專利名稱：一種釀酒酵母真菌及其在普洱茶生產中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種釀酒酵母真菌及其在普洱茶生產中的應用，屬生物技術領域。
背景技術：
眾所周知，酵母菌屬(Saccharomyces meyen em.Reess)。釀酒酵母在工業上有廣泛的用途。除了釀造啤酒、酒精及其他飲料外，又可發面粉制面包。菌體含有豐富的維生素、蛋白質、多種酶等，可作食用、藥用和飼料酵母，又可提取核酸、麥角甾醇、谷胱甘肽、維生素C和凝血質等作為醫藥和化工的重要原料。
在普洱茶大生產過程中，該菌系能分泌酶類作用于基質。在淀粉酶的作用下，將原料中的直鏈支鏈淀粉降解為糊精及各種低分子糖類，如麥芽糖、葡萄糖等，在蛋白酶的作用下，將不易消化的大分子蛋白質降解為蛋白胨、多肽及各種氨基酸。在果膠酶、糖化酶、纖維素酶的作用下使發酵基質大分子不溶物質轉化為可溶解于水的小分子物質，對普洱茶品質的形成帶來積極的作用。
在普洱茶研究領域，由于長期缺乏學科的研究，尤其是從微生物的角度來進行普洱茶的研究。而如何通過對云南普洱茶加工中微生物的研究，并從普洱茶加工中篩選有益優勢微生物菌株應用到生產中來提升普洱茶的品質尚未見公開的文獻報道。
發明內容
本發明的目的是從微生物的角度對進行普洱茶進行研究，為生產企業提供高品質普洱茶有益菌株來源。本發明的另一目的是通過控制有益菌種在普洱茶生產中的比例，為促進云南普洱茶品質穩定和提高發揮作用。
本發明的具有提高普洱茶品質功能的真菌，由生產菌株和輔料經初篩、復篩、天然培養基培養工序后得到，生產菌株為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址北京是海淀區中關村北一條13號，保藏日期2005年5月16日，保藏號CGMCC No.1372。
本發明的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501的形態學特征為經過54h培養的酵母菌從PDA試管中轉接到葡萄糖-酵母汁-蛋白胨瓊脂培養基上30±2℃培養3d在顯微鏡下觀察，經革蘭氏染色細胞呈藍紫色(G+)，細胞體較大，細胞長1.9-5.7μm，寬為1.90-2.85μm，細胞的形態呈橢圓形、腎形，多數呈一端稍尖，一端稍鈍圓，有的一端已出芽，有的一端剛有芽尖。細胞的生殖方式為多邊芽殖，出芽率為25％。
本發明的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501的培養特征固體培養特征菌落呈乳白色，表面光滑，致密，蠟質明膠狀，邊緣是全緣，菌落呈丘狀隆起，有面粉發酵的味道。
液體培養特征液體有酸味，培養液清澈透明，在液體的表面沒有濮、膜或島的形成，在管底部有少量沉淀物，較緊結。
本發明經公知的純化、天然培養基培養等傳統工序后得到。
本發明的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501真菌有提高普洱茶品質的作用，可應用于普洱茶的生產工藝中。
本發明的優點在于將釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501按一定的比例用于普洱茶的大生產過程中，其普洱茶中的茶多糖含量為2-4％、茶褐素含量為10-12％，普洱茶的品質有明顯的提高，并縮短了加工時間，對普洱茶品質的穩定和提高發揮重要作用。
具體實施例方式實施例1PSac0501菌種的純化從采集到的茶樣中，通過公知的平板分離(培養基用釀酒酵母分離純化培養基)得到釀酒酵母菌株。釀酒酵母純化培養基為葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母汁5g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml、不調ph值、8磅滅菌20min。
方法(1)將固體培養基熔化，冷卻至45℃，注入無菌培養皿中，每皿約15～20毫升，稍微搖轉，靜置，使成平板備用。
(2)取要分離的茶樣2g，在火焰旁加到裝有98ml無菌水的研缽中研碎，此時得到的是10-2的菌懸液。
(3)稀釋按十倍稀釋法把菌懸液稀釋至10-8，十倍法是指下一管的菌懸液要比上一管的稀十倍。
(4)接種事先準備好的平板9套，分別標號為10-6、10-7、10-8，每個稀釋度寫三套平皿，以便比較。在每個已標號的平皿中注入1ml相應的菌懸液，用涂布棒涂均勻，放入25～28℃培養24小時觀察。
(5)培養2～5天后，挑取單個菌落，并移植于斜面上培養，待形成子實器官后檢查是否只有一種菌而且這種菌是否符合釀酒酵母的特征。
(6)最后把選出的菌種接種到天然培養基上(葡萄糖30g、麩皮10g、玉米粉50g、蛋白胨10g、酵母膏1.0g、加蒸餾水至1000，不調ph)。放到28±2℃恒溫箱中早晚搖動培養5～7天后，在無菌超作臺上用無菌濾紙過濾，無菌收獲濾紙上的菌絲和釀酒酵母的孢子，放到28±2℃恒溫箱中干燥即可用于接種發酵試驗。
實施例2PSac0501菌種的生產應用將毛茶按傳統的方法進行濕熱，隨后在毛茶中接種重量比為0.1-0.8％的PSac0501菌種讓其發酵，當堆溫升高到25℃左右時，PSac0501菌種開始進行代謝，并且隨著堆溫進一步的升高，分泌出大量的酶類。這些酶對茶葉中的內含成分進行氧化、水解。其中茶多酚的降解速度加快，兒茶素、寡糖、水浸出物的變化顯著，氨基酸變化極顯著，多酚類物質的氧化、縮合、轉化、兒茶素部分轉化為TF，TF又可進一步轉化為TR、TB，而這些變化對普洱茶的品質形成都發揮了重要的作用。經過接種生產的普洱茶具有香氣獨特，滋味醇和回甘，湯色紅濃明亮，葉底棕褐油潤的品質特征。
經接種PSac0501菌種后生產的普洱茶，其品質有明顯的提高，普洱茶中的茶多糖含量為2-4％、茶褐素含量為10-12％。
權利要求
1.一種釀酒酵母真菌，由生產菌株純化培養及天然培養基培養后得到，其特征在于生產菌株為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501，保藏日期2005年5月16日，保藏號CGMCC No.1372。
2.權利1所說的真菌，其特征在于該真菌有提高普洱茶品質的作用，可應用于普洱茶的生產工藝中。
全文摘要
本發明涉及一種釀酒酵母真菌及其在普洱茶生產中的應用，屬生物技術領域。本發明的釀酒酵母真菌，由釀酒酵母純化培養和天然培養基培養工序后得到，其生產菌株為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)PSac0501，保藏日期2005年5月16日，保藏號CGMCC No.1372。本發明的真菌有提高普洱茶品質的作用，可應用于普洱茶的生產工藝中。本發明的優點在于將PSac0501菌株按一定的比例用于普洱茶的大生產過程中，其普洱茶中的茶多糖含量為2－4％、茶褐素含量為10－12％，普洱茶的品質有明顯的提高，并縮短了加工時間，對普洱茶品質的穩定和提高發揮重要作用。
文檔編號A23F3/06GK1752205SQ200510010940
公開日2006年3月29日 申請日期2005年7月28日 優先權日2005年7月28日
發明者周紅杰, 龔加順, 秘鳴, 趙龍飛 申請人:秘鳴