. 25 %的，還檢測有白果內酯和蘆丁等化學成分。
[0087] 實施例4
[0088]槲皮素-3-0-葡萄糖苷的制備
[0089] 稱取銀杏葉提取物100g，溶于100mL40 %的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為l〇〇〇mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料（50Χ 250mm，10μ，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采用梯度洗脫:有機相濃度由95%經15 分鐘降低到90%，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為25°C，進樣量為2000 μ!7針，流動相流速為80mL/min，收集15~20分鐘的組分和剩余組分，將收集到的15~20分 鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品。用80%的乙醇一 水溶液溶解槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品，濃度為50mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色 譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相填料(50 X 150mm，10μ，華譜新創科技有限公 司），流動相選擇乙醇(含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1 %甲酸)為水相，采用15%有機相 濃度洗脫。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為40°C，進樣量為200μ!7針， 流動相流速為60mL/min，收集保留時間在30-35min組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-葡萄糖苷化合物。
[0090] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為懈皮素 _3_0_匍萄糖苷。
[0091] 槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制備
[0092] 稱取銀杏葉提取物100g，溶于100mL40 %的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為l〇〇〇mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料（50Χ 250mm，10μ，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采用梯度洗脫:有機相濃度由95%經15 分鐘降低到90%，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為25°C，進樣量為2000 μ!7針，流動相流速為80mL/min，收集28 - 32分鐘的組分和殘余組分，將收集到的28 - 32分 鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-2"，6"-二鼠李糖基葡萄糖苷粗 品。用80 %的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品，濃度為 50mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相填 料(50X 150mm，10μ，華譜新創科技有限公司），流動相選擇乙醇(含0.1%甲酸)為有機相，水 (含0.1%甲酸）為水相，采用15%有機相濃度洗脫。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波 長，制備溫度為40°C，進樣量為200yL/針，流動相流速為60mL/min，收集保留時間在30-35min組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。
[0093] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷。
[0094] S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法
[0095] 將所述殘余組分和所述剩余組分旋轉蒸發去除容積后混合，并干燥得到輔助品， 將所述輔助品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷 混合得到本實施例的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物。
[0096] 采用高效液相色譜對本申請的中藥組合物進行檢測，以所述中藥組合物的質量百 分比計，銀杏總黃酮30 %，銀杏內酯8 %，銀杏酸lppm，槲皮素-3-0-葡萄糖苷1.48%的，槲皮 素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷3.14%的，銀杏內酯A2.6 %的，銀杏內酯Bl. 8%的和銀 杏內酯Cl. 3 %的，還檢測有白果內酯和蘆丁等化學成分。
[0097] 實施例5
[0098]槲皮素-3-0-葡萄糖苷的制備
[0099]將銀杏葉提取物80g，溶于體積濃度55 %的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為550mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料(50乂25〇 111111，1(^111，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，洗脫方式0-15!^11有機相濃度從95%降 至90%梯度進行，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為30°C，進樣量為2000 yL/針，流動相流速為lOOmL/min，收集15~20分鐘的組分和剩余組分，將收集到的15~20分 鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品。用55 %的甲醇一 水溶液溶解槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品，濃度為60mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色 譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合Cl8反相填料(50 X 150mm，ΙΟμπι，華譜新創科技有限公 司），流動相選擇甲醇(含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采用梯度洗脫方 式，0-60分鐘有機相濃度從20%增到80 %。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫 度為室溫，進樣量為2000yL/針，流動相流速為90mL/min，收集保留時間30-40min的組分，旋 轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-葡萄糖苷化合物。
