病原體和物質陷阱的制作方法

病原體和物質陷阱的制作方法
【專利摘要】本發明提供了一種物質組合物作為藥物組合物及其使用方法。所述物質組合物包括：由一個支架包圍的至少一個活性部分，所述支架用于對象的選擇性流入，所述對象能夠與所述至少一個活性部分相互作用。
【專利說明】病原體和物質陷阱
[0001] 技太領域和背景持太
[0002]本發明涉及一種用于阻斷、結合或處理底物和病原體的復合物。
[0003] 病毒性感染的有效治療仍是現今生物醫藥的一大挑戰。當今的豬流感和HIV大流 行表明現在的科學技術仍不能有效克制和治療病毒爆發。
[0004]盡管病毒性疾病的數目巨大，但僅有少數特定可用的抗病毒療法。迄今為止，疫苗 被當做治療病毒最有效的形式。但是，疫苗可能沒有效用或產生可能致命的副作用的危險。 除了疫苗，也有少量藥物被設計通過抑制病毒或宿主酶來減輕病毒感染。這些小分子抑制 劑可能產生毒性副作用的風險，或由于病毒種群的突變導致耐藥菌株的形成。
[0005] 所以，抗病毒療法通常包括感染之前免疫系統的預防活化，或經小分子抑制劑的 病毒感染細胞的靶向。對于病毒在宿主細胞感染之前失活的關注太少。
[0006] 一種上述方法，包括：通過使用攜帶有膜結合病毒受體的脂質體、細胞或原型細胞 的，在宿主細胞模擬中病毒的失活。所述方法依靠病毒-宿主相互作用，其在進化上是保守 的，甚至面臨快速的病毒適應性。
[0007] 含有受體的脂質體(蛋白-脂質體）是潛在的病毒靶標，還是進化的陷阱。因為 病毒不能夠在它們里面復制并失活。脂質體陷阱的概念最初在DE3711724所述，其中，脂 質體陷阱作為HIV的抑制劑。類似的描述見于公開文件ES2088752和W01996/022763中。 US571S915描述了添加催化酶到脂質體膜以誘導損害結合的病毒。使用蛋白脂質體作為 藥物傳輸系統的其它類似的抗病毒體系也已經被Bronshtein等描述（2011，Journal of Controlled Release, Vol· 51，Issue2，p_ 139-148)，也被 US5, 773,027、US2008/0138351、 US6, 544, 958、Tuthill 等（2006doi:10. 1128/JVI. 80. 1. 172-180.2006)、Zhukovsky 等 (2010PLoS0ne，5(10) el3249)描述。
[0008] 含有受體的非宿主細胞(典型的RBCs)作為病毒陷阱的使用被EP0298280所描述。 在這種方法中，缺少核的RBCs作為一種陷阱,在所述陷阱內，感染病毒顆粒不能復制。類似 的方法也已經在出版物 US5677176、US7462485 和《0penWetWare20. 380HIV Project》中描 述。
[0009] 定義為原型細胞的仿造細胞的顆粒也能夠用作呈現病毒專一性的受體（Porotto et al. (2011)PLoS0ne, 6(3) :el6874)〇
[0010] 使用抗病毒樹狀分子（Reuter et al. (1999)Bioconjugate Chem. 10(2) :271_8) 和蛋白質納米管（Komatsu et al. (2011)J Amer Chem Soc. 133(10) :3246-8)的其它外部 多孔的病毒失活方法也已經進行了研究。
[0011] 盡管上述方法能夠有效的治療特定的病毒，都不能夠提供一種對于廣譜的病毒疾 病的方案。此外，上述方法由于不希望的體內細胞/分子的相互作用會受到限定。所述相 互作用導致不利的毒性效應、差的藥物代謝和抗病毒藥物的不穩定性、和抗病毒藥物在體 內被免疫系統和其它器官快速的清除。
[0012]因此，這里仍然需要一種方法，所述方法能夠用于治療廣泛的病原體感染而不受 到現有技術方法的上述限制。


【發明內容】

[0013] 根據本發明的一方面，本發明提供了一種物質組合物，所述物質組合物包含由支 架包圍的至少一種活性部分，所述支架用于因子的選擇性流入，所述因子能夠與所述至少 一種活性部分相互作用。 t〇〇i 4] 根據本發明如下所述優選實施例中的進一步特征，所述支架包括核酸結構、聚合 物結構、和/或硅結構。
[0015] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述核酸結構為DNA折紙結 構。
[0016] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述結構為微機電系統(Micro Electro Mechanical System，MEMS)結構。
[0017] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述因子為物質、微生物或細 胞。
[0018] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述微生物選自含有病毒、細 菌、真菌、寄生蟲、古菌、海藻和原生生物的群。
[0019] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述物質選自含有肽、多肽、朊 病毒、油脂、油脂復合物、核酸、糖、過敏原、毒素、激素、抗體、藥物、小分子、污染物和礦物質 的群。
[0020] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述支架用于允許直徑為 0· 01-50 μ m的因子選擇性的流入。
[0021]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述支架用于允許直徑為 0· 01-0· 08 μ m的因子選擇性的流入。
[0022] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述活性部分能夠結合所述因 子藥物。
[0023] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述活性部分選自包含抗體、 適體、受體、螯合劑、配體、脂質體、納米管、樹狀分子、原細胞、細胞、肽、蛋白質、酶、化學品、 清潔劑、毒素、藥物和藥物前體的群。
[0024] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述活性部分能夠裂解所述因 子或使所述因子變形。
[0025] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述活性部分選自包含酶、核 糖酶、化學品、酸、堿和清潔劑的群。
[0026] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述活性部分能夠通過對微生 物非內源性的部分來結合所述微生物。
[0027] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個活性部分連接基團所 述支架。
[0028] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個活性部分通過連接體 連接所述支架。
[0029] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個免疫調整部分連接到 所述支架上。
[0030]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述支架為非脂質支架。
[0031]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述支架包括PEG或PEG衍生 物、或透明質酸。
[0032]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述支架形成一個具有內部腔 體的顆粒。
[0033]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個活性部分置于所述腔 體內。
[0034]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個活性部分在所述空腔 內連接所述支架。
[0035]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個活性部分在所述空腔 內連接載體，所述空腔依靠空腔尺寸結合到所述支架。
[0036]根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，至少一個活性部分在與所述因 子的相互作用后能夠釋放分子。
[0037] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述分子選自包含標志物、毒 素、激素、藥物、核酸、蛋白質和佐劑的群。
[0038] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述支架進一步包含靶向部 分。
[0039] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述靶向部分選自包含受體、 抗體、適配子、組織特異性部分、微生物特異性部分、配體和磁體的群。
[0040] 根據本發明的另一方面，本發明提供了藥物組合物，包含所述物質組合物和藥學 上可接受的載體。
[0041] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述藥學上可接受的載體被挑 選出來以適合口服、粘膜、外用或全身給藥。
[0042] 根據本發明的另一方面，本發明提供了一種從流體中分離所述因子的方法，包含： 將所述流體暴露在物質組合物下,所述物質組合物包括由支架包圍的至少一種活性部分， 所述支架用于因子的選擇性流入，所述因子能夠與所述至少一種活性部分相互作用，從而 從所述流體中分離所述因子。
[0043] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述流體為生物流體。
[0044] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述將生物流體暴露在物質組 合物下是通過給受試者服用所述物質組合物來受到影響。
[0045] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述流體為水流體。
[0046] 根據本發明所述優選實施例中的更進一步的特征，所述物質組合物為過濾器的一 部分，所述過濾器位于一個容器的內部或表面上。
[0047] 根據本發明的進一方面，本發明提供了一種分離的多核苷酸，所述多核苷酸包含 SEQ ID NO :209-476中提出的序列。
[0048] 根據本發明的進一方面，本發明提供了一種包含本發明所述分離的多核苷酸的微 粒。
[0049] 根據本發明的進一方面，本發明提供了一種分離的多肽，所述多肽包含SEQ ID NO :477-485中提出的序列。
[0050] 根據本發明的進一方面，本發明提供了一種微粒，所述微粒包括本發明所述分離 的多肽。
[0051] 本發明通過提供一種用于預防或治療病原體感染和從生物和非生物的流體中純 化物質的物質組合物及其使用方法，成功地克服了現有己知組合物的缺點。
[0052] 除非另有限定，正如本領域普通技術人員通常所理解的，所有在此使用的技術和 科學上的術語具有相同的意思，盡管類似或等同的在此描述的方法和物質能夠用于實踐或 本發明的測試,合適的方法和物質如下所述。在沖突的情況下，包括定義在內的專利說明書 將得到控制。另外，所述物質、方法和實施例僅用來說明本發明而不用于限定本發明。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0053] 本發明在此只通過實施例參考相應的附圖來進行描述。現在具體詳細地參考附 圖，所需要強調的是，所示的細節以實施例為準并只用于對本發明優選實施例說明性討論 的目的，并認為所示的細節是最有效和容易理解本發明原理和概念方面的描述的原因。在 這方面，任何沒有嘗試顯示本發明結構細節更詳細地比本發明的基本理解是必要的，對于 本領域技術人員而言，所述附圖的描述使本發明的多種形式可能應用于實踐中，這是很明 顯的。
[0054] 在附圖中：
[0055] 圖la-b簡要描述了一種用于捕獲實體物的組合物的實施例，參照本發明的指導 來構造。
[0056]圖lc簡要描述了一種用于捕獲實體物的組合物的另一實施例，參照本發明的指 導來構造。
[0057]圖2簡要描述了一種用于捕獲實體物的組合物的另一實施例，參照本發明的指導 來構造。
[0058] 圖3a-c簡要描述了使用圖lc所示組合物的病毒捕獲，紅細胞如右側所述的大小 來表示。
[0059] 圖4a顯示的是無孔聚苯乙烯微球的光學顯微鏡圖。
[0060] 圖4b-c顯示的是無孔聚苯乙烯微球的掃描電子顯微鏡（SEM)圖。
[0061] 圖5a-b顯示的是無孔和多孔聚苯乙烯微球的掃描電子顯微鏡（SEM)圖。
[0062] 圖5c-f顯示的是多孔聚苯乙烯微球的掃描電子顯微鏡（SEM)圖。
[0063] 圖6a-b顯示的是多孔聚苯乙烯微球的流式細胞儀讀數，FL2-A讀數（圖6a)反映 在黃橙色光譜處的發射，而FL4-A讀數（圖6b)反映在遠紅外光譜處的發射。
[0064]圖7a-b描述了未感染的SF9細胞結構，放大倍數：xl〇〇-圖7a ;x400圖幾。
[0065] 圖8a-b描述了感染桿狀病毒的SF9細胞結構，放大倍數：xl〇〇-圖8a ;x40〇圖8b。
[0066] 圖9a-b描述了經桿狀病毒和抗病毒的聚苯乙烯微球處理的SF9細胞結構，放大倍 數：χ100-圖 8a ;x400 圖 8b。
[0067] 圖9c顯示的是通過本發明所述病毒陷阱，感染SF9細胞的桿狀病毒體外脫離圖， 通過GFP相對熒光來測量。
[0068]圖9d顯示的是通過本發明所述病毒陷阱，感染SF9細胞的桿狀病毒體外脫罔圖， 通過GFP相對熒光來測量。
[0069] 圖10a描述了用本發明所述病毒陷阱對死人頭蟑螂的注射。
[0070] 圖10b顯示的是通過本發明所述病毒陷阱，感染死人頭蟑螂蟑螂的桿狀病毒體內 脫離圖，通過GFP相對熒光來測量。
[0071] 圖11a-b顯示的是說明桿狀病毒病毒顆粒粘附到Triton包衣的多孔聚苯乙烯微 球附著的掃描電子顯微鏡（SEM)圖。
[0072] 圖12a顯示的是根據本發明所述技術得到的DNA巴克球的透射電子顯微鏡（TEM) 圖，所述球體形狀具有估算的巴克球尺寸（500-800nm)。.
