一種提取藤黃中藤黃酸和新藤黃酸的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種提取中藥藤黃中藤黃酸和新藤黃酸的方法。
【背景技術】
[0002]藤黃為藤黃科植物藤黃(Garcinia hanburyi Hook f.)的樹干被割傷后流出的膠狀樹脂，干燥后呈黃棕色圓柱狀或不規則塊狀物，質脆易碎，原產東南亞，我國部分地區如云南、廣西、廣東等地有引種栽培。藤黃中含有藤黃酸(Gambogic acid)、新藤黃酸(Neomogenic acid)、別藤黃酸(Allogambogic acid)等多種成分。在中醫臨床實踐中，藤黃主要用于治療癰疽腫毒、潰瘍、濕瘡、腫瘤、頑癬等病癥。現代藥理研宄表明，藤黃酸對多種腫瘤細胞具有較強的抑制作用，并在有效劑量范圍內毒副作用較小，對腫瘤細胞的抑制具有較高的選擇性，而對正常動物造血系統和免疫功能沒有影響。有研宄表明新藤黃酸的抗腫瘤活性約為藤黃酸的2倍，有望開發為新型抗腫瘤藥物。
[0003]現有技術中，CN101781309A中公開了一種采用超臨界流體提取中藥藤黃中藤黃酸和新藤黃酸的方法。但該方法需嚴格調控釜內壓力，很難適應工業化生產的需求。CN101921283A公開了一種將粉碎后的藤黃與硅膠、硅藻土、石英粉或聚丙烯酰胺之一混合裝入柱層析，經甲醇、乙酸乙酯等溶劑洗脫得到藤黃酸初提物的藤黃酸提取方法。林青華等采用硅膠柱層析與制備液相色譜法相結合來制備新藤黃酸，具有有機溶劑使用少、避免反復層析的高成本和死吸附造成的產量損失、產品純度能達到化學對照品質量要求的優點(中醫藥學報，新藤黃酸制備液相分離方法，林青華，張劍，李廣雷等，Vol.42，N0.3，Jun.2014，P71-72)。但上述兩種方法均是僅適合分離出藤黃酸或新藤黃酸一種有效成分，對其余的活性成分造成浪費。
[0004]微波提取是利用不同結構的物質在微波場中吸收微波能力的差異，使物質中的某些區域或提取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使被提取物從物質或體系中分離，進入介電常數較小、微波吸收能力相對差的提取劑中。這種方法的優點是對提取物具有較高的選擇性、提取率高、提取速度快、溶劑用量少、安全、節能、設備簡單。
【發明內容】
[0005]本發明旨在提供一種能夠高效地從中藥藤黃中提取分離藤黃酸與新藤黃酸的方法。
[0006]本發明所述的從藤黃中提取藤黃酸與新藤黃酸的方法，包括以下步驟:
(1)將干燥的藤黃粉碎，過40?80目篩，置于微波合成萃取儀中進行提取，加入乙醇回流提取；
(2)過濾出提取液，減壓濃縮回收溶劑后得到浸膏A;
(3)向浸膏A中加入石油醚淋洗，之后用乙醇進行溶解，過濾，濾液進入模擬移動床色譜進行分離，得到富含藤黃酸的組分B和含有藤黃酸、新藤黃酸的組分C ;
(4)回收溶劑，減壓干燥得到純度95%以上的藤黃酸及純度10%?20%的藤黃酸與純度30%?50%的新藤黃酸混合物兩種規格的產品。
[0007]本發明所述步驟(I)中，提取時，微波功率200W?400W，微波加熱溫度30°C?70°C，微波提取時間60s?300S，加入的乙醇溶劑與原料固液比為10:1?20:1。
[0008]本發明所述步驟(3)中，模擬移動床色譜填充的吸附劑為弱極性大孔吸附樹脂，水洗區為純化水，解吸劑為20?50%乙醇，其用量為樹脂體積的I?3倍；樹脂吸附再生溶劑為95%乙醇或2?4%氫氧化鈉水溶液；吸附區流速I?2BV/h ;水洗區流速I?3BV/h ；解吸區流速I?3BV/h ;再生區流速2?3BV/h ;切換時間為600?900s ;溫度控制在40°C?600C ;壓力控制在0.2MPa?0.6MPa。
