使用實施例59的方法制備化合物1092,用1090代替1085。
[0442] 實施例64:化合物1015的制備
[0443]
[0444] 向中間體4曰2-1 (40mg，0.114mmol)、2,4,4,5,5-五甲基-[1,3,2]二氧雜環戊棚燒 (32mg，0.228mmol)、NaHC〇3( 29mg，0 . ；347mmol)在二氧六環/此0(4:1，ImL)的懸浮液添加 PdCbdppf (9mg，0.012mmo 1)。在微波中在120 °C下加熱混合物15min。使用AcOH酸化反應混 合物然后使用制備型HPLC純化，得到化合物1015。
[0445] 實施例65:化合物1016的制備
[0446]
[0447] 向中間體4曰2-1 (50mg，0.1 42mmo1 )的DMF( 2mL)溶液添加下-3-烘-1-醇（lOmg， 0.142mmol)、E；t3N(43mg，0.425mmol)，接著添加化I (2.7mg，0.014mmol)和反式二氯雙（Ξ苯 基麟)鈕（11)(10111旨，0.014臟〇1)。在微波中在115°(：下加熱得到的混合物10111111。使用制備型 HPLC純化得到的溶液。使用MeOH( 3mL)溶解獲得的中間體并添加5 % Pd/C (1 Omg)。使用此吹 掃系統并在室溫下攬拌化。過濾得到的混合物，并且通過制備型HPLC純化濾液，得到化合物 1016。
[044引實施例66:化合物1018的制備
[0449]
[0450] 步驟 1
[0451 ]向4-氯-2-氯甲基哇挫嘟lal-1 (Bioblocks，lOOmg，0.469mmol)的THF(2mL)溶液添 加3-甲基-下-1-烘（0.032mL，0.469mmol)、化3N( 142mg，1.41 Immol)，接著添加 Cul(8.9mg， 0.047臟〇1)和反式二氯雙(^苯基麟)鈕（11)(33111旨，0.047臟〇1)。在微波中在95°(：下加熱得 到的混合物lOmin。過濾得到的溶液并使用化OAc/己燒通過快速色譜純化，得到中間體66a。 [045^ 步驟2
[0453] 向脈4al-l (82mg，0.468mmol)在DMA( ImL)中的溶液添加 K0H(0.075mL，12.7N)。在 室溫下攬拌反應并將作為固體的中間體66a(115mg，0.468mmol)添加到混合物。混合物在室 溫下攬拌化。使用化OAc和水稀釋反應混合物。分開層并使用化OAc萃取水層。合并有機層， 使用水、鹽水洗涂兩次，使用MgS〇4干燥，過濾并濃縮。使用W 20-100 %化OAc的己燒溶液洗 脫的快速色譜，得到中間體66b。
[0454] 步驟 3
[0455] 將中間體66b( l〇〇mg，0.261mmol)溶于Me0H(3mL)中并添加 5%Pd/C( lOmg)。使用出 吹掃系統并在室溫下攬拌化。過濾得到的混合物并通過制備型HPLC純化濾液，得到化合物 1018。
[0456] 實施例67:化合物1002的制備
[0457]
[045引 向 4-氯-2-氯甲基哇挫嘟 1曰1-1(810610。43,35111邑，0.16411111101)的1口'0化1.51110懸 浮液添加1，3-丙二醇（13mg，0.164mmol)，接著添加化3N(0.046mL，0.328mmol)并在75°C下 攬拌反應混合物比。然后使用化OAc稀釋混合物并使用飽和化肥化洗涂，用MgS04干燥，過濾 并濃縮，得到殘留物。向環脈3a 1 -3 ( 29mg，0.164mmo 1)在DMA(ImL)中的溶液添加 K0H (0.013mL，12.7N)。在室溫下攬拌溶液10min，并且之前獲得的殘留物作為在DMA(0.5mL)中 的溶液添加。得到的混合物在室溫下攬拌過夜，使用AcOH酸化并通過制備型HPLC純化，得到 化合物1002。