[0073] 圖12b簡要描述了通過本發明所述DNA連接器自組裝形成的巴克球體形狀。
[0074] 圖13描述了 DNA折紙形成的DNA立方體的角，所示DNA立方體用于本發明所述病 毒陷阱的支架。
[0075] 圖14描述了電腦模擬生成肽與表達宿主特異性蛋白人類CD81病毒顆粒的預測相 互作用。

【具體實施方式】
[0076] 本發明的陷阱能夠用于治療或預防病原體病原體感染，同時消毒或清潔生物性流 體、水的供應等等。尤其，本發明能夠用于誘捕和滅活病毒顆粒從而預防病毒在宿主或樣品 內的復制和感染。
[0077] 結合附圖和相應的描述，本發明的原理和操作可以更好的被理解。
[0078] 在具體描述本發明的至少一個實施例之前，應當理解的是，本發明在具體應用中 并不限定于下面描述的具體實施例。本發明能夠為實施例或得以實現或在不同的方式下進 行。而且，在此所述的措辭和術語是描述的目的而不應視為對本發明的限定。
[0079] 引起慢性疾病的病原體感染，尤其是病毒感染，在病毒免疫的問題上呈現出多個 前所未有的挑戰。
[0080] 盡管目前有一些抗病毒藥物在使用，導致慢性疾病的病毒仍缺少有效的預防和治 療藥物。很多抗病毒藥物正在發展以盡力給感染的個體提供有效的治療。所述藥物包括病 毒酶抑制劑、宿主細胞病毒結合抑制劑、抗轉錄和RNA干擾藥物、免疫調節藥物和病毒成熟 抑制劑。所述抗病毒藥物由于到靶細胞和組織的無效釋放和較短的治療窗口而受到限制， 所述較短的治療窗原因在于循環、毒性和免疫原性的快速清除和病毒對藥物的適應和抗 性。
[0081] 用于從流體(如生物流體)中凈化因子的方法為本領域技術人員所熟知的。所述方 法能夠通過使用體積排阻或親和結合技術用于選擇性凈化或捕捉生物流體內的病毒。
[0082] 所述能夠親和結合病毒的因子包括蛋白-脂質體或原型細胞，所述蛋白-脂質體 或原型細胞表現為結合微生物的受體、結合微生物和雜質的樹狀分子、結合微生物和雜質 的抗體和抗體配位物、和結合微生物和雜質的蛋白質納米管。
[0083] 盡管上述方法能夠潛在地用于從受試者血液中凈化不需要的因子，如病毒，所述 方法有一些弊端，包括通過吞噬細胞在血流中快速清除、由異物導致的潛在的毒性/免疫 原性/病理性副作用、滅活/阻斷被捕捉對象的失敗、可捕獲對象的較窄范圍(如依靠內吞 機制感染宿主細胞的病毒在現有技術中并不能失去活性)、和有限數量的能夠通過簡單的 陷阱分子/復合物包圍的因子。
[0084] 在轉變為本發明以實踐的過程中，本發明人意識到因子從諸如血液的流體中穩步 和有效的凈化，例如，使用體內方法，需要兩步協作的方法，即首先從所述流體中分離/阻 斷所述因子然后捕獲和可選地處理所述因子。
[0085]為了實現上述功能，本發明人設計了一種凈化組合物(在此也定義為復合物)，所 述凈化組合物尤其被構建用于首先從所述流體中分離/阻斷所述因子然后捕獲所述因子 和去除所述因子的活性(如，通過結合或處理所述因子)。
[0086] 所述兩步方法對于病原體感染的體內預防或治療特別有效。在上述情況中，由于 所述復合物設計用于首先阻斷(例如，通過體積排阻流入)，然后在所述復合物的內部，并進 而在形成的免疫容積中處理所述病原體，能夠結合/滅活所述病原體(位于所述內部容積） 的所述部分沒有出現在宿主細胞上，從而不會引起免疫或毒性反應。
[0087] 本發明克服了當前抗病毒治療不能充分解決病毒適應抵抗的限制。病毒是高適應 性和多形態的，并能夠經歷大量引起病毒的蛋白質域、尤其是病毒的酶活性部位的改變的 基因變化，導致靶向所述蛋白質的抗病毒藥物的抵抗。此外，病毒也快速改變它們外部病毒 顆粒的形狀(例如，通過同化宿主細胞蛋白質）以逃避免疫系統和特定的抗體。
[0088] 例如，目前通過病毒陷阱治療的病毒不太可能產生適應性抗性，所述病毒陷阱包 括宿主細胞受體部分(如，含有人類受體⑶4、CCR5和CXCR4的舟形脂質體，用于HIV病毒的 失活)，然而，對所述受體為非反應性的病毒選擇性地受到突變的壓力，所述突變會抑制所 述病毒與所述宿主細胞反應和感染的能力。用陷阱治療的病毒不受到病毒的快速和適應性 的多形態的影響，所述陷阱包括結合非內源性蛋白質到病毒的部分(如，宿主細胞蛋白質)。 特異地結合所述宿主細胞部分的活性部分(如四次跨膜蛋白、膜聯蛋白），能夠結合更寬范 圍的病毒。
[0089] 通過在非免疫活性支架內阻斷所述病毒結合部分，本發明限定了與宿主細胞間不 想要的相互作用，以及從宿主細胞中分離受限的病毒顆粒進而致使所述宿主細胞不受傳 染。
[0090] 因此，根據本發明的一方面，本發明提供了一種物質組合物，包括至少一個被支架 包圍的活性部分，所述支架用于因子的選擇性流入，所述因子與所述一個或多個活性部分 相互作用。
[0091] 所述物質組合物的支架由任何能夠形成顆粒狀結構(如，3-D模型)的物質構成，所 述顆粒狀結構為一個具有內部體積和流暢通過其中的表面多孔。正如在下面的具體描述， 所述顆粒由使用已知方法如聚合物化學、DNA納米技術(如，DNA折紙）和微機電系統(MEMS) 合成的或生物的聚合物、油脂、分子篩、無機材料(例如，硅)、金屬構成。實施例部分接著描 述了幾種類型的顆粒和它們的構成。
[0092] 所述活性部分可以為任何能夠與更廣范圍物質或病原體(例如，在蛋白質或細胞 膜的情況下的清潔劑)、或具體病原體或物質(例如，抗體或抗體片段）相互作用和失活的部 分。
[0093] 所述支架包括任何數目的任何尺寸的孔，基于阻斷的被靶向的所述物質或病原 體。優選地，所述支架含有至少3個孔。所述孔可以設計為被動地或主動地阻斷所述物質 或病原體。例如，一個具有孔直徑為17nm的支架將使如豬圓環病毒的病毒流入，同時把活 的真核細胞和細菌阻擋在外面。一個具有4〇〇nm開口的支架能夠使大多數病毒流入，同時 把真核細胞阻擋在外面。一個具有800nm開口的支架能夠使所有病毒和大多數支原體細菌 細胞流入，而把人類細胞阻擋在外面。一個具有4000nm開口的支架能夠使大多數細菌流 入，并把人類細胞阻擋在所述復合物的外面。同時，一個具有孔直徑為l〇nm的支架能夠使 如PrP蛋白質的朊病毒流入，并把大多數蛋白質和所有病毒、活的真核細胞和細菌阻擋在 外部。
[0094] 從而，在一個具體實施例中，具有約10-800nm直徑的孔將適合用于捕獲病毒，具 有在約0. 2-5 μ m之間直徑的孔將適合用于捕獲細菌，具有在約1-20 μ m之間直徑的孔將適 合用于捕獲真菌。
[0095] 從而，本發明所述的復合物支架可能含有最小直徑為1、1.5、2、2·5、3、3·5、4、 4. 5、5、5. 5、6、6. 5、7、7. 5、8、8. 5、9、9· 5、10、10. 5、或 llnm 的孔；所述孔含有最大直徑為 5、 6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19 或 20μηι 的孔。通常，所述支架的孔具有 50nm、100nm、200nm、300nm、400nm、500nm、600nm、700nm、800nm、900nm、1U m、1. 5 U m、2 μ m、 2· 5 μ m、3 μ m、3· 5 μ m、4 μ m、4. 5 μ m、5 μ m、10 μ m、20 μ m，30 μ m、40 或 50 U m 的直徑。
[0096] 從而，所述支架的功能在于通過尺寸選擇來選擇性捕獲實體物，從而可作為一個 體積排阻的過濾器。只有足夠小以能通過所述支架孔的所述實體物被捕獲和吸收。
[0097] 一旦被支架的內部空腔阻斷，所述物質或病原體出現在活性部分以進行處理。從 而，所述支架有兩個目的，即所述物質或病原體的阻斷和分離，進而屏蔽所述物質或病原體 到身體之外，相似地，屏蔽所述活性部位到所述宿主細胞之外，以及進而防止毒性作用，尤 其是屏蔽在免疫系統的細胞外，進而防止對所述活性部分的免疫反應。
[0098] 免疫分離所述活性部分增加了半衰期，以及因此增加了本發明所述復合物在體內 的療效，也可以用于其它免疫原性的和可能有毒的體內活性部分。
[0099] 所述活性部分(例如，受體、酶）為免疫原性的分子和類似物，在顆粒(脂質體）或載 體的表面上出現的所述分子，通常如一些現有技術中的病毒陷阱，能夠增加同陷阱免疫反 應的可能性以及其中部分或全部的滅活。
[0100] 本發明所述的兩步分離和捕獲組合物通過用中空的顆粒隔斷活性部分打破了現 有技術的限制。上述方法保護了活性部分不被受試者的免疫系統排斥并延長了在體內所述 物質組合物的半衰期。通過從捕獲和可選的滅活步驟中分開免疫分離的步驟，本發明的復 合物潛在地保護了免疫反應性分子免受受試者免疫系統的排斥和提高了本發明所述組合 物的循環時間。
[0101] 而且，現有技術的病毒陷阱，例如抗體和樹狀分子、或含有受體的蛋白脂質體，仍 然能夠感染/免疫反應性宿主細胞，因為受束縛的病毒仍然存在于宿主細胞中。本發明的 分離方法是雙向的，不但能使病毒或結合病毒的部分遠離免疫系統而且能夠使未受感染的 宿主細胞遠離被病毒陷阱包圍的病毒。
[0102] 本發明所述復合物能夠用于體內或體外，以對任何流體樣品的消毒或預防感染， 所述流體包括生物流體，如血液、尿、精液、唾液、黏液、淋巴液等等，非生物流體，如飲用水、 飲料、污水等等。
[0103] 用于本發明的一個優選的應用為預防或治療病原體的感染，所述病原體如像血液 等生物流體中的病毒。在一些情況下，本發明所述組合物的功能是作為一種治療藥劑。
[0104] 因此，本發明提供了一種用于從諸如血液等流體對象中消除病原體或物質的新方 法，而不會暴露所述介質到潛在有害或免疫的化學物質中。
[0105] 正如上述描述的，本發明所述復合物在形狀上是三維的，并包括一個內部腔體，在 所述腔體中包含一個或多個活性部分。 #
[0106] 提供上述"結構"的一個具體的復合物構造包括含有800nm孔洞的4μηι的聚苯乙 烯中空微球(所述支架）和外部PEG包衣(免疫隔離)。所述微球封裝覆蓋有triton清潔劑 的Ιμιη聚苯乙烯微球(活性部分)。另一種構造可以包括一種在外面涂裝mPEG(免疫隔離)、 內部涂裝表面活性蛋白-D (活性部分）的1 μ m DNA巴克球(支架)。
[0107] 本發明所述復合物支架能夠由核酸納米結構、聚合物、或硅片來制備。
[0108] 所述核酸(DNA/RNA)納米結構是基本成分為核酸、核苷酸、或核苷的結構。核酸納 米技術利用了如下事實：由于沃森-克里克堿基對的專一性，只有彼此互補的鏈的部分能 夠結合彼此以形成雙螺旋。核酸納米結構的構造已經在一些出版物中得到描述，所述出版 物包括 W02008/039254、US2010/0216978、W02010/0148085、US5468851、US7842793、Dietz 等人（2009) [Dietz 等人（2009)，Science, Vol· 325, ρρ· 725-730]、Douglas 等人（2009) [Douglas等人（2009)Nature，Vol. 459, ρρ· 414]和其他的。實施例部分的實施例6和9_11 隨后描述了用于適合于生成本發明DNA支架的序列和方法。
[0109] 實質上，天然的或人造的DNA或RNA序列能夠控制以生成三維（3D)的結構。通常， 以DNA為基礎的納米結構利用DNA單鏈，所述DNA單鏈通過互補的、較短的DNA鏈的結合來 誘導形成3D構造。與之相反的，基于同樣分子內的RNA-RNA相互作用，RNA通過形成三級 RNA基序以折疊成3D結構。基于折疊的單鏈DNA的納米結構也是可行的。RNA雙螺旋也可 以用于形成RNA 3D結構。