[0009]進一步地，本發明所述步驟(I)中，微波加熱溫度50°C?70°C，微波提取時間10s?200S，加入的乙醇溶劑與原料的液固比為15:1?20:1。
[0010]進一步地，本發明所述步驟(3)中，模擬移動床色譜的切換時間優選700?800s ；模擬移動床色譜填充的吸附劑為AB-8或DM130 ;解吸劑用量優選為樹脂體積的3倍。
[0011]雖然模擬移動床技術可以應用于天然產物或藥物的分離提純已在本領域中有共識，但因模擬移動床大的結構特點是將化工中的連續、逆流、精餾、回流等要素都集中進了系統，它是一個多自由度、動態、相互關聯的非線性系統。因此，對于它的預測、優化與控制是較復雜的問題，尤其是針對某一天然產物品種，分離參數的預測是一個十分復雜的問題。已見報道的微波輔助提取主要應用于提取生物堿類、蒽醌類、黃酮類、皂苷類、多糖、揮發油、色素等中藥成分。但具體到藤黃中有效成分的提取，微波輔助提取是否適應，以及其相關工藝參數的確定仍是一個復雜的過程。
[0012]本發明所述的中藥藤黃有效成分提取方法，采用微波輔助提取和模擬移動床色譜法分離提純結合的工藝，確定了相關工藝參數，步驟簡單，產品純度較高，可以同時得到兩種規格的藤黃酸與新藤黃酸產物，將原料中的有效成分充分提取分離，節約了原料資源的同時也提高了生產效率。
【具體實施方式】
[0013]實施例1
將200g干燥的藤黃樹脂(藤黃酸含量31.28%，新藤黃酸含量12.34%)粉碎后過40目篩，以固液比1:20加入提取溶劑無水乙醇，在功率250W、溫度50°C條件下微波提取2min。過濾出提取液，減壓濃縮回收溶劑后得到浸膏A ;向浸膏A中加入適量石油醚淋洗，再加入95%乙醇進行溶解，過濾，濾液進入模擬移動床色譜進行分離。吸附劑為AB-8大孔吸附樹月旨，解吸劑為25%乙醇水溶液，其用量為樹脂體積的3倍，水洗區為純化水，樹脂吸附再生溶劑為95%乙醇，吸附區流速2BV/h，解吸區流速3BV/h，水洗區流速3BV/h，再生區流速3BV/h，切換時間為700s，溫度50°C，壓力0.5MPa?分離得到富含藤黃酸的組分B和含有藤黃酸、新藤黃酸的組分C。將組分B和C分別回收溶劑，減壓干燥，分別得到藤黃酸含量96.1%的產品33.3g和藤黃酸含量13.4%、新藤黃酸含量48.2%的產品15.9g。
[0014]實施例2
將500g干燥的藤黃樹脂(藤黃酸含量31.28%，新藤黃酸含量12.34%)粉碎后過80目篩，以固液比1:15加入提取溶劑無水乙醇，在功率300W、溫度70°C條件下微波提取2.5min。過濾出提取液，減壓濃縮回收溶劑后得到浸膏A ;向浸膏A中加入適量石油醚淋洗，再加入95%乙醇進行溶解，過濾，濾液進入模擬移動床色譜進行分離。吸附劑為DM130大孔吸附樹月旨，解吸劑為30%乙醇水溶液，其用量為樹脂體積的3倍，水洗區為純化水，樹脂吸附再生溶劑為95%乙醇，吸附區流速2BV/h，解吸區流速3BV/h，水洗區流速3BV/h，再生區流速3BV/h，切換時間為750s，溫度50°C，壓力0.5MPa?分離得到富含藤黃酸的組分B和含有藤黃酸、新藤黃酸的組分C。將組分B和C分別回收溶劑，減壓干燥，分別得到藤黃酸含量95.8%的產品82.9g和藤黃酸含量11.2%、新藤黃酸含量44.6%的產品44.3g。
[0015]實施例3