[0100]同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為懈皮素_3_0_匍萄糖苷。
[0101]槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制備
[0102] 將銀杏葉提取物80g，溶于體積濃度55%的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為550mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料(50乂25〇 111111，1(^111，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，洗脫方式0-15!^11有機相濃度從95%降 至90%梯度進行，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為30°C，進樣量為2000 μ!7針，流動相流速為lOOmL/min，收集28-32分鐘的組分和殘余組分，將收集到的28 - 32分 鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-2"，6"-二鼠李糖基葡萄糖苷粗 品。用55 %的甲醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品，濃度為 60mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相填 料(50 X 150mm，ΙΟμπι，華譜新創科技有限公司），流動相選擇乙腈(含0.1 %甲酸)為有機相， 水(含0.1%甲酸)為水相，0-60分鐘有機相15%等度洗脫。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸 收波長，制備溫度為室溫，進樣量為2000此/針，流動相流速為90mL/min，收集保留時間40-45min的組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。
[0103] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷。
[0104] S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法
[0105] 將所述殘余組分和所述剩余組分旋轉蒸發去除容積后混合，并干燥得到輔助品， 將所述輔助品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷 混合得到本實施例的由銀杏葉提取物形成的中藥組合物。
[0106] 采用高效液相色譜對本申請的中藥組合物進行檢測，以所述中藥組合物的質量百 分比計，銀杏總黃酮35 %，銀杏內酯14%，銀杏酸Ippm，槲皮素-3-0-葡萄糖苷1.34%的，槲 皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷3.21 %的，銀杏內酯Al. 37 %的，銀杏內酯Bl. 6 %的 和銀杏內酯Cl. 3 %的，還檢測有白果內酯和蘆丁等化學成分。
[0107] 實施例6
[0108]槲皮素-3-0-葡萄糖苷的制備
[0109]將銀杏葉提取物50g，溶于體積濃度60%的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為250mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料(50乂25〇 111111，1(^111，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，洗脫方式0-15!^11有機相濃度從95%降 至90%梯度進行，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為30°C，進樣量為2000 μ!7針，流動相流速為lOOmL/min，收集15~20分鐘的組分和剩余組分，將收集到的15~20分 鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品。用55%的乙醇一 水溶液溶解槲皮素-3-0-葡萄糖苷粗品，濃度為100mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相 色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相填料(50 X 150mm，ΙΟμπι，華譜新創科技有限 公司），流動相選擇乙醇(含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，采用梯度洗脫 方式，0-60分鐘有機相濃度從20 %增到80 %。采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備 溫度為室溫，進樣量為2500μ!7針，流動相流速為90mL/min，收集保留時間30-40min的組分， 旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-葡萄糖苷化合物。
[0110] 同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為懈皮素 _3_0_匍萄糖苷。
[0111] 槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷的制備
[0112]將銀杏葉提取物50g，溶于體積濃度60 %的乙醇一水溶液，制得銀杏葉提取物溶 液，濃度為250mg/mL，過0.45μπι微孔濾膜，進行一維液相色譜制備。一維液相色譜采用以硅 膠為基質的親水型色譜填料(50乂25〇 111111，1(^111，華譜新創科技有限公司），流動相采用乙醇 (含0.1%甲酸)為有機相，水(含0.1%甲酸)為水相，洗脫方式0-15!^11有機相濃度從95%降 至90%梯度進行，采用DAD紫外檢測器360nm選擇吸收波長，制備溫度為30°C，進樣量為2000 μ!7針，流動相流速為lOOmL/min，收集28-30分鐘的組分和殘余組分，將收集到的28 - 30分 鐘的組分進行旋轉蒸發濃縮至干，為一維制備槲皮素-3-0-2"，6"-二鼠李糖基葡萄糖苷粗 品。用55 %的乙醇一水溶液溶解槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷粗品，濃度為 100mg/mL，經微孔濾膜過濾，進行二維液相色譜制備，色譜柱為以硅膠為基質鍵合C18反相 填料（50 X 150mm，ΙΟμπι，華譜新創科技有限公司），流動相選擇乙腈(含0.1%甲酸）為有機 相，水(含〇. 1 %甲酸）為水相，0-60分鐘有機相20%等度洗脫。采用DAD紫外檢測器360nm選 擇吸收波長，制備溫度為室溫，進樣量為2500yL/針，流動相流速為90mL/min，收集保留時間 40-45min的組分，旋轉蒸發至干，得到槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷化合物。 [0113]同實施例1分別采用質譜、1H-NMR和13C-NMR(MeOD)對得到的終產物進行分析，最終 確認得到的為槲皮素-3-0-2"，6" -二鼠李糖基葡萄糖苷。
[0114] S3由銀杏葉提取物形成的中藥組合物的制備方法
[0115]將所述殘余組分和所述剩余組分旋轉蒸發去除容積后混合，并干燥得到輔助品， 將所述輔助品、所述槲皮素-3-0-葡萄糖苷和所述槲皮素-3-0-2"，6"_二鼠李糖基葡萄糖苷 混合得到本實施例的由銀杏葉提取物形成的中藥組合