例如約 25皿或更小，具體地說約ΙΟμηι或更小（例如，0.1-10 μηι、1-10皿、1-25μηι或1-50皿之間）。機 械地噴氣研磨所述物質的方法允許在無再漿化步驟的情況下釋放溶劑。然而，隨后還可W 進行任選的溶劑再漿化，例如通過使所述物質在乙酸乙醋中再漿化。
[0134] 本發明的另一個方面設及一種制備化合物1:
[0135]
[0136] 或其鹽的方法，
[0137] 所述方法包括W下步驟：
[0138] (a)使式IV的初始化合物氨化：
[0139]
[0140] 其中R是徑基保護基，
[0141] W產生式Ila的化合物：
[0142]
[0143] (b)使式Ila的化合物還原，W產生式Ilia的化合物：
[0144]
[0145] (C)使式Ilia的化合物去保護，W產生化合物2:
[0146]
A及
[0147] (d)使化合物2在催化劑的存在下沉淀或結晶，W產生化合物1:
[014 引
[0149] 或其鹽。
[0150] 式IV的初始化合物可W商購獲得（例如獲自Aurora Fine Qiemicals(San Diego, CA))，或通過例如如Wheeler等人，J丄abeled Compounds Radiopharm. 29: 583( 1991)和 化ou等人，Synthesis 6:565(1992)中所公開的已知方法來合成，所述文獻W引用的方式整 體并入本文。在步驟(a)中使式IV的化合物氨化W產生式Ila的化合物可W通過本領域中已 知的方法來進行。例如，該步驟可W在催化轉移氨化條件下（例如，在木炭上5 %鈕的存在 下)進行。氨化作用可W通過將式IV的化合物加熱至(例如與甲酸和鹽酸一起在溶劑例如乙 酸乙醋水溶液中）回流而發生。氨化作用可W在約50°C至約80°C的溫度下（例如，在約68°C 下)進行約12-48小時，例如約24小時。用于影響氨化的試劑(例如，鈕和木炭)可W在使反應 混合物達到高溫(例如，約50°C至約80°C，或在約68°C下）后添加。完成后，通過例如過濾去 除催化劑，并用例如乙酸乙醋進行沖洗。在分離有機層后，可W使用例如碳酸氨鋼水溶液 和/或NaCl水溶液對其進行沖洗。
[0151] 在步驟(b)中將式Ila的化合物還原成式Ilia的化合物可W通過本領域中已知的 方法來進行。例如，可W利用還原劑(例如棚氨化鋼)在有機溶劑(例如，二氯甲燒和乙醇的 混合物）中進行還原。該還原可W在任何合適的溫度(例如，約-5°C至約10°C，例如約0°C至 約5°C)下進行約0.5至3小時，例如約1.5小時。該還原可W任選地在Ξ氯化錦的存在下進 行。在一個實施方案中，氯化錦的量為約50mol%(例如，50mol%)。在另一個實施方案中，氯 化錦的量為約20mol%或約lOmol% (例如20mol%或lOmol%)。還原后，可W例如用丙酬澤 滅反應，并用酸例如鹽酸中和溶液。含有式II la的化合物的有機層可W被分離并例如用水 沖洗。
[0152] 在步驟(C)中使式IIIA的化合物去保護W產生化合物2可W通過本領域中已知的 方法進行。例如，去保護可W在弱堿例如氨氧化錠的存在下在溶劑例如甲醇中進行。去保護 可W進行約12-48小時，例如約24小時。在去保護后，可W將混合物濃縮，溶解于水性溶劑例 如水中，并用有機溶劑例如乙酸乙醋沖洗。
[0153] 在步驟(d)中使化合物2沉淀或結晶W產生化合物1可W如上所述來進行。
[0154] 在某些實施方案中，可W修改所述方法W包括保護式Ilia的化合物的徑基W產生 式Va的化合物的步驟，例如作為上述步驟(b)的部分或作為步驟(b)之后的步驟(bl)。在一 個實施例中，所述方法包括W下步驟:保護式Ilia的化合物W產生式化的化合物：
[0155]
[0156] 其中R和化各自獨立地為徑基保護基；
[0157] 或其鹽。
[0158] 在一些實施方案中，所述方法可W進一步包括通過去除扣徑基保護基使式Va的化 合物去保護W產生式Ilia的化合物的步驟，例如作為上述步驟(b)的部分或作為步驟(b)和 (b)之后的步驟化2)。在其它實施方案中，所述方法可W進一步包括通過去除所有徑基保護 基使式Va的化合物去保護W產生化合物2的步驟，例如作為備選步驟(C)或作為步驟(b)和 (bl)之后的步驟化2)。
