專利名稱：平菇菌株kzh－1及制備方法
技術領域：
本發明屬微生物技術領域，具體涉及平菇菌株KZH-1及制備方法。
背景技術：
平菇Pleurotus ostreatus是目前栽培量最大的食用菌品種，現有平菇品種隨著培養和使用時間的延長，個體的菌齡越來越大，新陳代謝機能逐漸減低，失去抗逆能力，漸漸失去原有的優良性狀，商品性能降低，以至失去其使用價值。菌種遺傳性發生變化；菌種被病毒寄生；培養條件不適合，不能滿足它的生活要求，使其失去自我調節能力，失去正常的生理功能等因素是造成菌種退化的原因，是量變到質變的漸變結果，也是一種病態和衰老的綜合表現。目前主要通過自然選育、雜交育種、誘變育種、菌種脫毒等方法來培育新的菌株和對原菌株性狀進行復壯，確保菌種的優良特性。自然選育不需要特殊的設備，但要靠收集大量的不同條件下生長的菌株進行大量的對比試驗，時間長，工作量大；雜交育種、誘變育種、菌種脫毒則需要特殊設備來完成，工藝復雜，受多種因素影響，結果不穩定。
發明內容
本發明克服了上述方法的不足，利用野生平菇資源，通過子實體分離、純化、出菇試驗篩選、培育出生長強壯、適應性強、商品性能具佳的優良菌株。
本發明采用的真菌是平菇Pleurotus ostreatus KZH-1；保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址中國.北京沖關村；保藏日期2006年01月25日；保藏登記入冊的編號CGMCC NO.1600。
該平菇子實體中等大，菌蓋直徑3-14厘米，黑褐色，扁半球形，平展后扇形，靠近柄部下凹；菌肉白色，稍厚；菌褶白色，稍密；菌柄側生、短，內實、白色，長1-3厘米，粗0.5-1.5厘米；孢子印白色，孢子近圓柱形，光滑無色。菌絲培養溫度22-26℃，出菇溫度5-28℃。該菌株適應性強，高產優質，性能穩定，適合多種培養料栽培。
本發明的技術方案①采集野生平菇子實體；②組織分離；③純化菌株及菌株鑒定；
④出菇試驗(生物學特性比較及生產性狀比較)；⑤確定優良菌株；⑥菌種生產及菌種應用；經過反復篩選，獲得產量高、抗逆性強的平菇菌株KZH-1。
本發明真菌Pleurotus ostreatusKZH-1培養方法菌種分離純化培養基(PDA培養基)馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克，兌水1000毫升。
平菇菌株分離及鑒定方法1、將平菇子實體組織塊接種到上述試管瓊脂培養基斜面上，于25℃下培養5-7天，對分離培養的試管每天觀察記錄，及時剔除已污染的試管，挑選出無污染、長勢良好的菌株，獲得平菇分離試管種。
2、將分離試管種菌絲塊接種到上述瓊脂培養基的平板培養皿上進行菌種純化，2天后取尖端菌絲塊接種在培養基斜面上，于25℃下培養7天，獲得平菇純化試管種。
3、用平菇純化試管種，制作二級種，生產栽培種，進行出菇試驗，獲得子實體，確定分離得到的純菌種為平菇菌種。
本發明平菇菌種的制備方法分為固體菌種和液體菌種兩種。
固體菌種制備方法固體培養基配方為①麥粒或蕎粒83％，雜木屑15％，石膏粉或碳酸鈣2％。
②雜木屑78％、麩皮20％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。
③棉籽殼35％、木屑45％、麩皮18％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。
1、將平菇的菌絲體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為PDA培養基，于25℃下培養7-8天，獲得試管菌種。
2、采用前述固體培養基配方。將培養料混合后，加水拌均勻后，裝入750ml的大口瓶中，壓緊封口后在121℃滅菌120分鐘，在無菌室冷卻，接入試管菌種，于25℃培養25-30天，直到菌絲長滿。
液體菌種制備方法液體培養基配方為馬鈴薯20％、葡萄糖2％、蛋白胨0.2％、磷酸二氫鉀0.05％、硫酸鎂0.05％，余下為水，PH自然。
1、將平菇的菌絲體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為PDA培養基，于25℃下培養7-8天，獲得試管菌種。
2、將培養液裝入500ml三角瓶內(每瓶裝100ml)，培養基配方為前述液體培養基配方，用棉塞和牛皮紙封口，在0.15兆帕壓力下滅菌30分鐘，取出，冷至30時接種。
3、將試管種接種到500ml三角瓶(每瓶裝100ml)液體培養基中，于25℃下搖床培養，轉速為150r/min，培養時間5-7天。
4、將搖瓶菌種接種到25L自動發酵生產線的發酵罐中，通氣量為1∶0.8v/(v·min)；攪拌轉速為150r/min接種量為5％；罐壓0.04Mpa；pH為6.0；溫度為25℃；通氣培養72小時，獲得平菇液體菌種。
具體實施例方式實施例一1、將野生平菇子實體組織塊接種到上述菌種分離純化培養基斜面上，于25℃下培養7天，對分離培養的試管每天觀察記錄，及時剔除已污染的試管，挑選出無污染、長勢良好的菌株，獲得平菇分離試管種。
2、將分離試管種菌絲塊接種到上述瓊脂培養基的平板培養皿上進行菌種純化，2天后取尖端菌絲塊接種在培養基斜面上，于25℃下培養7天，獲得平菇純化試管種。
3、用平菇純化試管種，制作二級種，生產栽培種，進行出菇試驗，獲得子實體，確定分離得到的純菌種為平菇菌種。
4、將Pleurotus ostreatusKZH-1的菌絲體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為PDA培養基，25℃下培養7天，獲得試管種。
