乙醇-水 溶液中，得到所述一維粗產品的濃度為20-200mg/mL的粗產品溶液； (4) 對所述步驟(3)得到的粗產品溶液進行二維液相色譜制備，得到槲皮素-3-0-葡萄 糖苷； S2所述槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷的制備方法， (a) 將銀杏葉提取物溶于體積濃度為40-80%的乙醇-水溶液中，制備得到銀杏葉提取 物的濃度為10-1 〇〇〇mg/mL的提取物溶液； (b) 對所述步驟(a)得到的提取物溶液進行一維液相色譜分離，得到一維粗產品；本步 驟中一維液相色譜分離的條件為，色譜柱采用以硅膠為基質的親水型色譜填料;流動相中 的有機相為乙醇或乙腈，水相為水;洗脫條件以〇_15min有機相95%降至90%梯度進行或等 度進行；收集保留時間為28-32min的組分和殘余組分，將保留時間為28-32min的組分去除 溶劑干燥得到含有槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的一維粗產品； (c) 將步驟(b)得到的一維粗產品溶解在體積濃度為40-80%的甲醇-水溶液或乙醇-水 溶液中，得到所述一維粗產品的濃度為20-200mg/mL的粗產品溶液； (d) 對所述步驟(c)得到的粗產品溶液進行二維液相色譜制備，得到槲皮素-3-0-2"， 6"_二鼠李糖基葡萄糖苷； S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法 將所述殘余組分和和所述剩余組分去除容積后混合，并干燥得到輔助品，將所述輔助 品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷混合得到所 述由銀杏葉提取物形成的中藥組合物。6. 根據權利要求5所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法，其特征在于， 所述步驟(4)中二維液相色譜條件為，色譜柱采用以硅膠為基質鍵合C18反相填料;流 動相中的有機相為乙醇或甲醇，水相為水;洗脫條件以0-60min有機相15%增至80%梯度進 行或等度進行;收集保留時間為30_40min的組分，干燥得到槲皮素-3-0-葡萄糖苷。7. 根據權利要求5或6所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法，其特征在 于， 所述步驟(d)中二維液相色譜條件為，色譜柱采用以硅膠為基質鍵合C18反相填料;流 動相中的有機相為乙醇或乙腈，水相為水;0-60min內等度洗脫，洗脫時有機相的體積濃度 為15-25% ;收集保留時間為40-45min的組分，干燥得到槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡 萄糖苷。8. 根據權利要求5-7任一所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法，其特 征在于， 所述步驟(2)中一維液相色譜分離，有機相還含有甲酸，甲酸體積濃度為0.1 %;水相中 還含有甲酸，甲酸體積濃度為〇. 1 % ; 所述步驟(4)二維液相色譜制備，流動相中還含有甲酸，甲酸體積濃度為0.1 % ;水相中 還含有甲酸，甲酸體積濃度為〇. 1 %。9. 根據權利要求8所述的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法，其特征在于， 所述步驟(c)中一維液相色譜分離，有機相還含有甲酸，甲酸體積濃度為0.1 %;水相中 還含有甲酸，甲酸體積濃度為〇. 1 % ; 所述步驟(d)二維液相色譜制備，流動相中還含有甲酸，甲酸體積濃度為0.1 %;水相中 還含有甲酸，甲酸體積濃度為〇. 1 %。10. -種權利要求1-4任一所述中藥組合物在制備舒血寧注射液中的應用。
【專利摘要】本發明公開了一種由銀杏葉提取物形成的中藥組合物，以占所述中藥組合物的質量百分比計，包括，24-40％的銀杏總黃酮，6-16％的銀杏內酯，銀杏酸小于5ppm。優選地還包括，1-1.68％的槲皮素-3-O-葡萄糖苷，2.11-3.53％的槲皮素-3-O-2”,6”-二鼠李糖基葡萄糖苷。進一步優選地還包括，1.4-3％的銀杏內酯A，0.9-1.8％的銀杏內酯B和1.2-1.3％的銀杏內酯C。本申請的中藥組合物明確了兩種對其藥物具有重要影響的槲皮素-3-O-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-2”,6”-二鼠李糖基葡萄糖苷，并進一步的將其含量精確限定為1-1.68％和2.11-3.53％，進一步的，清楚的界定其銀杏內酯A1.4-3％，銀杏內酯B0.9-1.8％和銀杏內酯C1.2-1.3％。通過對銀杏葉提取物中有效成分含量的進一步精確，及有效成分的進一步認定，提高了銀杏葉提取物的藥效。
【IPC分類】A61K31/7048, A61P9/10, A61K9/08, C07H17/07, A61K31/365, C07H1/08, A61K36/16
【公開號】CN105641004
【申請號】
【發明人】王海濤, 王秋平, 杜秀琴
【申請人】北京華潤高科天然藥物有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月26日