[0159] 保護式Ilia的化合物W產生式化的化合物可W通過本領域中已知的方法來進行。 例如，徑基可W被保護為酸。將徑基保護為烷基酸(例如，甲基酸)可W利用烷基化劑(例如， 甲基化劑如硫酸二甲醋），在例如四下基艦化錠的存在下，在兩相體系（例如，己燒和50%氨 氧化鋼水溶液的混合物）中進行。該反應可W在任何合適的溫度(例如，約5°C至約45°C，例 如約30°C至約45°C )下進行約0.5至6小時，例如約3小時。或者，徑基可W被保護為醋。將徑 基保護為醋可W利用酷化劑例如乙酸酢在有機溶劑例如化晚中進行。該酷化作用可W在任 何合適的溫度（例如約〇°C至約40°C，例如約15°C至約25°C )下進行約8至24小時，例如約12 小時。
[0160] 使其中徑基被保護為酸的式Va的化合物去保護W產生式Ilia的化合物可W通過 本領域中已知的方法來進行。例如，甲基酸的裂解可W利用路易斯酸例如Ξ氯化棚在有機 溶劑例如二氯甲燒中進行。該反應可W在任何合適的溫度(例如約-78°C至約-65°C)下進行 約8至16小時，例如約12小時。
[0161] 當徑基被保護為醋時，使式Va的化合物去保護W產生化合物2可W通過本領域中 已知的方法來進行。例如，去保護可W在弱堿例如氨氧化錠的存在下在溶劑例如甲醇中進 行。去保護可W進行約12-48小時，例如約24小時。在去保護后，可W將混合物濃縮，溶解于 水性溶劑例如水中，并用有機溶劑例如乙酸乙醋沖洗。
[0162] 用途
[0163] 通過本發明產生的化合物1或其藥學上可接受的鹽可W用于抑制CDA活性。化合物 1或其藥學上可接受的鹽可W呈藥物組合物(例如，與藥學上可接受的賦形劑一起)形式。在 一些實施方案中，化合物1或其藥學上可接受的鹽可W與CDA底物藥物(例如，可W用于治療 癌癥的CDA底物藥物)組合地用于治療有需要的受試者的癌癥的方法中。CDA底物藥物的實 例包括但不限于地西他濱、5-氮雜胞巧、吉西他濱、阿糖胞巧、替扎他濱、5-氣-2/-脫氧胞巧 和cytochlor。在一些實施方案中，所述癌癥可W選自由血液癌癥和實體癌組成的組。在某 些實施方案中，血液癌癥可W為骨髓增生異常綜合癥或白血病，例如急性骨髓性白血病或 慢性骨髓性白血病。在某些實施方案中，實體癌可W是膜腺癌、卵巢癌、腹膜癌、非小細胞肺 癌、轉移性乳腺癌、膀脫癌、鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌、婦科癌癥、輸卵管癌、肝癌、肝細 胞癌、肺癌、宮頸癌、泌尿生殖道癌或胃腸癌。在一些實施方案中，化合物1或其藥學上可接 受的鹽可W與CDA底物藥物大體上同時、在CDA底物藥物之前或在CDA底物藥物之后，任選地 W單個單位劑型或W多個分開的單位劑型施用。
[0164] 根據本發明的實施方案描述于下文的非限制性實施例中。
[01化]實施例1
[0166] 從化合物3制備化合物4
[0167]
[0168] 將化合物 3(300邑，636111111〇1)、乙酸乙醋（4.5〇、水（7201^)和1畑(：1(25.5血，0.040 當量）的混合物攬拌5min，然后加入甲酸（240mL，10.0當量）。在用氮氣吹掃5min后，將該混 合物加熱至68°C并用Pd/C(120g，5重量％干基，50%濕度，Degussa類型E107 MA/W，0.044當 量)處理。在68-70°C下繼續攬拌2地。將混合物冷卻至30-35°C，通過CeliteK墊(300g)過濾， 并用乙酸乙醋（15 0 0 m L)沖洗該墊。從濾液分離有機層，并先后用10 % N a Η C 0 3水溶液 (1500mL)和27%化Cl水溶液(750mL)沖洗Ξ次。在減壓下濃縮有機層，W獲得粗制化合物4 (290邑，97%收率)。
[01~]實施例2
[0170] 從化合物4制備化合物5
[0171]
[0172] 將化合物4(99.3g，209mmol)溶解于二氯甲燒（1.1L)中，然后用乙醇(0.7化)和氯 化錦（III)屯水合物（39肖，105111111〇1，0.50當量）處理。攬動混合物5111111并冷卻至3°(：。歷時 30min添加棚氨化鋼（19.8旨，523111111〇1，2.5當量）的水(941^)溶液，溫度維持在低于6°(：。在0 °C下攬拌所得混合物1.化。用丙酬(42mL，565mmol，2.7當量)澤滅反應，溫度維持在低于8 。(:。攬拌5min后，用0.2M氯化氨（1.2L，1.18當量)處理混合物W調節pH至7，溫度維持在低于 8°C。在2-10°C下分離有機層，與10%Na肥化水溶液(0.4化)混合，然后加溫至25°C