[0110] 因此，在本發明所述支架的一個優選實施例中，所述核酸納米結構為DNA折紙。 DNA折紙是一種在納米尺度上人工折疊生成DNA的方法，生成一個任意三維的可能作為誘 入或捕獲實體的支架的形狀。用于生成折紙類型的DNA納米結構的方法已經得到了描述， 例如，在US7842793中，DNA折紙包含(例如）在多個較小"短"鏈的幫助下的病毒DNA較長 單鏈的折疊(例如)。所述較短鏈在不同位置結合到較長鏈上，從而形成3D結構。
[0111] 本發明所述核酸納米結構可能由此為DNA折紙連接片和/或其可能有可誘 導的形狀。例如，所述可誘導的核fe納米結構已被Andersen [Andersen等人（2009 ) Nature, vol. 459, ρρ· 73-77]、Dietz [Dietz 等人（2009) Science, Vol. 325, ρρ· 725-730]、 Voigt[Voigt 等人（2010)Nature Nanotechnology，vol_5，pp.200-203]、Han[Han 等人 (2011) Science, Vol. ：332, pp. 342_346]等報道。用于設計核酸納米結構的軟件包可以在 www. cdna. dk/origami 獲得。
[0112] 正如在此所述的，在本發明所述復合物的核酸納米結構中使用的核酸指的是任何 長度的聚合形式的核酸，無論是核苷酸、脫氧核苷酸還是核酸肽（PNAs)，都包括嘌呤和喃P定 堿基、或其它天然的、化學或生物學修飾的、非天然的、或衍生核酸堿基。多核酸的主鏈包括 典型地出現在RNA或DNA上的糖和磷酸基團，或修飾或取代的糖或磷酸基團。多核酸可能 包括修飾的核酸，例如，甲基核酸和核酸類似物。因此，術語"核苷"、"核酸"、"脫氧核苷，，和 "脫氧核酸"通常包括類似物，例如，在此所述的類似物。
[0113]典型地，核酸包括磷酸二酯鍵，但是，核酸可能包括一個修飾的主鏈，例如，所述主 鏈包含磷酰胺、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯。
[0114] 0-甲基磷酸酰胺鍵和核酸肽主鏈連接。其它核酸衍生物包括含有陽離子主鏈、非 離子主鏈和非核糖主鏈的核酸。包含一個或多個碳環糖的核酸也在所述核酸的定義內。正 如被本領域技術人員熟知的，所有上述核酸類似物可能用作生成納米結構的多核酸的輔助 鏈或一部分。此外，天然的核酸或類似物的混合物也可以被使用。ΡΝΑ (肽核酸）包括增強 穩定性的肽核酸衍生物。
[0115]因此，不同類型和構造的核酸也被用作生成納米結構支架，所述支架包括右旋 DNA、右旋RNA、PNA、鎖核酸（LNA)、蘇阿糖核酸（ΤΝΑ)、乙二醇核酸（GNA)、橋基核酸（ΒΝΑ)、二 胺嗎啉代寡核苷酸（ΡΜ0)以及核酸衍生物，如非沃森-克里克核酸 dX、dK、ddX、ddK、dP、dZ、 ddP、ddZ。
[0116] 在一些實施例中，本發明包括多核酸的納米結構包括一種或多種不同的核酸結構 (如，至少20種、至少 5〇種、至少100種、或至少1000種、或更多不同的核酸分子)。所述核酸 可能為單鏈或雙鏈、或包含雙鏈或單鏈兩者序列部分的核酸。所述核酸也可能為DNA、兩個 基因組和cDNA、RNA或混合，其中，所述核酸包括任何脫氧核糖核酸和核糖核酸任意組合、 和包括尿嘧啶、腺嘌呤、胸腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤、肌苷、黃嘌呤、次黃嘌呤、異胞嘧啶、異鳥 嘌呤等等堿基的任意組合。所述核酸包括核苷酸、核苷和核苷酸衍生物、和修飾的核苷，例 如胺基修飾的核苷。
[0117] 本發明的DNA納米結構也使用了多種較短的單鏈核酸(輔助鏈）（如，DNA)以直接 用于多核酸長單鏈(在DNA納米結構中，被叫做支架鏈)的折疊形成通常直徑在i〇〇-5〇〇〇nm 的所需模型。因此，本發明所述復合物的核酸支架可能大約為100-5000nm，但是取決于環 境，10、15或20 μ m的更大的支架也可以被使用。
[0118] 在另一實施例中，本發明所述復合物支架可能為聚合結構，其中，基本成 分為聚合物，如聚醋酸乙烯酯（PVA)、聚乳酸（PLA)、乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA)、 甲基丙烯酸二甲胺乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、PAN[Xiang et al，Hazard Mater. 2010Janl5;173(1-3):243-8]、或 PM1A[Yuan et al，Langmuir. 2009Mar3;25(5):2 729-35> Zhang et al, Colloid Interface Sci. 2009Augl; 336 (1) : 235~43> Lin et al. L angmuir· 2008Dec2; 24(23) :13736-41]、聚原酸酯（卩(^)[此11紅帥&1.(2000)11.1^以1·· Sci Mater. Med· 1 1(6) :345-55]、聚磷腈[Allcock (1994) Biomaterials, 15 (8): 563-9]、聚 酸酐[Shieh et al. (1994) J.Biomed. Mater REs· 28 (12): 1465-75]、聚磷酸脂[Richards et al· (1991) J_ Biomed· Mater· Res. 25(9) : 1151-1167]、聚乙交酯（PGA)、聚三甲基碳酸酯 (PTMC)、聚（L-乳酸）和聚（羥基乙酸）（PLLG/PGA)、PGA、PLLA-PGS、1，3-丙二醇（PD0)、 聚乙烯、聚酮（PEEK)、海藻酸、含有聚L-賴氨酸的海藻酸(海藻酸/PLL)、海藻酸鈉、瓊脂 糖、透明酸、水凝膠，例如甲基丙烯酸羥乙酯（HEMA)、甲基丙烯酸羥乙酯-甲基丙烯酸甲酯 (HEMA-MMA)、甲基丙烯酸、甲基苯烯酸酯、殼聚糖、膠原、纖維素、和其他。所述聚合物的作用 是作為半透膜，并被稱為生物安全膜。
[0119] 在一個進一步的實施例中，本發明所述復合物的支架為硅微觀結構，例如形成 生物膠囊的桂片。用于制備上述娃片的方法己經被Desai等報道[Desai et al. (1998) Biotechnology and Bioengineering, vol. 57, no. 1, pp. 118-120]"
[0120] 在另一個進一步的實施例中，本發明所述復合物的支架進一步包括用于將所述支 架靶向到體內特定器官的靶向部分。例如，所述靶向部分為器官-特異性配體或受體、或其 他如可以結合到靶向器官細胞外基質的器官-或細胞-特異性分子，
[0121]在另一個進一步的實施例中，本發明所述復合物的支架進一步包括；在復合物同 樣被吞食或吞噬的情況下，能夠同樣殺死如吞噬細胞等細胞的分子(如毒素)。
[0122]因此，本發明所述支架也可能有免疫調節劑、或誘導細胞死亡的毒性或細胞毒性 部分，如阿侖膦酸鈉、氯膦酸二鈉、AppCCUp (氯膦酸二鈉代謝物)、DMDP (甲基-5-脫氮蝶 啶)、自殺基因的序列或產品等等。
[0123]本發明所述支架可以從非免疫性材料來制備。如PLGA[Lin et al. Biomaterials. 2012Jul;33 (20):5156-65]、PVA[Efthimiadou et al，Int J Pharm_2012May30;428(1-2):1 34-42]、冗聚糖[Mu et al，Mol Pharm_2012Janl; 9 (1):91-101 ;Lu et al，Biointerfaces. 2011Aprl; 83 (2) :254-9]、纖維素 [Metaxa et al，J_ Colloid Interface Sci.2012Mayl8]、 月父原蛋白[Helary et al，Acta Bio mater. 2012Junl5_Epub ahead of print]。另外，所述 支架能夠被非免疫調節劑材料覆蓋，例如，所述支架能夠被聚乙二醇（PEG)或它的衍生物所 涂裝（參考 Macromol Biosci. 2004Mayl7;4(5) :512-9)。
[0124] 所述支架能夠含有靶向部分，以靶向本發明所述復合物到特定性的器官。所述部 分可以用于靶向本發明所述復合物到受感染的器官。
[0125] 所述靶向部分為器官-特異性部分，病毒-特異性受體、抗體、配體、碳水化合物、 蛋白質、肽、脂質、或磁性部分。
[0126] 根據一個優選的實施例，所述支架在它的外部含有肝臟-特異性配體，直接連接 本發明所述復合物到肝臟。類似地，其它器官可能為靶標,如胰腺、心臟、脾臟、腎臟、淋巴結 等等。
[0127] 所述活性部分是任何能夠特異性或非特異性結合/處理所述物質或病原體的分 子或結構。
[0128] 所述活性部分是脂質體、納米管、適體、樹狀分子、蛋白質、肽、受體、酶、配體、抗 體、螯合劑、去垢劑、毒素、藥物或藥物前體。
[0129] 脂質體為磷脂雙分子層構成的囊泡，并在它的表面上靶標-特異性部分或結合實 體的部分起作用，所述部分如配體、受體、抗體、碳水化合物、蛋白質或脂質。所述脂質體可 能為在受體上的病毒-特異性受體，如CD4、CCR5、CXCR4、CCR2、CCR3、跨膜四蛋白CD81、人類 清道夫受體SR-ΒΙ、密封蛋白-1、閉鎖蛋白、肝配蛋-B2、CD46、CAR、av整合蛋白、HAVCR-1、 EGFR (表皮生長因子受體)、SLAM、乙酰膽堿受體、神經營養蛋白受體、p75NTR、唾液酸、粘多 糖、乙酰肝素、透明質酸(透明質酸)、膠原、明膠、聚丙烯酸、殼聚糖。可供選擇地，或額外地， 脂質體也可以在它的腔體內攜帶另一種活性部分，如酶，比如，脫氧核糖核酸酶、核糖核酸 酶、蛋白酶、糖苷酶、或脂肪酶，以及其他；堿基、酸、抑制劑、不可逆轉的粘結劑等等。
[0130] 可能作為清除劑的其他活性部分為蛋白質納米管(制備方法見于Qu and Komatsu (2010) ACS Nano, Vol. 4, No. 1，ρρ· 563-573)、樹狀分子（制備方法 US4, 289, 872、 US4, 410, 688、US4, 507, 466、4, 558, 120、US4, 568, 737、US4, 587, 329、US6, 190, 650、 W088/01178、WO88/OII79、和W〇88/01180)、適體、蛋白質、酶、配體(如受體)、抗體、螯合劑 (例如，EDTA)、原細胞、毒素、藥物或藥物前體。
[0131] 正如在此提到的"適體"為相對短可以同很多蛋白質的高親和性結合的核酸（DNA、 RNA或兩者的組合)序列。適體通常在場獨生有25-40個核苷酸并具有大約18-25kDa范圍 的分子量。對于靶標具有較高單一性和親和性的受體能夠通過一個稱為SELEX(由指數式富 集法得到的配體系統演化)的體外演化過程來獲得[參考，例如Zhang et al. (2004)Arch. Immunol· Ther· Exp· 52:307-315在此包含整體上的引用]。
[0132] 正如在此提到的"抗體"涉及到自然衍生的、或自然生成的抗體，所述抗體可以是 多細胞繁殖的或單細胞繁殖的。可供選擇地，抗體可以通過例如化學合成等合成制備，或通 過從典型抗體生產細胞或細胞株上特定mRNA的分離重組來制備。特定mRNA隨后經歷標準 分子生物學操作(獲得cDNA、誘導cDNA到表達載體等等）以產生重組制備的抗體。該技術 是本領域技術人員所熟知的。
[0133] 對于蛋白質的多細胞繁殖抗體的生成對于本領域技術人員來講是一種已知的技 術，并且該技術已被描述，尤其是，在Current Protocols in Immunology的第二章 （John E. Coligan et al. (eds.), Wiley and Sons Inc)〇