5、采用固體培養基配方麥粒或養粒83％，雜木屑15％，石膏粉或碳酸鈣2％。先把麥粒或蕎粒用清水洗干凈，用2％石灰水浸泡15小時左右，濾出，煮15分鐘，倒出濾水，加入雜木屑，石膏粉或碳酸鈣拌勻，裝入750毫升的專用菌種瓶，封口，在121℃下滅菌120分鐘，在無菌室冷卻，接入試管菌種，于25℃培養30天，直到菌絲長滿，獲得菌種。
實施例二1、將野生平菇子實體組織塊接種到上述菌種分離純化培養基斜面上，于25℃下培養7天，對分離培養的試管每天觀察記錄，及時剔除已污染的試管，挑選出無污染、長勢良好的菌株，獲得平菇分離試管種。
2、將分離試管種菌絲塊接種到上述瓊脂培養基的平板培養皿上進行菌種純化，2天后取尖端菌絲塊接種在培養基斜面上，于25℃下培養7天，獲得平菇純化試管種。
3、用平菇純化試管種，制作二級種，生產栽培種，進行出菇試驗，獲得子實體，確定分離得到的純菌種為平菇菌種。
4、將Pleurotus ostreatusKZH-1的菌絲體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為PDA培養基，25℃下培養7天，獲得試管種。
5、采用前述固體培養基配方雜木屑78％、麩皮20％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。將培養料混合，加水拌均勻后，裝入750ml的大口瓶中，壓緊封口后在121℃滅菌120分鐘，在無菌室冷卻，接入試管菌種，于25℃培養30天，直到菌絲長滿，獲得平菇固體菌種。
實施例三1、將野生平菇子實體組織塊接種到上述菌種分離純化培養基斜面上，于25℃下培養7天，對分離培養的試管每天觀察記錄，及時剔除已污染的試管，挑選出無污染、長勢良好的菌株，獲得平菇分離試管種。
2、將分離試管種菌絲塊接種到上述瓊脂培養基的平板培養皿上進行菌種純化，2天后取尖端菌絲塊接種在培養基斜面上，于25℃下培養7天，獲得平菇純化試管種。
3、用平菇純化試管種，制作二級種，生產栽培種，進行出菇試驗，獲得子實體，確定分離得到的純菌種為平菇菌種。
4、將Pleurotus ostreatusKZH-1的菌絲體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為PDA培養基，25℃下培養7天，獲得試管種。
5、采用前述固體培養基配方棉籽殼35％、木屑45％、麩皮18％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然。將培養料混合，加水拌均勻后，裝入750ml的大口瓶中，壓緊封口后在121℃滅菌120分鐘，在無菌室冷卻，接入試管菌種，于25℃培養30天，直到菌絲長滿，獲得平菇固體菌種。
實施例四1、將野生平菇子實體組織塊接種到上述菌種分離純化培養基斜面上，于25℃下培養7天，對分離培養的試管每天觀察記錄，及時剔除已污染的試管，挑選出無污染、長勢良好的菌株，獲得平菇分離試管種。
2、將分離試管種菌絲塊接種到上述瓊脂培養基的平板培養皿上進行菌種純化，2天后取尖端菌絲塊接種在培養基斜面上，于25℃下培養7天，獲得平菇純化試管種。
3、用平菇純化試管種，制作二級種，生產栽培種，進行出菇試驗，獲得子實體，確定分離得到的純菌種為平菇菌種。
4、將Pleurotus.ostreatusKZH-1的菌絲體接種到試管瓊脂培養基斜面上，培養基配方為PDA培養基，25℃下培養7天，獲得試管種。
5、將試管種接種到500ml三角瓶中(每瓶裝100ml)液體培養基中，培養基配方為馬鈴薯20％、葡萄糖2％、蛋白胨0.2％、磷酸二氫鉀0.05％、硫酸鎂0.05％，余下為水，PH自然。于25℃下搖床培養，轉速為150rpm，培養時間7天，獲得一級液體菌種。
將一級液體菌種接種到25L自動發酵生產線的發酵罐中，通氣量為1∶0.8v/(v·min)；攪拌轉速為150r/min；接種量為5％；罐壓0.04Mpa；pH為6.0；溫度為25℃；通氣培養72小時，獲得平菇液體菌種。
權利要求
1.一種平菇菌株KZH-1及制備方法，其特征在于所述菌株為(Pleurotus ostreatus)KZH-1，該菌株的保藏號為CGMCC NO.1600。
2.根據權利要求1所述的平菇菌株KZH-1及制備方法，所述菌株是經過常規固體培養獲得的，其特征在于所述固體培養基配方和液體培養基配方如下固體培養基配方為(1)麥粒或蕎粒83％，雜木屑15％，石膏粉或碳酸鈣2％；或(2)雜木屑78％、麩皮20％、蔗糖1％、石膏1％、含水量60％、PH自然；或(3)棉籽殼35％、木屑45％、麩皮18％、蔗糖1％、石膏1％，含水量60％、PH自然；液體培養基配方為馬鈴薯20％、葡萄糖2％、蛋白胨0.2％、磷酸二氫鉀0.05％、硫酸鎂0.05％，余下為水，PH自然。
全文摘要
本發明涉及一種平菇菌株KZH－1及制備方法，屬于微生物技術領域。本發明的菌株Pleurotus osteatusKZH－1已于2006年01月25日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC NO.1600。利用該菌株制備的固體優良菌種，應用于平菇栽培生產，有著顯著的社會、經濟效益和廣闊的應用前景。
文檔編號A01G1/04GK1844350SQ20061001084
公開日2006年10月11日 申請日期2006年4月25日 優先權日2006年4月25日
發明者張陶, 桂明英, 弓力偉, 羅孝坤 申請人:中華全國供銷合作總社昆明食用菌研究所