將600g干燥的藤黃樹脂(藤黃酸含量31.28%，新藤黃酸含量12.34%)粉碎后過60目篩，以固液比1:20加入提取溶劑無水乙醇，在功率250W、溫度70°C條件下微波提取3min。過濾出提取液，減壓濃縮回收溶劑后得到浸膏A ;向浸膏A中加入適量石油醚淋洗，再加入95%乙醇進行溶解，過濾，濾液進入模擬移動床色譜進行分離。吸附劑為AB-8大孔吸附樹月旨，解吸劑為30%乙醇水溶液，其用量為樹脂體積的3倍，水洗區為純化水，樹脂吸附再生溶劑為95%乙醇，吸附區流速2BV/h，解吸區流速3BV/h，水洗區流速3BV/h，再生區流速3BV/h，切換時間為750s，溫度50°C，壓力0.5MPa?分離得到富含藤黃酸的組分B和含有藤黃酸、新藤黃酸的組分C。將組分B和C分別回收溶劑，減壓干燥，分別得到藤黃酸含量96.4%的產品98.3g和藤黃酸含量12.6%、新藤黃酸含量45.2%的產品52.lg。
【主權項】
1.一種從藤黃中提取藤黃酸和新藤黃酸的方法，其特征在于包括以下步驟: (1)將干燥的藤黃粉碎，過40?80目篩，置于微波合成萃取儀中進行提取，加入乙醇回流提取；提取時，微波功率200W?400W，微波加熱溫度30°C?70°C，微波提取時間60s?300S，加入的乙醇溶劑與原料固液比為10:1?20:1 ； (2)過濾出提取液，減壓濃縮回收溶劑后得到浸膏A; (3)向浸膏A中加入石油醚淋洗，之后用乙醇進行溶解，過濾，濾液進入模擬移動床色譜進行分離，得到富含藤黃酸的組分B和含有藤黃酸、藤黃酸的組分C ;模擬移動床色譜填充的吸附劑為弱極性大孔吸附樹脂，水洗區為純化水，解吸劑為20?50%乙醇，其用量為樹脂體積的I?3倍；樹脂吸附再生溶劑為95%乙醇或2?4%氫氧化鈉水溶液；吸附區流速I?2BV/h ;水洗區流速I?3BV/h ;解吸區流速I?3BV/h ;再生區流速2?3BV/h ;切換時間為600?900s ;溫度控制在40°C~ 600C ;壓力控制在0.2MPa?0.6MPa ； (4)回收溶劑，減壓干燥得到純度95%以上的藤黃酸及純度10%?20%的藤黃酸與純度30%?50%的新藤黃酸混合物兩種規格的產品。
2.如權利要求1所述的一種從藤黃中提取藤黃酸和新藤黃酸的方法，其特征在于:本發明所述步驟(I)中，微波加熱溫度50°C?70°C，微波提取時間10s?200S，加入的乙醇溶劑與原料的液固比為15:1?20:1。
3.如權利要求1或2所述的一種從藤黃中提取藤黃酸和新藤黃酸的方法，其特征在于:所述步驟(3)中，模擬移動床色譜的切換時間優選700?800s。
4.如權利要求1-3中任一項所述的一種從藤黃中提取藤黃酸和新藤黃酸的方法，其特征在于:所述步驟(3)中，模擬移動床色譜填充的吸附劑為AB-8或DM130。
5.如權利要求4中任一項所述的一種從藤黃中提取藤黃酸和新藤黃酸的方法，其特征在于:所述步驟(3)中，解吸劑用量為樹脂體積的3倍。
【專利摘要】本發明旨在提供一種能夠高效地從中藥藤黃中提取分離藤黃酸與新藤黃酸的方法，包括以下步驟：將藤黃粉碎微波提取，濃縮得浸膏A；加入石油醚淋洗，乙醇溶解過濾，經模擬移動床色譜分離，得到富含藤黃酸的組分B和含有藤黃酸、新藤黃酸的組分C；回收溶劑干燥得純度95%以上的藤黃酸及純度10%～20%的藤黃酸與純度30%～50%的新藤黃酸混合物兩種規格的產品。本發明所述的中藥藤黃有效成分提取方法步驟簡單，產品純度較高，可以同時得到兩種規格的藤黃酸與新藤黃酸產物，將原料中的有效成分充分提取分離，節約了原料資源的同時也提高了生產效率。
【IPC分類】C07D493-20
【公開號】CN104610273
【申請號】CN201510077377
【發明人】梁玉強, 白易, 高瑞, 趙永強, 張成亮
【申請人】白心亮
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年2月13日