[0134] 生成單細胞繁殖抗體的技術在很多文章和教材中得到描述，如上述的Current Protocols in Immunology 的第二章 （Kohler and Milstein(1975)Nature256;495_497)、 和 US4, 376, 110。
[0135] 術語"抗體"也可以意味著包括完整的分子以及其中的片段，如：scFv、Fv、Fab'、 Fab、雙鏈抗體、線性抗體、能夠結合抗原的抗體中的F(ab'）2抗原結合片段（Wahl et al· (1983) J. Nucl. Med. 24, 316-325)。
[0136] 本發明中使用的抗體的Fab和F(ab'）2以及其他片段可能根據預期用途通過不同 的標記來示蹤。所述標記可以為能夠殺死靶標的有毒標記。
[0137] 去垢劑可能作為細胞破碎類方法。非限定性的去垢劑的清單包括CHAPS、 TritonXIOO、SDS、吐溫、和類似物。所述去垢劑的作用并不必須是作為清潔劑，也可以是代 替嚴格意義上的"捕獲"或"捕捉"所述實體，同樣，它們可選擇地或連帶地降解實體。因此 所述清潔劑類似于酶，通過實體的裂解或降解來進行作用。
[0138] 酶可以用于擾亂細胞壁，所述酶包括溶菌酶、溶葡球菌酶、消解酶、纖維酶、變溶菌 素、聚糖酶、蛋白酶、甘露糖等等。其他的實例包括，如水解酶。正如上述的去垢劑，酶不一 定作為清潔劑，因為所述酶嚴格意義上不能"捕獲"或"捕捉"所述實體，但是能分解它們。
[0139] 捕獲之后，本發明所述復合物的活性部分可能釋放一個分子，如細胞毒素、激素、 藥物、核酸、蛋白質、輔藥或化學物質(酸、堿)。所述分子或化學物質用化學反復改變所述實 體(如破壞病原體的膜或蛋白質結構)。
[0140] 所述活性部分固定在位于支架中或內側的顆粒或載體上。所述固定可以是通過共 價鍵、親和相互作用，如生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用、或通過其他固定方法。對 于可能起固定以結合其他己知特定分子的分子實例，包括、但不限定于：抗體、鐵蛋白、多組 氨酸標記肽、原癌基因標記肽、組氨酸標記肽、血凝素等等。
[0141] 根據一個優選實施例，所述固定分子為抗體、受體或配體(如：生物素-親和素)。
[0142] 根據一個優選實施例，所述載體為一種聚苯乙烯納米顆粒。
[0143] 正如在此所述的，本發明能夠用于物質或病原體的阻斷和處理。
[0144] 所述物質可以為一種存在于生物或非生物的流體的元素、化合物或分子。例如，所 述物質為存在于血液、水、毒素、可消費液體產品如啤酒或葡萄酒等等中的雜質或污染物。
[0145] 所述病原體可以為任何生物體，所述生物體包括朊病毒、病毒、細菌、原生生物、真 菌、古細菌或者寄生蟲。
[o^46]、當用于受試者時，如人類的體內或體外治療，本發明有治療/預防的應用，從而用 于預防或治療處于毒素、不希望的分子/化合物或感染等危險中的受試者。例如，本發明能 夠用于除去毒素，如蓖麻毒素、葡萄球菌腸毒素 B (SEB)或二噁英，不需要的分子或復八物 如LDL(低密度脂蛋白)、葡糖糖、自我反應性抗體、朊病毒、過敏原，致癌因子，如腫瘤壞 3死因 子-a (TNF-a)等，或感染原，如病毒。
[0147]根據本發明的一個優選實施例，所述復合物能夠用于除去、中和、或消除微牛物 如病毒、細菌、真菌、原生生物或古細菌。 '、
[0148]感染性病毒的實例包括：逆轉錄病毒科(例如，人力免疫缺陷病毒，如mu、也被 稱為HTLV-in: LAV或HTLV-III/LAV、或HIV-ΠΙ ;和其他分離株，如HIV-LP)、小核糖核酸 病母科(例如，脊髓灰質炎病毒、甲型肝炎病毒、腸道病毒、人類柯薩奇病毒、鼻病毒、艾柯 ^毒)、桿狀病毒科(例如，導致腸胃炎的菌株)、披膜病毒科(例如，馬腦脊髓炎^毒、風疹病 母)、黃病母科(例如，登革病毒、腦炎病毒、黃熱病病毒)、冠狀病毒科(例如，冠狀病毒)、彈狀 病毒科j例如，皰疹性口炎病毒、狂犬病毒)、絲狀病毒科(例如，埃博拉病毒)、副黏液病毒科 (例如，副流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞體病毒)、正粘病毒科(例如，流感病 毒)、亞病毒科(例如，漢坦病毒、布尼亞病毒、靜脈病毒和內羅病毒)、沙粒病毒科(出血熱病 毒)、呼腸病毒科(例如，呼吸道腸道病毒、環狀病毒、和輪狀病毒)、雙核糖核酸病毒科、肝脫 氧核糖核酸病毒科(乙型肝炎病毒)、小DNA病毒科(細小病毒)、乳多空病毒科(乳頭瘤病毒、 多瘤病毒)、腺病毒科(多數腺病毒)、皰疹病毒科(單純性皰疹病毒 （HSV) 1和2、水痘-帶狀 皰疹病毒、巨細胞病毒（CMV)、孢疹病毒)、痘病毒科(天花病毒、牛痘病毒、痘病毒)、和虹彩 病毒科(例如，非洲豬熱病)、和未分類的病毒(海綿組織腦科的病原對象)、 delta-肝炎病毒 (被認為是一種乙型肝炎病毒的缺陷隨體)、非甲型、非乙型肝炎病毒(類型卜內部傳輸；類 型2-表面傳輸（比如，丙型肝炎）；諾瓦克病毒和相關病毒、和星狀病毒)。
[0149]感染性細菌的實例包括：幽門螺旋菌、伯氏疏螺旋體、嗜肺軍團菌、分支細菌(例 如，結核分枝桿菌、禽結核分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、戈登分枝桿菌)、金黃色釀膿葡萄球 菌、淋球菌、腦膜炎雙球菌、單核細胞增多性李斯特氏菌、釀膿鏈球菌（甲類鏈球菌)、無乳鏈 球菌（乙類鏈球菌)、鏈球菌(綠色鏈球菌)、糞鏈球菌、牛鏈球菌、鏈球菌(厭氧的 sps.)、肺 炎鏈球菌、致病性彎曲桿菌sp·、腸球菌sp.、流感嗜血桿菌、炭疽桿菌、白喉桿菌、棒狀桿 菌SP.、豬紅斑丹毒絲菌、梭狀芽孢梭菌、破傷風梭菌、產氣腸桿菌、披衣菌、克雷白氏肺炎桿 菌、多嗎桿菌、擬桿菌sp.、具核梭桿菌、念珠棘蟲鏈桿菌、蒼白密螺旋體、雅司螺旋體、流感 嗜血桿菌、鉤端螺旋體、以色列放線菌、以及其他。
[0150]作為病原體的原生生物的實例為：引起瘧疾的惡性瘧原蟲、剛地弓形蟲（弓形蟲 病)、和杜氏利什曼蟲(利什曼病)，以及其他。
[0151] 能夠用于結合流感病毒顆粒的肽部分的實例在下面的實施例部分被提供。能夠 用于結合病毒的活性部分(諸如流感病毒蛋白神經氨酸苷酶或結合病毒顆粒的宿主蛋白 質)、或者諸如人蛋白CDSI結合其他微生物的活性部分的配體，在Cellular proteins in influenza virus particles [Shaw et al，PLoS Pathog_2008Jun6; 4(6): el000085]中進行 了描述。
[0152] 根據本方面的一個優選實施例，所述復合物能夠利用生物戰制劑通過除去、中和 或消除一旦受感染的微生物，用于預防由細菌戰物質或流行性疾病引起的潛在感染，例如， 病毒、細菌、真菌、原生生物或古細菌。
[0153]在生物戰中使用的病毒的實例有痘病毒(例如，天花、猴痘)、腦炎病毒(例如，委內 瑞拉馬腦炎病毒、西部馬腦炎病毒、東部馬腦炎病毒)、沙粒病毒(例如，拉沙病毒、阿根廷沙 粒病毒、玻利維亞沙粒病毒、巴西沙粒病毒、委內瑞拉出血熱病毒)、布尼亞病毒(例如，茹福 利-瓦利病毒、克里米亞-戈登病毒、漢坦病毒)、和絲狀病毒(例如，馬爾堡病毒、埃博拉病 毒)、黃病毒(例如，黃熱病病毒、登革熱病毒、科薩努爾森林黃病毒、鄂木斯克HFs)、以及其 他。
[0154]類似地，受試者可能需要消除、除去或中和其他實體或物質，而不一定為病原體， 所述實體或物質可能導致病理學、生理干擾、或中毒，例如，核酸、小分子、朊病毒、蛋白質、 碳酸酯、脂質、毒素、毒液、藥物、毒物、過敏原、金屬、或污染物，如可能需要或希望同樣從體 系中清除或凈化的任何物質。所述實體或物質進一步如下所述。
[0155] 本
【發明內容】
中，核酸指的是多核苷酸(例如，包含連接到磷酸基和可交換的有機堿 的糖(像核糖或脫氧核糖）的分子，所述堿既可以是取代的吡啶(例如，胞嘧啶（C)、胸腺嘧啶 (T)、尿嘧啶（U))或取代的嘌呤(例如，腺嘌呤（A)或鳥嘌呤（G)))。在此所使用的，術語指的 是核苷酸以及寡脫氧核苷酸。該術語也包括多聚核苷糖(例如，缺少磷酸基的多聚核苷糖） 和任何包含其他有機堿的聚合物。核酸分子可能源自天然原料(例如，基因、cDNA、RNA)，或 可能源自重組或合成的原料(例如，由寡核苷酸合成制備的原料)。
[0156] 小分子為低分子量的有機化合物，所述有機化合物被定義為不是聚合物。所述術 語"小分子"，尤其在在藥物領域，通常限制為高親和性的結合生物聚合物的分子，所述生物 聚合物如蛋白質、核酸或多糖和其他改變活性或作用的生物聚合物。對于所述小分子，最高 分子量限制大約為800道爾頓，這允許快速通過細胞膜的分散可能性從而所述小分子能夠 到達分子內作用部位。非常小的寡聚物也可以被認為是小分子，如二核苷酸、肽如抗氧化劑 谷胱甘肽、和二糖如蔗糖。
[0157] 所述朊病毒為感染原，其由錯誤折疊形式的蛋白質組成。朊病毒在多種哺乳動物 中與傳染性海綿狀組織腦病變有關，所述腦病變包括牛的牛綿狀腦病（BSE，也被稱為瘋牛 病)、人類的克羅伊茨費爾特-雅各布病（CJD)。所有已知的朊病毒疾病影響大腦的結構或 其他神經器官，并且所有通常是無法醫治的和通常致命的。
[0158] 正如在此所述的，"碳水化合物"、或"糖"，也可以為單糖、雙糖，如葡萄糖、蔗糖或 乳糖，或者多糖，例如，淀粉、纖維素、碳酸化合物絡合物如葡糖氨基葡聚糖寡糖、
[0159] 正如在此所述的，術語"蛋白質"和"多個蛋白質"將被說明以包括所有任意長度的 氨基酸殘基的聚合物，因此所述術語包括多肽，以及在傳統上定義的、為多肽的子集的蛋白 質，和肽，肽為更短的、由氨基酸通過酰胺結合構成的基本聚合物。蛋白質通常包括任 何氨基酸的序列，序列的一級和二級結構足夠生成三級和/或四級結構的更高水平。所述 蛋白質不同于肽，在于肽不具備形成三級和/或四級結構的能力。所述蛋白質的分子量典 型地至少為15千道爾頓。在本發明說明書中，應當理解的是，所述蛋白質可能包括氨基酸 的L-光學異構體或D-光學異構體，以及還包括合成的氨基酸。所述蛋白質可能進一步通 過含有其他一些連接所述蛋白質的鏈來修飾，例如碳水化合物(糖蛋白）、脂質(脂蛋白）、?粦 (磷酸化蛋白）、硫等等。可能通過本發明所述復合物被捕獲或捕捉的蛋白質包括抗體、酶、 細胞因子、激素等等。可能需要用本發明所述復合物進行捕獲的該蛋白質的一個具體的實 施例為淀粉樣β蛋白。其他分子如非蛋白質的細胞交流分子或神經傳導物質，例如cAMP、 多巴胺、血清素、腎上腺素等等也可能是從受試者循環中被還原或消除的靶標。
[0160]正如在此所述的，"脂質"包括脂肪、固醇、脂溶性維生素(例如，維生素 A、D、E和 K)、單甘脂、二甘酯、磷脂質，和其他。可能需要通過本發明所述復合物捕獲的所述脂質的一 個具體的實施例為低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C)。
[0161]正如在此所述的，"毒素"是一種由活細胞或微生物產生的有毒的物質，包括：血毒 素、光毒素、藍藻毒素、壞死毒素、神經毒素(例如，短裸甲藻毒素)、細胞毒素、蜂毒素和真菌 毒素。毒液是常用術語，該術語指的是任何種類的某些類型的動物通過叮或刺的方式注射 到受害者的毒素。產生毒液的動物的一個簡單列表如：蜘蛛、蝎子、蛇、魚、章魚、水母、蜜蜂、 黃蜂、螞蟻、駒鼯、鼴鼠、以及其他。