[0459]使用在實施例中描述的標準分析HPLC或UPLC條件測量每個化合物的保留時間 (tR)。如本領域技術人員熟知的，保留時間值對具體的測量條件是敏感的。因此，即使使用 相同的溶劑、流動速率、線性梯度等條件，保留時間值在測量時仍然可W不同，例如，在不同 的HPLC或UPLC儀器上。即使當在相同的儀器上測量時，值在測量時也可W是不同的，例如， 使用不同的單個HPLC或UPLC柱，或當在相同的儀器和相同的單個柱上測量時，值可W例如 在不同情況下取得的單個測量值之間變化。
[0466] 實施例A: RSV細胞病變效應
[0467] 最初在基于細胞病變效應(CPE)的病毒復制分析中，使用永生化細胞和RSV的實驗 室菌株化ong)測試本發明的化合物。該分析評價化合物抑制病毒復制的能力。
[046引過程：
[0469] 通過在384-孔黑色透明底板(Greiner BioH3ne)的每個孔中，在20化分析培養基 (定義為補充2%熱滅活的胎牛血清和1%青霉素/鏈霉素的DMEM)中接種2,500個肥P-2細胞 (ATCC)制備分析板。分析板在37°C下在含有5 %C〇2的培養箱中解育過夜。次日，在DMS0中制 備測試化合物的10-點連續稀釋液。隨后使用分析培養基稀釋化合物并將20化稀釋的化合 物(包含1.5%DMS0)轉移到分析板用于評價抗病毒活性。
[0470] 對于WE分析，使用20化的在分析培養基中稀釋的RSV Long(ATCC)W0.015的M0I 感染細胞。DMS0濃度在包括陰性和陽性對照的整個分析板上是恒定的。分析板在37°C下在 包含5%C02的培養箱中解育3天。通過添加10化的CellTiter-Glo(ProMega)評價細胞活力。 使用化Vision讀板器(Perkin Elmer)測量發光。分別使用來自C陽分析的原始數據計算ECso 值。
[0471] 在實施例A中描述的分析中測試本發明的所有化合物，即化合物1001-1222。在實 施例A的分析中測試的化合物顯示ΙΟμΜ或更低的ECso值。代表性的數據顯示如下：
[0473]將本申請中引用的每篇參考文獻，包括所有專利、專利申請和出版物的全部內容 通過引用并入本文，就如同其各自單獨地被并入。此外，應理解的是，在W上本發明的教導 下，本領域技術人員將對本發明做出某些變化或修改，并且運些等價方式將仍在由本申請 所附的權利要求限定的本發明的范圍內。
【主權項】
1. 式(I)的化合物、或其外消旋體、對映異構體、非對映異構體或互變異構體、或其鹽： 其中：R1為任選地被取代基取代1至4次的8-14元雜環或雜芳基，所述取代基各自獨立地選自： R1A、氧代基、鹵素、-CNJ&-6)鹵代烷基、6)烷基、-C(=0)0H 和-(：( = 0)-0-(&-6)烷 基； 妒4為(&-6)烷基、（C3-7)環烷基、芳基、雜芳基或雜環基，其中所述烷基、環烷基、芳基、雜 芳基和雜環基各自任選地被取代基單取代、二取代或三取代，所述取代基各自獨立地選自： (&-6)烷基、（&- 6)鹵代烷基、鹵素、-0(&-6)烷基、 0)01-(:(=0)-1^^-(:(=0)-((^6)烷基-NGCi-6)烷基） 2、-c(=o)-o-r1b、-c(=o)-nh2、-c (=0) -N( H) R1b、-C (= 0) -N( (&-6)烷基）2、-S02 (&-6)鹵烷基或-S02R1b ; 1^為(&-6)烷基、（C3-7)環烷基、芳基、雜芳基或雜環基； R2 為（Ci-6)烷基、_0_、_S-或-NR 2A; R2%H或(&-6)烷基； R3為(&-6)烷基、（C3-7)環烷基、芳基、雜芳基、雜環基、_(&-6)烷基-(C3-7)環烷基、_(&-6) 烷基-芳基、-(Ck)烷基-雜芳基或-(Ck)烷基-雜環基，其中所述烷基、環烷基、芳基、雜芳 基和雜環基各自任選地被R 3A單取代、二取代或三取代； 或其中R2#PR3與其所連接的N連接在一起，以形成任選地被R3A單取代、二取代或三取代 的雜環； R3A各自獨立地選自鹵素、氧代基、-CN、OH、-C00H、- ( Ck )烷基(任選地被-OH取代）、-0-(Ci-6)烷基、（C3-7)環烷基、（&- 