一種與人巨細胞病毒pp65抗原具有特異性的適配子的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子，其基因序列為：SEQ?ID?No:1，或SEQ?ID?No:2，或SEQ?ID?No:3，或SEQ?ID?No:4，或SEQ?ID?No:5，或SEQ?ID?No:6。本發明以PP65蛋白為靶分子，利用指數富集配基系統進化法技術從隨機ssDNA文庫篩選PP65特異結合的寡核苷酸適配子，并對所篩選出的適配子結構進行了分析。本發明與傳統檢測技術中的抗體相比，寡核苷酸適配子還具與靶分子結合力更強、穩定性好、精確性高、重復性好、可反復使用、可長期保存、可進行精確的位點修飾、篩選期更短等優勢。
【專利說明】一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物醫學領域，具體的說，涉及一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子。
【背景技術】
[0002]人巨細胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)屬于皰疫病毒科乙組皰疫亞科，是一種雙螺旋DNA病毒。HCMV呈世界性分布，在人群中廣泛傳播，病毒長期潛伏于宿主細胞，呈隱性感染。當妊娠，易造成胎兒宮內感染，導致流產、早產、死胎或胎兒先天畸形；當骨髓移植，肝、腎、心臟等器官移植患者免疫功能受損時，潛伏病毒被激活、增值而發生嚴重感染，將導致患者器官移植失敗甚至死亡。近年來，有研究表明巨細胞病毒感染與一些炎癥性疾病和增殖性疾病有著密切的關系，包括某些心血管疾病和癌癥。現今，巨細胞病毒感染已對人類健康造成極大的威脅，故對HCMV感染的早期診斷顯得尤為重要。在HCMV實驗檢測技術中，病毒分離是檢測的金標準，但耗時長，結果受標本保存時間影響大。抗體檢測需在患者感染一定時間后才可以檢出，受患者自身免疫狀態影響較大，且不能區分潛伏感染和活動性感染。抗原血癥檢測技術是一項快速、敏感的診斷技術，但是傳統檢測方法多以白細胞為病毒抗原檢測載體，限制了其臨床應用。而核酸診斷其敏感性與特異性均佳，但檢測費用高且核酸提取方法還有待改進。
[0003]SELEX技術，又稱指數式富集的配體系統進化(Systematic evolut1n of ligandsbyexponential enrichment, SELEX)技術是一種新的組合化學技術,應用大容量的隨機寡核苷酸，并結合PCR體外擴增技術，以指數級富集與靶分子特異結合的寡核苷酸，經幾輪或數輪的篩選過程，獲得高親和力、高特異性的核酸配基。在實驗診斷和臨床治療的分子識別領域，它提供了一個比抗體更快速、靈敏的技術手段。目前，該技術已成功應用于許多靶物質的篩選，包括蛋白、小分子、金屬離子，甚至病毒、細菌、細胞等一些復雜靶標，部分核酸適配子已進入臨床試驗階段。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子。
[0005]本發明實現目的的技術方案是:
[0006] 一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子，其特征在于:它具有SEQ IDN0.1~SEQ ID N0.6的序列之一。
[0007]
【權利要求】
1.一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子，其特征在于:它為SEQ IDN0.1~SEQ ID N0.6的序列之一。
2.根據權利要求1所述一種與人巨細胞病毒PP65抗原具有特異性的適配子，其特征在于SEQ ID N0.1~SEQ ID N0.6的二級構象依次分別為:
【文檔編號】C12N15/115GK104046630SQ201310549433
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2013年11月7日 優先權日:2013年11月7日
【發明者】張波, 夏宇, 王永虎 申請人:中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院