[0162]正如在此所述的，"過敏原"是任何可以導致過敏的物質。過敏原的典型的實施例 包括：花粉、塵螨、寵物皮屑、堅果、香料、海產品、花生、木本堅果、蛋類、牛奶、水母、魚、小麥 和它的衍生物、和大豆和它的衍生物、以及lOppm或以上的亞硫酸鹽(基于化學的，常見于 食品的調料和助色劑中)、火蟻、毒葛、蜂刺、藥物(例如，盤尼西林)、和乳膠。真菌引起的過 敏原包括擔子孢子、側耳菌、枝孢菌、杯形禿馬勃、曲霉屬真菌和交鏈孢霉屬-盤尼西林家 族、fomes pectinatis。所述過敏原的列表很廣，還包括昆蟲毒液、動物頭屑、真菌孢子等 等。自然界的、動物和植物過敏原的實施例包括尤其以下屬的蛋白質：犬屬(家犬)、塵螨屬 (例如，粉塵螨)、貓屬(家貓)、豚草屬（阿葉豚草)、黑麥草屬(例如，多年生黑麥草或多花黑麥 草)、柳杉屬（圓球柳杉)、交鏈孢霉屬(互隔交鏈孢霉)、車前草屬(例如，長葉車前草)、墻草屬 (例如藥用墻草、或歐蓍草)、小蠊屬(例如，德國小蠊)、蜂屬（黑麥草蜂）柏木屬(例如，意大 利柏木、亞利桑那柏木、和大果柏)、刺柏屬（Juniperus sabinoides、北美圓柏、歐洲刺桕、 杉木)、金鐘柏(例如，東方金鐘柏)、扁柏屬(例如，日本扁柏)、大蠊屬(例如，美國大蠊)、冰草 屬(例如，偃麥草)、黑麥屬(例如，黑麥)、小麥屬(例如，小麥)、鴉茅屬(例如，果園草)、羊茅屬 (例如，牛尾草)、早熟禾屬(例如，草地早熟禾或加拿大早熟禾)、燕尾屬(例如，野燕麥)、絨毛 草屬(例如，絨毛草)、黃花茅屬(例如，黃花茅)、燕麥草屬(例如，高燕麥草)、剪股穎屬(例如， 小糠草)、梯牧草屬(例如，貓尾草)、藺草屬（例如，藺草)、雀稗屬(例如，百喜草)、蜀黍屬（例 如，高粱)、和雀麥(例如，光雀麥)。
[0163]正如在此所述的，"藥物"涉及到一種醫用藥物或通常認為是消遣性藥物意義的藥 物，如安眠藥、乙醇或尼古丁。
[0164]醫用藥物，也涉及到用藥或藥劑的領域，包括退燒藥、鎮痛藥(止痛藥)、抗生素、防 腐劑等等。不同類型的用藥具體到被治療的體系，用藥的簡單列表包括：抗酸劑、抑制藥、 抗脹氣劑、抗多巴胺、質子栗抑制劑（PPIs)、H 2-受體拮抗體、細胞防護劑、前列腺素類似 物、輕瀉藥、解痙劑、止瀉藥、膽酸螯合劑、類阿片、β受體阻滯劑、鈣通道阻滯劑、利尿劑、強 心苷、抗心律失常藥、硝酸鹽、抗心絞痛藥、血管收縮劑、血管舒張劑、外圍催化劑、抗高血壓 藥、血管緊張素轉換酶抑制劑、血管緊張素受體阻滯劑、阻斷劑、抗凝血劑、肝素、抗血小板 藥、溶纖維蛋白藥、抗血友病因子、止血劑、動脈硬化/膽固醇抑制劑、血脂調節劑、他汀類 藥物、抗精神病藥、抗抑郁藥、抗嘔劑、抗痙攣藥/抗癲癇藥、抗焦慮藥、巴比妥類藥物、運動 障礙藥、興奮劑、苯二氮平類藥物、環吡咯酮類、多巴胺對抗劑、抗組胺、膽堿能藥物、抗膽堿 能藥物、大麻類、NSAIDS、撲熱息痛、三環抗憂郁藥、骨骼肌松弛藥、雄激素、抗雄激素、促性 腺激素、類固醇、抗利尿激素類似物。
[0165] 因此，本發明的復合物可能用作由于用藥或消遣性藥物引起的服藥過量的治療。
[0166] 正如在此所述的，所述"藥物前體"涉及一種基于引發劑而產生活性作用（或更高 活性）的化合物。藥物前體為在生理學條件下容易發生化學變化以使化合物有效和活性的 化合物的結構型改良。很多藥物前體衍生物在本領域是已知的，如依賴于藥物前體的水解 分裂或氧化激活的物質。一個藥物前體的實施例，非限制地，可以為醚(藥物前體)、但然后 代謝水解為羧酸作為活性實體的化合物。其他的實施例包括化合物的肽衍生物等等。
[0167] 正如在此所述的，"毒物"可能是化學戰劑(例如，芥子氣)、蓖麻毒素、殺蟲劑、除草 齊!J，或者其他。
[0168] 金屬中毒是一種嚴重的健康問題，因而用于消除不論是受試者循環還是用于人類 消費液體中的有害劑量的金屬得到高度的關注。
[0169] 因此，本發明所述復合物也可以用于捕捉或捕獲當金屬攝入過量和/或在受試者 和積累導致中毒的金屬和污染物。所述金屬包括：例如，鉛、汞、鎘、鋁、鉍、金、鎵、鋰、銀、鋇 鹽、針、鈷、鎂、三氧化砷、鉻、鈷、銅、鐵、鎳、硒、鉈和鋅。所述污染物包括有毒污染物，例如二 噁英和它的衍生物。
[0170] 圖la-c和2解釋了本發明復合物的幾個實施例，所述復合物在此指的是復合物 10。
[0171] 復合物10包括配置是含有一個內部腔體14的三維顆粒的多孔支架12。腔體14 包括連接位于腔體14并受它尺寸約束的載體18 (例如，顆粒）的活性部分16 (圖1)或連 接支架12的內表面20 (圖2)。
[0172] 支架12包括具有特定直徑范圍孔22,所述直徑根據用于俘獲靶向的所述實體而 選擇。例如，支架10設計用于捕獲流感病毒，具有100-800nm直徑的孔22。
[0173] 圖1所示的支架10能夠由隨后實施例部分的實施例1-2中的聚苯乙烯微孔/納 米顆粒來構建。圖2所示的支架10能夠使用實施例9-10所述的DNA來構建，尤其是通過 實施例4和11所述的DNA折紙技術來構建。
[0174] 圖3a-c說明了使用圖lc中支架10的病毒捕獲。圖3a說明了在復合物支架的外 部的病毒顆粒，圖3b說明了病毒顆粒穿過復合物支架的孔的選擇性流入，以及圖3c說明了 病毒顆粒與活性部分(例如，抗體）間的相互作用。紅血球如右邊所示以說明比例。
[0175] 正如上文所述的，本發明所述復合物可用于生物流體的體外或體內治療(例如，感 染的解毒或預防或治療）或非生物流體的處理(例如，水的純化)。
[0176] 因此，根據本發明另一方面，本發明提供了一種從液體中除去所述物質或病原體 的方法。
[0177] 本發明所述方法的一個優選應用是對經受或易受病原體感染的受試者的治療。
[0178] 所述治療通過給藥本發明所述能夠從受試者中捕獲病原體的復合物來實施。正如 在此使用的，術語"受試者"涉及到動物、優選為哺乳動物，如人。
[0179] 本發明所述復合物可以將其本身給藥于受試者，或在藥物組合物中與合適的載體 或輔料相混合。
[0180] 在此使用的，"藥物組合物"涉及到一種或多種在此所述的活性成分與其他化學成 分的制劑，如生理學上適宜的載體或輔料。藥物成分的目的在于促進化合物向微生物的給 藥。
[0181] 在此使用的，術語"活性成分"指的是對期望的生物效應有效的所述復合物。
[0182] 在下文中，短語"生理學上可接受的載體"和"藥學上可接受的載體"，可以互換 使用，涉及到不能導致微生物明顯刺激和取消給藥化合物的生物活性和性能的載體或稀釋 齊!J。輔藥包括在上述短句中。
[0183] 在此，術語"輔料"涉及到一種添加到藥物組合物中的惰性物質以進一步促使活性 成分的給藥。輔料的實施例，不受限制地，包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖類和多種類型的淀 粉、纖維素衍生物、明膠、植物油、和聚乙二醇。
[0184] 用于藥物的處方和給藥的技術可能在最新出版的"Remington's Pharmaceutical Sciences"（雷明登氏藥學全書，Mack Publishing Co·,Easton，PA)中找到，其在此通過引 用的方式整體引入。
[0185] 合適的給藥途徑可能，例如，包括：口服、直腸給藥、轉化粘液質，尤其是經鼻的、腸 內的、或非腸胃給藥，包括肌肉內注射、皮下注射、和髓內注射，以及囊內、直接心室內、靜脈 內的、腹膜內的、鼻內、或眼內注射。
[0186] 可選地，一受試者可以是局部而不是全身的方式給藥所述藥物組合物。例如，通過 直接到病人組織部位的藥物組合物的注射。
[0187] 本發明所述藥物組合物可能通過本領域已知方法來制備，例如，通過傳統的混合、 溶解、造粒、包衣、磨細、乳化、封裝、捕捉、或凍干方法。
[0188] 與本發明相一致的供使用的藥物組合物因此可能按著傳統方式使用一種或多種 包含輔料或助劑的生理學上可接受的載體來制成劑型，促使活性成分到能夠用于生理學上 的制劑。合適的配方依賴于選擇的給藥途徑。
[0189] 對于注射，藥物組合物的活性成分可能在水溶液中，優選在生理學上兼容的緩沖 液中來制成劑型，所述緩沖液如漢克溶液(Hank' s溶液)、林格溶液（Ringer' s溶液）或生 理鹽緩沖液。對于轉化粘液質給藥，適合于載體被滲透的滲透劑用于劑型中。所述滲透劑 在本領域通常是己知的。
[0190] 對于口服給藥，所述藥物組合物能夠通過將活性化合物與本領域已知的藥學上可 接受載體的結合來制成劑型。所述載體使所述藥物組合物被制成劑型，如片劑、丸劑、包衣 丸劑、膠囊、液體、凝膠、糖漿、料漿、懸浮液等等，用于病人的口服給藥。對于口服使用的藥 物制劑可以使用固體輔藥來制備，可選地，在加入所期望的合適的助劑之后，研磨結果混合 物，和處理顆粒的混合物，以獲得片劑或包藥丸芯。合適的輔料，尤其是填料，如糖類，包括 乳糖、蔗糖、甘露糖、或山梨糖；纖維素制劑，如玉米淀粉、小麥淀粉、大米淀粉、馬鈴薯淀粉、 明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥基丙基甲基-纖維素、和碳水甲基纖維素鈉；和/或生理學上 可接受聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮（PVP)。如果需要，崩解劑，如交聯聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、 或海藻酸或其中的鹽，如海藻酸鈉，可能被添加。
[0191] 包衣丸芯具有合適的覆層。為了這個目的，濃縮的糖溶液可能被使用，可選地 包含阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆膠、聚乙二醇、二氧化鈦、漆溶液 （lac(luer solution)和合適的有機溶劑或溶劑混合物。染料或顏料可以添加到片劑或包衣覆層，以用 于識別或描述活性化合物劑量不同組合。
[0192]用于口服的所述藥物組合物包括由明膠、以及由明膠和塑化劑制成的柔軟、封閉 膠囊制備成的推入配合(put-fit)膠囊，所述塑化劑如甘油或山梨醇。所述推入配合膠囊可 能包含存在于與填料的混合物中的的活性成分，所述填料如乳糖、粘結劑，如淀粉、潤滑油， 如滑石或硬脂酸鎂、和可選地穩定劑。在軟的膠囊中，所述活性成分可能溶解或懸浮在合適 的液體中，如脂肪油、液狀石蠟、或液體聚乙二醇。另外，穩定劑可以被添加。所有用于口服 給藥的劑型對于所選給藥流程應該有合適的劑量。
[0193]對于口腔含化給藥法，所述組合物可能采取傳統方式制成制劑的片劑或含片。 [0194]對于吸入給藥，根據本發明供使用的活性成分以從受壓包裝中氣溶膠噴霧給藥或 使用適當揮發氣的噴霧器的形式方便的送藥，揮發氣例如：二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二 氯-四氟乙烷、或二氧化碳。在加壓氣溶膠的情況下，劑量可能通過提供閥門以按計量送藥 來判定。例如，在分配器中供使用的明膠膠囊和藥筒可能制成為含有粉末混合的化合物和 合適的粉末基質(如乳糖或淀粉）的劑型。
[0195]在此描述的所述藥物組合物可能用于腸胃外給藥。例如，通過彈丸注射或連續灌 注。用于注射的劑型可以是單位劑量形式存在，例如，在安瓿;中或者多次量容器中，可選的 添加了防腐劑。所述組合物可能為懸浮液、溶液或油乳劑或水乳劑媒介，并且可能包含賦形 劑，如懸浮劑、穩定劑、和/或分散劑。
[0196]用于腸胃外給藥的藥物組分包括以水溶液形式的活性劑型的水溶液。另外，活性 成分的懸浮劑可以制備為合適的油或水基注射懸浮液。合適的親脂溶劑或媒介包括脂肪 油，如芝麻油、或合成的脂肪酸酯，如油酸乙酯、甘油三酯、或脂質體。水注射懸浮液可能含 有增加懸浮液粘度的物質，如羧甲基纖維素鈉、山梨醇、或葡萄聚糖。可選地，懸浮液可能還 包括合適的穩定劑或增加活性成分溶解性的物質，以允許較高濃度液體的制備。