6)鹵代烷基、-0-C ( = 0) -R3B、-C ( = 0) -o-r3B、-s〇2nh2、-s〇2-n (H)R3B、-S〇2-N((Ci-6)烷基）2、-S0R3B、-S02R 3B、-C(=0)-NH2、-C(=0)-N(H)R3B、-C(=0)-N ((Ci-6)烷基） 2、-c( =o)-nh-s〇2r3B、-s〇2-nh-c( =0)R3B、-NH2、-N(H)R3B、-N( (Ci-6)烷基）2、-NH-C( = 0) R3B、-NH-C (= 0) 0-R3B、-c (= 0) -R3qPR3B (任選地被(&-6)烷基取代）； 1^為(&-6)烷基、（C3-7)環烷基、芳基、雜芳基或雜環基； R4各自獨立地選自Η、鹵素、-CN、OH、-C00H、-(Ci-6)烷基、-0-(Ci-6)烷基、（C3-7)環烷基、 (Cl-6 )鹵代烷基、-C ( = 0 ) ( Cl-6 )烷基、_S〇2NH2、_S〇2_NH( Cl-6 )烷基、_S〇2_N( ( Cl-6 )烷基）2、_ SOCCi-6)烷基、-SOdCi-6)烷基、-c( =0)-NH2、-C( =0)-^((^-6)烷基、-c( =0)-N( (Ci-6)烷 基）2、_C(=0) -NH-S〇2 (Ci-6)烷基、_S〇2_NH-C (=0)-(Ci-6)烷基、_NH2、_NH (Ci-6)烷基、_N " ) 2、_MK C3-7)環、-N " K 7)環、-NH_(X = 0 x 、-Ml_ (：(=0)0(&-6)烷基和 R4a; 胙為_(&-6)烷基-雜環基、-(Ck)烷基-雜芳基、雜環基或雜芳基，其中所述雜環基和雜 芳基各自任選地被()烷基單取代、二取代或三取代； η為0、1、2或3。2. 根據權利要求1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 R1為任選地被氧代基、（&-6)烷基、鹵素、-CN、（ Ci-6)鹵代烷基、OH、-ο (Ci-6)烷基、-c (= Ο) 0H、-C( =0)-0-(&-6)烷基、（C3-7)環烷基單取代或二取代的9至14元雜環或雜芳基。3. 根據權利要求2所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 R1為選自以下的9至14元雜環或雜芳基：其中所述雜芳基和雜環基任選地被(&-6)烷基、鹵素、-CNJCh)鹵代烷基、01-0((^-6) 烷基、-C( =0)0H、-C( =0)-0-(&-6)烷基或(C3-7)環烷基單取代或二取代。4. 根據權利要求1至3中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 R2 為(&-6)烷基、-0-或-NR2A; R2%H或(&-6)烷基； R3為芳基、雜芳基、雜環基、_(Cl-6)烷基-(C3-7)環烷基、_(Cl-6)烷基 -芳基、-(Cl-6)烷基_ 雜芳基或-(Ch)烷基-雜環基，其中所述環烷基、芳基、雜芳基和雜環基各自任選地被護4單 取代、二取代或三取代； 1^各自獨立地選自鹵素、-CN、OH、-C00H、- (Cp6)烷基、-0- (Cp6)烷基、（C3-7)環烷基、 (Cl-6)鹵代烷基、_〇_C( =0)-(Cl-6)烷基、_C( =0)-〇-(Cl-6)烷基、-S〇2NH2、-S〇2-NH(Cl-6)燒 基、-S〇2-N( ( Cl-6 )烷基）2、_S0 ( Cl-6 )烷基、-S〇2 ( Cl-6 )烷基、-C ( = 0 )-順2、_C ( = 0 ) -NH( Cl-6 )燒 基、-C ( = 0) -N ((Ci-6)烷基）2、_C ( = 0) -NH_S〇2 (Ci-6)烷基、_S〇2-NH_C (=0)-(Ci-6)烷基、_ NH2、-NH(Ci-6)烷基、-N( (Ci-6)烷基)2、_NH_C( =0) (Ci-6)烷基、_NH_C( =0)0(Ci-6)烷基、雜環 基(任選地被(Ck )烷基取代)和雜芳基(任選地被(Ck )烷基取代）。