[0197]可供選擇地，在使用前，所述活性成分可以是為粉末形式，用于與合適的媒介進行 構建，例如，無菌、無熱原的、水基溶液。
[0198] 持續釋放（SR)、延長釋放（ER、XR、或XL)、限時釋放或定時釋放、控制釋放（CR)、或 連續釋放（CR或Contin)藥丸為制備成隨著時間緩慢溶解和釋放藥物的片劑或膠囊劑型。 持續釋放片劑被制備，從而活性成分嵌入到非溶性物質的基質中（例如，丙烯酸樹脂、多糖 等等)，進而溶解的藥物通過基質上的孔擴散出來。在一些SR劑型中，所述基質物理膨脹形 成凝膠，從而藥物首先溶解在基質中，然后通過外表面離開。
[0199] 控制釋放和持續釋放的不同在于：控制釋放完全為零階釋放，g卩，隨著時間的藥物 釋放與濃度無關；另一方面，持續釋放意味著藥物在時間周期內緩慢的釋放。它可能是或不 是控制釋放。
[0200] 本
【發明內容】
中適合使用的藥物組合物包括如下組合物：其中，活性成分以有效的 足以實現預期目標含量存在。更具體地，"治療有效量"意味著有效用于阻止、減輕、或改善 失調癥狀或延長被治療受試者存活的活性成分的數量。
[0201] 治療有效量的檢測被本領域技術人員所熟知，尤其是根據在此提供的具體描述。
[0202] 對于任何用于本發明方法的制劑，劑量或治療有效量首先能夠由體外和細胞培養 實驗來估算。例如，劑量可以在動物模型中得到以實現所需的濃度或滴度。這一信息能夠 用于人體內有效劑量的更精確的檢測。
[0203] 在此所述的活性成分的毒性和治療效果通過體外、培養或實驗動物標準藥物規 程來測得。從體外或細胞培養實驗和動物研究獲得的數據能夠用于制定人體使用劑量的 范圍。所述劑量可能依靠使用的劑量形式和給藥流程來變化。精確的規劃、給藥流程、 和劑量可以由每個醫師針對病人的條件來選擇。（參見： Fingl，E.et al.(1975)，〃The Pharmacological Basis of Therapeutics, "Ch. 1，ρ·1·)。
[0204]劑量的量和給藥間隔可能單獨的調整以提供足夠的活性成分的血漿或大腦水平 以誘使或抑制生物效應(例如，最小有效濃度，MEC)。MEC對于每種制劑來將是變化的，但可 以由體外數據估算得到。達到MEC的必須劑量依靠個人特征和給藥流程。檢測試驗能夠用 于檢測血漿濃度。
[0205]基于被治療的情況的嚴重程度和響應性,在持續幾天到幾周的療程中，或直到痊 愈或疾病狀態的減小，配藥可以為單一或多重給藥。
[0206]當然，給藥的組合物的用量依靠于被治療的受試者、病癥的嚴重程度、給藥方式、 處方醫師的判斷等等。
[0207] 本發明所述組合物，如果需要，可以存在于包裝或配藥裝置中，如FDA批準的試劑 盒，其可能包含一種或幾種含有活性成分的單位劑量。例如，所述包裝可能包含金屬或塑料 薄膜，如吸塑包裝。所述包裝或配藥裝置可以由給藥指示來配合。所述包裝或配藥裝置也 可以由調節藥物的制造、使用或銷售的政府機構規定的形式的通知來配合。所述通知是由 機構批準的用于人或獸給藥的組合物的形式的反映。例如，所述通知可能包括FDA對于處 方藥批準的或定制產品的標簽。包括在藥物上可接受載體中制備本發明所示的劑型也可也 可以制備，位于合適的容器中，和標上用于指示狀態的治療標簽，進一步如下所述。
[0208] 一旦給藥至受試者，所述支架就"過濾"生物流體，所述活性部分在支架內以靶向 或非靶向的方式捕捉或處理實體。顯然，并非所有出現在生物流體中的組分通過所述支架 上的孔，例如，血紅細胞太大以致于不適合通過孔，并進而不能經過所述支架的孔。
[0209]當在體內使用時，本發明所述復合物當然要從受試者中清除出去，例如，通過吞噬 細胞或經過腎臟。當本發明所述復合物用于減小免疫原性的情況下，從身體中清除有可能 會減緩。
[0210] 本發明所述復合物也可以形成可定位在身體血管內的裝置的一部分。例如，復合 物可以并入容器內，例如生物膠囊(例如，商標的免疫分離裝置)。生物膠囊的進 一步描述請參考 US2010/0028398 或 US2011/0092949。
[0211] 所述膠囊可以構建成過濾裝置，并位于（固定)主要血管，或器官中。它可以像嫁接 或注入特定器官的過濾器一樣起作用，所述具體的器官如脾臟、肺臟、心臟、腎臟、淋巴結等 等。進一步，所述容器可以在生物流體(例如，GI流體或血液循環）內自由流動。
[0212] 本發明所述復合物進一步包括用于捕獲病毒的部分。所述部分為病毒-特異性受 體，如在此所述的，抗體、配體、受體等等。正如先前所述，病毒特異性作用的受體的非全部 的列表為：CD4、CCR5、CXCR4、CCR2、CCR3、跨膜四蛋白⑶81、人類清道夫受體SR-ΒΙ、封閉蛋 白-1、閉合蛋白、肝配蛋白-B2、CD46、CAR、av整合蛋白、HAVCR-1、EGFR (表皮生長因子受 體)、SLAM、乙酰膽堿受體、神經營養受體、p75NTR、唾液酸、粘多糖和硫酸乙酰肝素。
[0213] 本發明所述復合物還可以進一步包括用于捕獲微生物的部分。所述部分可以是被 寄生微生物結合的宿主-特異性部分，如蛋白質、碳氫化合物、脂質、抗體、配體和受體等。 作為被寄生微生物結合的宿主-特異性部分的蛋白質的非全部的列表包括：膜聯蛋白（如 膜聯蛋白A1、膜聯蛋白A2、膜聯蛋白A4、膜聯蛋白A5、膜聯蛋白All)、四次穿膜蛋(如CD81、 CD9)、CD59、親環蛋白、β_微管蛋白、絲切蛋白1、烯醇1、脂肪酸合成酶、γ-谷氨酰轉移酶 1、磷脂酰肌醇聚糖4、磷酸甘油酯激酶、丙酮酸激酶、S100鈣結合蛋白All、原肌球蛋白1、轉 凝蛋白
[0214] 本發明所述復合物也可以用于從生物樣品中除去病原體或物質。例如，血液或組 織樣品(懸浮在緩沖液中)可以通過含有本發明所述復合物的裝置。病原體或物質通過所述 復合物進行"過濾"，并被活性部分捕獲和失活。
[0215] 正如在此所述的，本發明復合物也可以用于純化非生物流體去除物質，如雜質、毒 素等等。所述流體可以為任何來源的水、飲料、液體培養基、污水、血液樣品、液體污染物等 等。
[0216] 正如在此所述，術語"雜質"指的是懸浮顆粒、寄生蟲、細菌、藻類、病毒、真菌、古生 菌、原生生物、有機碎片、金屬、核酸、小分子、病毒顆粒、蛋白細胞、蛋白質、肽、烴、脂質、毒 素、毒液、藥物、毒物、過敏原或污染物。
[0217] 當應用于體外時，尤其是非活的體系時，本發明所述復合物可以可選地通過離心 分離、沉淀、通過色譜分析、由磁鐵力來推動，或電泳分離等等進行清理。
[0218] 為了變于磁性分離，所述支架用 Yabin等人[European Polymer Journal Volume4 3, Issue3, March2007，Pages762_772]、或 Liua 等人[Journal of Colloid and Interface Science, Volume375, Issuel, lJune2012，Pages70_77]所述的方法來改善。
[0219] 因此，本發明所述復合物進一步包括標記，如磁性、熒光或冷光標記，用于從液體 中純化所述復合物，例如，通過FACS，磁性分選器等等。
[0220] 本發明所述復合物作為試劑盒來包裝，所述試劑盒包括粉末或懸浮頁形式提供的 復合物、附屬的試劑用于給藥所述復合物(例如，緩沖液等等)、給藥裝置(例如，注射器）和 供使用的說明書。
[0221] 治療感染HIV或流感的人類受試者的典型記錄如下所述。
[0222] 用抗HIV的復合物對HIV感染夸試者的治療
[0223] 抗HIV復合物通過使用DNA折紙技術構建中空微球模型的、直徑Ιμπι的支架 來產生(參加實施例部分進一步描述)。DNA微球的外表面有300nm的孔，并聚乙二醇化 (PEGylated，PEG化)，和含有CD4和CCR5受體的500nm (內直徑）脂質體在微球內被捕獲。 所述脂質體通過抗體連接到核酸支架。
[0224] 治療方法：
[0225] 在鹽載體上含有25, 000, 000單位的抗HIV復合物的藥劑量通過緩慢滴加注入輸 送給病人（IV)，基于病毒載量，藥劑量被重復的或調整。
[0226] 感染流感夸試者的治療
[0227] 抗流感復合物通過在聚苯乙烯、晶體硅、PLGA、或殼聚糖形成的支架內構建抗病毒 唾液酸的樹狀分子來形成，所述支架在每側都具有400nm的孔并被PEG化。
[0228] 治療方法
[0229] 包括10, 000, 000捕獲單位/1ml的劑量的鼻用噴霧用于預防藥或感染的治療。
[0230] 應當理解的是，本發明所述方法也能夠用于治療植物或其他多細胞生物體的病原 體感染。例如，病毒陷阱可以直接注射到樹中（通過樹干注入）以在整個樹中全身分布。所 述注射在樹的底部IS英寸、每個6英寸間隔進行所述。注射深度在5/8〃和15/8〃之間。 10 英寸直徑的樹將用大約1. 5盎司的注射。
[0231]在此使用的術語"大約"指的是±10%。
[0232]本發明其它主題、優勢、新的特征，通過下述實施例的檢查，對于本領域技術人員 來講將變得清楚明了；所述實施例并不意味著一種限制。另外,上述描述的和后面權利要求 書部分要求保護的本發明實施例和各方面的每一種變化在下述實施例中獲得實驗支持。 [0233] 實施例
[0234]現場，結合上述的說明，參考下面的實施例，以不受限制的方式闡述本發明。
[0235] 實施例1
[0236] 聚苯乙烯微球陷阱
[0237] -定數量的聚苯乙烯（PS)被生產，并限定相關尺寸分布和孔隙大小范圍。
[0238] 材料和方法
[0239] 無孔微球
[0240] 使用一個500ml三頸圓底燒瓶溶解3. 75g的聚乙烯吡咯烷酮到150ml乙醇和 62.5ml甲氧基乙醇的混合物中，所述燒瓶上配有一個冷凝器和一個機械攪拌器。所述混合 物的溫度通過油浴緩慢上升到73°C，同時氮氣鼓泡到體系中。
[0241] 單獨地，一個l〇〇ml圓底燒瓶用來溶解1. 5g芐基過氧化到37. 5ml苯乙烯中，該溶 液在氮氣保護下通過磁力攪拌器來攪拌。在溫度穩定后，100ml燒瓶的內容物倒入到所述 500ml三頸圓底燒瓶中，并反應過夜。
[0242] 在洗滌之前，微球在光學顯微鏡下觀察以評估它們的尺寸和同質性。
[0243] 反應混合物均勻分布在12個50ml小瓶中并用乙醇洗滌6次以除去苯乙烯殘留， 然后用50%乙醇水溶液洗滌1次和用水洗滌2次。洗滌通過在離心機中5500rpm下旋轉所 述小瓶8分鐘并緩慢除去上層清液來完成。經過所述洗滌，樣品過夜凍干。
[0244] 多孔微球
[0245] 多孔微球通過改善 Omer-Mizrahi 和 Margel [Polymer Volume51, Issue6, 2010, Pa gesl222-1230]描述的過程來制備。簡單地說，lg凍干的PS微球懸浮在50ml水和lml乙 醇中，所述懸浮液然后超聲處理8分鐘（ 35%振幅)，然后在配有磁力攪拌的100ml圓底燒瓶 中臭氧分解20分鐘。
[0246] 生成的樣品用水洗滌（5500rpm下8分鐘)，直到上層清液中沒有臭氧剩下，根據添 加碘化鈉后顏色變化來測定。
[0247] 洗滌的樣品小球懸浮在9ml水中并均勻分布到9個20ml微量瓶中，每個微量瓶中 含有lml水，相當于大約l〇〇mg PS。添加7ml的1. 43%十二烷基硫酸鈉（SDS),然后添加不 同體積的甲基丙烯酸縮水甘油酯（GMA):〇.lml x2、0.2ml x2、0_25ml、0.3ml x2、0.35ml x2。 添加14mg重亞硫酸鈉后，每個瓶在室溫下攪拌過夜。所述樣品然后用30%乙醇水洗滌2次， 乙醇洗滌2次和20%乙醇洗滌一次。所述洗滌每次在5500rpm下進行8分鐘。