5. 根據權利要求4所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 R2 為-〇-或-NR2A; R2%H或(&-6)烷基； R3為雜芳基、雜環基、-(&-6)烷基-雜芳基或-(Ck)烷基-雜環基，其中所述雜芳基和雜 環基各自任選地被R3A單取代、二取代或三取代； R3A各自獨立地選自鹵素、氧代基、-CN、OH、-COOH、- ( Ck )烷基(任選地被-OH取代）、-0-(&-6)烷基、（C3-7)環烷基、（&- 6)鹵代烷基、-0-C (= 0) - (&-6)烷基、-C ( = 0) -0- (&-6)烷基、_ S02NH2、-S02-NH (Ci-6)烷基、-S〇2-N ((Ci-6)烷基)2、-S0 (&-6)烷基、-S02 (&-6)烷基、-C ( = 0) _ ΝΗ2、-(Χ=0)-ΝΗ(&-6)烷基、-(Χ = 0)-Ν((&-6)烷基 k-CXzOhNH-SOKCHH^S'-SOrNH-C( =0)-(Ci-6)烷基、_NH2、_NH(Ci-6)烷基、 _N( (Ci-6)烷基）2、_NH-C( =0) (Ci-6)烷基、_NH-C(= 〇)〇(&-6)烷基、雜環基(任選地被(&-6)烷基取代)和雜芳基(任選地被(&-6)烷基取代）。6. 根據權利要求1至5中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 R4各自獨立地選自H、鹵素、-0Ν、0Η、-(&-6)烷基、-(HCi-6)烷基、（C 3-7)環烷基、（&-6)鹵 代烷基和R4a; R4a為雜環基或雜芳基，其中所述雜環基和雜芳基各自任選地被(Cm)烷基單取代、二取 代或三取代。7. 根據權利要求6所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中 R4各自獨立地選自Η、鹵素、-CN、0H、- (&-6)烷基、-0- (&-6)烷基、（C3-7)環烷基和(&-6)鹵 代烷基。8. 根據權利要求1或7中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中η為0或1。9. 根據權利要求8所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中η為0。10. 作為藥物的根據權利要求1至9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽。11. 根據權利要求1至9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽用于制備用于治 療或預防人類的RSV感染的藥物的用途。12. -種藥物組合物，其包含根據權利要求1至9中任一項所述的化合物或其藥學上可 接受的鹽，和藥學上可接受的載體。
【專利摘要】式(I)的化合物，其中R1、R2、R3、R4和n在本文中定義，用作RSV的抑制劑。
【IPC分類】C07D487/04, C07D401/06, C07D407/14, A61P31/14, A61K31/517, A61K31/519, C07D471/04, C07D403/06, C07D413/04, C07D401/14, C07D413/14, C07D413/06, C07D403/14
【公開號】CN105683190
【申請號】
【發明人】C·斯圖里諾, T·哈爾莫斯, A·德克拉, M·杜普萊西斯, P·德魯瓦, A·亞卡林, L·莫倫西, C·庫恩, C·格蘭德-梅特, M·特倫布萊, C·布洛楚
【申請人】美迪維爾公司
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2013年10月29日