[0248] 結果
[0249] 無孔微球
[0250] 在光學顯微鏡下觀測到的聚苯乙烯微球群體，表現出同質性，直徑范圍在 2. 1-2. 2 μ m(圖4a)。當在掃描電子顯微鏡下觀測，大多數微球干燥時為大約1. 7 μ m直徑， 而含水時為2· 2 μ m (圖4b-c)。
[0251] 多孔微球
[0252] 與GMA反應制備的均勻的多孔微球群，孔的直徑范圍在3· 5-4· 1 μ m和孔的直徑范 圍在0.3-1.(^111(圖5^)，結果是所述微球尺寸膨脹。低的0齡（0_51111)容積不影響微 球，GMA容積從0. 5增加到1. 5ml,制備中空微球和退化微球的均勻群體。增加臭氧分解時 間到40分鐘得到類似的結果。
[0253] 討論
[0254] 在此描述的方法學生成了聚苯乙烯微球的均勻群體。孔生成使用臭氧分解和聚合 反應結合的方法，導致較窄的孔直徑范圍，能夠使微球的作為直徑范圍在50-250nm內的桿 狀病毒的陷阱來應用。
[0255] 實施例2
[0256] 聚苯乙稀納米球載體
[0257] -定數量的聚苯乙烯（PS)被生產，并限定相關尺寸分布和孔隙大小范圍。
[0258] 材料和方法
[0259] 600nm聚苯乙烯微球
[0260] 該方法改編自 Goodwin 等人[C0LL0ID&P0LYMER SCIENCE Volume252，Number6(1974)，464-471]所述的方法。簡單來說，lml苯乙稀添加到8. 5ml的 2· 5xl(T3M氯化鈉溶液中，然后添加〇. 5ml0. 05M的過硫酸鉀溶液。生成的混合物在20ml閃 爍計數瓶中73°C下攪拌過夜，然后用水洗滌2次，用乙醇洗滌2次和用水洗滌2次。洗滌通 過在離心機中（lOOOOrpm下12分鐘）旋轉所述小瓶并緩慢傾倒上層清液來執行。
[0261] 25〇nm聚苯乙烯微球
[0262] 在20ml閃爍計數瓶中，5ml十二烷基硫酸鈉（SDS)與5ml的4, 4' -偶氮雙（4-氰 基戊酸)混合。用NaOH調節pH到7. 8,并添加0.75ml苯乙烯，然后在73°C下攪拌過夜。樣 品通過離心器旋轉（llOOOrpm下20分鐘）來洗滌，并緩慢傾倒上層清液。
[0263] 結果
[0264] 600nm聚苯乙烯微球
[0265] 所述聚苯乙烯微球通過使用動態光散射（DLS/Nanophox)來分析尺寸，由此得到的 直徑為591±77nm。
[0266] 250醜聚丙乙烯微球
[0267] 所述聚苯乙烯微球通過使用動態光散射（DLS/Nanophox)來分析尺寸，由此得到的 直徑為231±31應,苯乙烯容積減小到〇· 3ml，生成同樣尺寸的微球。
[0268] 討論
[0269] 具有590nm或230nm平均直徑的兩種納米球群體得以生成。兩種群體能夠分散到 4 μ m的如實施例i所述的聚苯乙烯微球中，所述聚苯乙烯微球有范圍在300nm-10〇〇nm范圍 的孔直徑。通過用活化劑(如病毒結合部分等等)涂裝所述納米球并在所述微球中隔離所述 納米球，這能夠生成一個免疫優先的抗病毒陷阱。
[0270]聚苯乙烯多孔微球形成對身體免疫系統呈惰性的陷阱的外部表面，陷在所述微球 內部的涂裝的納米球受到保護不受免疫系統傷害并能夠結合和固定通過所述微球孔進入 所述陷阱的病毒。
[0271] 實施例3
[0272] 體外實驗中的桿狀病毒
[0273] Sf9培養基體系被用來測試4 μ m涂裝有能夠結合和/或失活桿狀病毒顆粒的各種 表面活化劑的聚苯乙烯微粒的有效性。
[0274] 材料和方法
[0275] 陷阱
[0276] 為了將氫蓖麻油、多熔素、兩性霉素、吐溫、TritonlOO-X、組織蛋白酶、表面活性蛋 白D或抗-gp64 (用于桿狀病毒包膜蛋白的特異性抗體）結合到多孔聚苯乙烯微球上進而 生成病毒陷阱，結合生物素-親和素結合劑被使用。
[0277] 若丹明B被用作對照以保證合適的結合。牛血清白蛋白（BSA)和抗-IL13被使用 作為陰性對照，因為它們預期不會干擾病毒感染。
[0278] 生物素與活化劑的結合
[0279] 賽默飛（Thermo Scientific)的 EZ-link TFPA-PEG3 -生物素試劑盒(廣品號： 21303, Mw=664g/m)被用來共價結合。所述TFPA-生物素試劑通過UV光激活，并促進生物 素結合到存在于活化劑化合物的C-H鍵中。每種活化劑用〇· lmg、相當于1. 51χ ΙΟΛιι?οΙ的 生物素試劑孵育。正如試劑盒報告所述，1〇 : 1生物素和活化劑的摩爾比是生物素酰化的 最佳比。因此，每種活化劑的1.51xl(T5被用于生物素結合劑。
[0280] 在反應中使用的以下每個活化劑的量：
[0281] · 0· 34mg 的多溶素：平均 Mw=22, 500g/mol。
[0282] · 0· 014mg 的兩性霉素：Mw=924g/mol。
[0283] · 0· 0185mg 的吐溫：Mw=1227. 5g/mol (密度假設為 lg/ml)。
[0284] · 9. 8 μ g 的 Tritonl00-X : Mw=647g/mol (密度假設為 lg/ml) ·
[0285] · 2 μ g的組織蛋白酶：Mw=28, 900g/m -相當于6· 9χ10_5μ mol。為了保持生物素 試劑：活化劑比例穩定在10 : 1，〇· 46 μ g的生物素試劑被使用。
[0286] · 0. 〇45mg的氫化蓖麻油：平均Mw=3000g/mol (密度假設為lg/ml)。
[0287] · 0· 045mg 的表面活化蛋白 D : Mw=65000g/mol -相當于 3· 1χ1(Γ5μ mol。為了保 持生物素試劑：活化劑比例穩定在10 : 1，0· g的生物素試劑被使用
[0288] · 7. 2 μ g 的 Pvhodamine B : Mw=479g/mol〇
[0289] 在PBS中，TFPA-生物素試劑和活化劑混合到最終15〇 4 1的量，并在黑暗下孵育2 分鐘，接著，溶液被孵育1〇分鐘，在365111111^燈（23(^,0_17六111?，391)下5。111。通過賽默飛 的EZ-link sulfo-NHS-生物素試劑盒(產品號21217，Mw=454_ 5g/m)，對照試劑共價結合到 生物素。試劑通過穩定的酰胺鍵與任一含有伯胺的分子快速反應以連接到生j 勿素標記上。 正如試劑盒報告所述，1〇 : 1生物素和活化劑的摩爾比是用于生物素結合的最佳比。
[0290] 在反應中使用的以下每種活化劑的量： 、
[0291] ·〇. 〇33g 的牛血清白蛋白：Mw=665〇0g/mol，Ν=0· 5μηιο1，2. 3rag 的生物素試劑被 使用。 、
[0292] · 10 μ g Wife -gp ： Mw=150, OOOg/mol, 0. 3 μ g
[0293] · l〇 μ g 的抗-IL13 抗體：Mw=150, OOOg/mol，N=6.67xl(T5m，0· 3Pg 的生物素試劑 被使用。
[0294]用多孔PS微球涂裝的別藻藍素-鏈霉親和素（APC-親和素）
[0295]總數為5000萬的微孔聚苯乙烯微球被用于親和素涂裝。所述微球用ΡΗ=9· 6的 50mM的碳酸鹽/碳酸氫鹽緩沖液洗滌3次，并用20 μ g的APC-親和素（Mw=60000g/m，產品 號4〇52〇7, BioLegend)、相當于3. 33xl〇-4 μ m，在500 μ 1碳酸鹽/碳酸氫鹽緩沖液中，RT條 件下使用搖床孵育3〇分鐘。所述微球然后用PBS洗滌3次。所述微球的濃度通過Accuri C6流式細胞儀進行測量，同時400萬微球的等份被制備。
[0296] 生物素化活化劑和APC-親和素涂裝的多孔聚苯乙烯微球的結合
[0297]每等份APC-親和素涂裝的多孔聚苯乙烯微球與所述活化劑生物素反應混合物進 行混合，并在RT條件下使用搖床孵育30分鐘。每等份隨之用PBS洗滌4次。所述微球濃 度用Accuri C6流式細胞儀進行測量。
[0298] 結果
[0299] 多孔聚苯乙烯微球的流式細胞儀讀數（Accuri C6)如圖6a_b所示。FL2-A讀數 (圖6a)反映黃橙光譜處的發射。而FL4-A讀數（圖6b)反映遠紅外光譜處的發射。若丹明 B具有一個在625nm處的最大發射，對應于FL2-A中的讀數。別藻藍素（APC)具有在一個 在661nm處的最大發射，對應于FL4-A中的讀數。圖6a-b顯示了聚苯乙烯微球的FL2-A和 FL4-A讀數(黑色)，涂有APC-親和素的聚苯乙烯的FL2-A和FL4-A讀數(紅色)、和包裹若丹 明B的涂有APC-親和素的聚苯乙烯的FL2-A和FL4-A讀數(藍色)。所述聚苯乙烯微球(黑 色）在FL2-A和FL4-A中都具有一低強度的讀數；涂有APC-親和素的聚苯乙烯微球(紅色） 在FL 2_A上具有一低強度的讀數，但是在FL4-A中有一高強度的讀數；包裹若丹明B的涂有 APC-未和素的聚本乙稀(藍色）在FL2-A和FL4-A中都具有一'尚強度的讀數。
[0300] 流式細胞儀讀數能夠指示多孔聚苯乙烯微球的APC-親和素涂層和活化劑的生物 素化，因為通過若丹明B的生物素化來指示是成功的。
[0301] 細胞
[0302] 27°C下，Sf9細胞在SFM921血清-游離昆蟲細胞培養基(表達系統）中繁殖。Sf9 細胞在I2孔板的單層上或在振動為130rpm的搖瓶的懸浮液中生長。
[0303] 足夠的E. coli DH10BAC細胞，包含桿粒(桿狀病毒穿梭載體質粒）和輔助質粒，根 據制造商（Invitrogen)的操作手冊，被用于產生重組桿粒。基因插入（GFP)到所述桿粒由 PCR進行驗證。在6個孔板中，通過使用ESCORT的生物轉染試劑，Sf9細胞與重組桿粒DNA 進行傳染。所述細胞在27°C下孵育5h，漂洗并繼續孵育72h，培養基被收集、離心，含有病毒 的上層清液用于2-3個連續感染，引起病毒顆粒的擴增。
[0304] Sf9細胞（2*105cellS/ml)接種在12孔板上，其中，每孔1ml。細胞的感染在感染 復數（Μ0Ι)為10的條件下用兩種不同方法來操作：預孵育和預防。在預孵育模式中，病毒 用不同的陷阱單獨孵育30分鐘，在5000g下離心3分鐘，上層清液添加到細胞中。在預防 的模式中，陷阱添加到細胞中，然后也添加病毒顆粒。所述孔板在27?下放置在調濕器中 48小時，通過強力移孔里的內容物來收集，并用FACS (C6accuri)進行GFP熒光分析。 [0305] 結果與討談
[0306]病毒能夠損害它們引起的受感染宿主生物體是已知的。目前，沒有抗病毒試劑能 夠表現出抗生素的有效性或多譜適用性。
[0307]本發明提供了一種通過提供病毒陷阱來抵抗病毒感染的新方法，所述病毒陷阱能 夠物理上或化學上滅活感染原，如病毒。本發明也提供了一種用于觀察和量化各種病毒陷 阱構造的抗病毒活度的模擬系統。 _
[0308] 與受感染的Sf9細胞（圖8a和8b)相比，細胞培養實驗顯示，健康的未處理的Sf9 細胞（圖7a和7b)的活力表現出明顯的區別。Sf 9細胞用病毒和多孔聚苯乙烯陷眺（圖9a 和9b用箭頭表示陷阱）共同處理，帶來大多數感染的Sf9細胞明顯的挽救，這些細胞，從品 質上講，與受感染細胞相比，更相似于健康的未處理細胞。
[0309] 感染相關的桿狀病毒的挽救進一步被定量評估。正如圖％和9d所示，感染抑制 的最高速率通過單獨PS、吐溫、聚賴氨酸、表面活化蛋白D和Triton來獲得。
[0310] 實施例4
[0311] 桿狀病毒的體內實驗
[0312] Blaberus craniifer蟑螂，別名"死人頭"蟑螂，被用作體內模型來評估多孔聚苯 乙烯微球陷阱的有效性和毒性。
[0313] 材料和方法
[0314] 多孔聚苯乙烯微球陷阱與桿狀病毒混合并立即注射到所述蟑螂的腹部血腔，從而 探針刺入到第三和第四腹部腹片之間，接近于側邊緣（圖l〇a)。每個蟑螂中，注射總數為 10 μ 1，包含1 μ 1桿狀病毒和合適量的陷阱，對于每個蟑螂，達到總數為165000的陷阱顆 粒。在注射前，蟑螂在-20°C下放置7分鐘以使它們麻木。
[0315] 用于注射實驗的陷阱為覆蓋有Triton、聚賴氨酸、表面活化蛋白D (簡稱SFPD)、 抗-GP64抗體（gp64)或牛血清白蛋白（BSA)中任意一個的聚苯乙燦顆粒。裸露的聚苯乙搖 顆粒用來做對照。2個蟑螂被用來注射相同的陷阱作為重復，此外，作為陽性對照，2個蟑螂 只被注射桿狀病毒，作為陰性對照，2個蟑螂沒有被注射。
[0316] 在注射5天后，通過刺穿后胸腿根部的膜并輕輕擠壓所述蟑螂以緩慢釋放血淋 巴，來收集血淋巴細胞。通過已經含有25μ 1冰冷的抗凝劑緩沖液（30mM檸檬酸、30mM檸檬 酸鈉、0· 5MEDTA、0· 02%疊氮化鈉）的微吸管頭，25 μ 1的血淋巴被快速地收集，并懸浮到含 有50 μ 1冰冷的抗凝劑緩沖液艾本德管（印pend〇rf)中。所述細胞被計數，所述細胞的相 對GFP突光通過C6accuri流式細胞儀來被測量。
[0317]
[0318] 由于桿狀病毒在本實驗中表達胞質GFP標記，血淋巴細胞的相對GFP熒光為病毒 感染的直接測量。相對GFP熒光與只注射桿狀病毒的蟑螂的相對GFP熒光做對比。
[0319] 過論
[0320]所述陷阱并不產生影響所述蟑螂的任何明顯的毒性。而且，注入的陷阱降低了與 感染相關的GFP熒光（圖10b)。覆蓋有Triton或聚賴氨酸的陷阱得到的結果與沒有注射的 樣品具有相比性，顯示了整個感染的完全的挽救。
[0321] 實施例5
[0322] 桿狀病毒粘附在陷阱
[0323]陷阱與病毒進行孵育，以顯示穩定桿狀病毒細胞顆粒的能力，從而促進它們的抑 制能力。
[0324] 材料和方法
[0325]原子每種活化劑的400, 〇〇〇個陷阱與10 μ丨病毒輕輕地混合超過2'。每個樣品隨 后用lml PBS洗滌，并在5g下離心8分鐘。之后，除去上層清液，添加 lml PBS，樣品輕輕地 混合8分鐘，然后在5g下離心8分鐘。900 μ 1的上層清液被除去，所述微球懸浮在剩余的 100 μ 1溶液中。
[0326] 所述陷阱含有以下活化劑：吐溫、Triton、兩性霉素、表面活性蛋白D。裸露的多孔 微球和覆蓋有親和素的多孔微球都作為對照來使用。
[0327] 結果
[0328] 當使用對照陷阱時，即，裸露的多孔微球和覆蓋有親和素的多孔微球只顯示了病 毒顆粒與所述微球表面最低結合，含有的Triton (圖11a-b)、吐溫和兩性霉素的陷阱顯示 了病毒顆粒的中度結合，如所示。
[0329] SEM通過碳素涂裝在玻璃表面來實現。加速電壓為3kV。工作距離為2. 6-2. 9ram。 棒如每個圖片所示。粘附到陷阱的表面的顆粒在期望的桿狀病毒顆粒尺寸范圍，50-300nm。
[0330] 實施例6
[0331] DNA折紙支架
[0332] 本發明所述的DNA折紙為基礎的支架的設計在caDNAno的幫助下得以發展，圖 像接口為基礎的計算機輔助設計環境開發用于輔助蜂窩狀褶皺折紙設計的產生（Douglas etal，（2009)Nucleic Acids Research，首次網上發表 doi:10.1093/nar/gkp436)。
[0333] DNA折紙為基礎的支架通過結合20nM支架DNA、和ΙΟΟηΜ的每一種常用的寡核苷 酸、包括 5mM Tris、lmM EDTA(20°C下 pH 為 7.9)、和 22mM 或 15mM MgCl°C 的緩沖液和鹽。折 疊通過快速加熱變性、然后從80到61?緩慢冷卻超過80分鐘、再然后60到24°C冷卻超過 173h得以實現。為了觀察到的產生的產品，樣品在冰水浴中，2%瓊脂糖膠（0.5X TBE，llmM MgC12, 0· 5mg/ml溴化乙啶）上70V下電泳4h。
[0334] 基本上，任何純的隨意的和高復雜性(非重復）的ssDNA可作為折紙DNA的支架。 可以使用的序列的實施例為 M13mpl8 (SEQ. ID. NO. I)、p7308 (SEQ. ID. NO. 2)、p7560 (SEQ. ID_N0.3)、p7560old(SEQ_ID.N0.4)、p75601ab(SEQ.ID.N0_5)、p7560antisense(SEQ_ ID. NO. 6)、p7704(SEQ_ ID. NO· 7)、p77041ab(SEQ. ID. NO. 8)、p8064(SEQ_ ID. NO· 9)、p80641ab (SEQ· ID. NO· 10)、p8100(SEQ. ID. NO. ll)、p8100a(SEQ. ID. NO· 12)、p8100b(SEQ. ID· NO· 13)、 p8100c (SEQ.ID.N0_14)、p8634 (SEQ.ID.N0_15)、pEGFP (SEQ.ID_N0.16)。
[0335] 例如，主要使用的DNA序列，例如，可以是如caDNAno的繪圖網站（http: // cadnano. org. /gallery, html)所提供的，并在下表 1 中。
[0336] 表 1
[0337]

【權利要求】
1. 一種物質組合物，包含：由一個支架包圍的至少一個活性部分，所述支架用于對象 的選擇性流入，所述對象能夠與所述至少一個活性部分相互作用。
2. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架包括核酸、聚合物、和/或娃 結構。
3. 如權利要求2所述的物質組合物，其特征在于，所述核酸結構為DNA折紙結構。
4. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述對象為物質、微生物或細胞。
5. 如權利要求4所述的物質組合物，其特征在于，所述微生物選自病毒、細菌、真菌、寄 生蟲、古細菌、海藻和原生生物組成的組。
6. 如權利要求4所述的物質組合物，其特征在于，所述物質選自肽、多肽、朊病毒、脂 質、脂質復合物、核酸、碳水化合物、過敏原、毒素、激素、抗體、藥物、小分子、污染物和礦物 質組成的組。
7. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架用于允許直徑為 0. 01-50 μ m的對象選擇性的流入。
8. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架用于允許直徑為 0. 01-0. 08 μ m的對象選擇性的流入。
9. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述活性部分能夠結合所述對象。>
10. 如權利要求9所述的物質組合物，其特征在于，所述活性部分選自抗體、適體、受 體、螯合劑、配體、脂質體、納米管、樹狀分子、原細胞、細胞、肽、蛋白質、酶、化學品、清潔劑、 毒素、藥物和藥物前體組成的組。
11. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述活性部分能夠裂解所述對象或 使所述對象變形。
12. 如權利要求11所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分選自酶、核 糖酶、化學品、酸、堿和清潔劑組成的組。
13. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分連接到所述 支架。
14. 如權利要求13所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分通過連接 體連接所述支架。
15. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架在脊椎動物中基本為非免 疫原性的。
16. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架為非脂質支架。
17. 如權利要求I5所述的物質組合物，其特征在于，所述支架包括PEG或PEG衍生物， 或者包括透明質酸。
18. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架形成一個具有內部腔體的 顆粒。
19. 如權利要求18所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分設置于所 述腔體內。
20. 如權利要求18所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分在所述腔 體內連接所述支架。
21. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分在與所述對 象相互作用下能夠釋放分子。 >
22. 如權利要求21所述的物質組合物，其特征在于，所述分子選自標志物、毒素、激素、 藥物、核酸、蛋白質和佐劑組成的組。
23. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架進一步包含^向部分。
24. 如權利要求23所述的物質組合物，其特征在于，所述靶向部分選自受體、抗體、適 體、組織特異性部分、微生物特異性部分、配體和磁體組成的組。
25. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述至少一個活性部分與位于所述 支架上的一種載體相連接。
26. 如權利要求25所述的物質組合物，其特征在于，所述載體陷入所述支架內。
27. 如權利要求2所述的物質組合物，其特征在于，所述結構為微電子機械系統(MEMS) 結構。
28. 如權利要求4所述的物質組合物，其特征在于，所述結合部分能夠使配體非內生性 結合到所述微生物。
29. 如權利要求1所述的物質組合物，其特征在于，所述支架進一步包括至少一個免疫 調整部分。
30. -種藥物組合物,包含權利要求1所述的物質組合物和藥學上可接受的載體。
31. 如權利要求30所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥學上可接受的載體被挑選 出來以適合口服、粘膜、外用或全身給藥。
32. -種從流體分離對象的方法，包括，將所述流體暴露在物質組合物下，所述物質組 合物包括由支架包圍的至少一種活性部分，所述支架用于對象的選擇性流入，所述對象能 夠與所述至少一種活性部分相互作用，從而從所述流體中分離所述對象。
33. 如權利要求32所述的方法，其特征在于，所述液體為生物流體。 34_如權利要求33所述的方法，其特征在于，所述將生物流體暴露在物質組合物下是 通過給受試者服用所述物質組合物來實現。 3δ·如權利要求32所述的方法，其特征在于，所述液體為含水流體。
36. -種分離的多核苷酸，包括SEQ ID NO :209-476中提出的序列。 3L -種微粒，包含權利要求36所述的分離的多核苷酸。
38. -種分離的多肽，包括SEQ ID NO :477-485中提出的序列。
39· -種微粒，包括權利要求38所述的分離的多肽。
【文檔編號】C07K16/00GK104203092SQ201280051213
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2012年8月23日 優先權日:2011年8月26日
【發明者】埃雷茲·阿哈龍·利夫內 申請人:維科納米醫藥有限公司