專利名稱：一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取及含量測定方法
技術領域：
本發明涉及中藥藥用物質提取及含量檢測，具體涉及到一種超聲輔助提取藤黃中藤黃總酸的方法，以及該藤黃總酸的含量測定方法。
背景技術：
藤黃系藤黃科(Gittiferae)植物(GarciniahanburyiHook · f ·)所分泌的干燥樹脂，呈圓柱狀或不規則塊狀物，黃棕色，質脆易碎。據我國古代醫書記載，藤黃味酸澀、有毒、具有攻毒蝕瘡、破血散結等功效，主治癰疽、腫毒、頑癬、惡瘡，酸性成分為藤黃樹脂中主要活性成分。中藥藤黃提取物體對小鼠腹水型肝癌、艾氏腹水癌、肉瘤S180、S37、 Walk256、MA-737、人肝癌Bel - 7402、SMMC - 7721、宮頸癌U14 ,Hela細胞株等有顯著抑殺作用，能通過多種機制發揮抗腫瘤作用，試用于臨床上治療乳腺癌77例皮膚癌13例，獲一定療效。提取藤黃總酸的方法主要有浸潰法、加熱回流法、超臨界C02萃取法等。申請號為02128822.4的中國發明專利公開了三種總藤黃酸的制備方法，方法中分別使用こ醚、石油醚和吡啶作為提取溶劑，回流提取了總藤黃酸，方法中反復使用多種有機溶劑進行處理，操作復雜，提取時間長，生產效率低，易造成環境污染，超臨界C02萃取法提取藤黃總酸對儀器設備要求高，成本高，同時也浪費生藥資源。目前藤黃酸類化合物的分析方法主要有比色法、波層色譜法、高效液相色譜法等。《中國藥師》2002，5 (12) =731-732報道了采用ニ氯氧鋯(ZrOCl2)顯色后比色法測定藤黃總酸含量，然而采用該法時顯色反應易受溫度和光照等諸多因素影響，從而造成重現性不理想(藥學進展，2011，35 (8):337-344)。薄層色譜法和高效液相色譜法在測定藤黃總酸時往往只能針對ー種或幾種指標性成分定量，不能反映藤黃總酸的含量，須有相應對照品，且設備昂貴，不容易普及。
發明內容
本發明提供一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取及含量測定方法，以解決背景技術中的問題。一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取方法，包括以下步驟
(I )、原料的制備取藤黃藥材所分泌出的干燥樹脂，粉碎，過40目篩，得原料粗粉待
用；
(2)、提取在室溫下，將步驟(I)細粉加入5-20倍量的50%-100%こ醇溶液進行混合，將混合液在水浴下超聲強化提取，提取頻率為20-70khz，提取溫度為20-60°C，超聲提取時間為5-20分鐘；
(3)、收集步驟2提取液，過濾，取濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥得到藤黃總酸粉末。一種藤黃藥材中藤黃總酸的含量測定方法，包括以下步驟(I )、精密稱取一定量藤黃藥材或藤黃提取物，置容量瓶中，加入一定量こ醇溶液，超聲溶解，定容置刻度，搖勻，稀釋至一定倍數，即得樣品溶液；
(2)、精密取藤黃酸對照品，用こ醇超聲溶解并定容，用こ醇稀釋至刻度，搖勻，即得藤黃酸對照品溶液；
(3)、取步驟(I)中供試品液，步驟(2)作為對照品液，在紫外分光光度計測定吸光度，計算樣品中藤黃總酸含量。在本發明中，紫外分光光度法檢測藤黃總酸所用的溶劑可為甲醇、こ醇、こ腈、堿性水溶液一種或幾種，檢測波長可在250nm±5nm或360nm±5nm處。有益效果
本發明有以下優點
1、提取方法克服了常規溶劑提取時間長，溶劑消耗量大等缺點，具有提取時間短、產率高等優點；而且超聲提取是ー個物理過程，其間無化學反應，減少了生物活性物質的改變，節省能源，所用提取溶劑對環境友好；
2、采用紫外檢測總藤黃酸含量結果準確，針對性強，加樣回收試驗表明，本檢測方法平均回收率達98. 2%, RSD為I. 58% ；
3、精密度良好。精密稱取ー批藤黃藥材粉末高、中、低量分別于容量瓶中，加こ醇定容，稀釋至一定濃度后，分別測藤黃藥材及藤黃對照品的低、中、高3個質量濃度溶液吸光度， 各自連續測三次，結果表明精密度小于O. 39%，精密度良好；
4、重復性好。精密稱取6組藤黃藥材粉末，精密稱定。制備樣品溶液，測定吸光度，計算藤黃總酸含量，得出RSD%=1. 6%..說明該方法重復性好；
5、穩定性良好，精密量取樣品溶液，每隔ー個小時測定其吸光度，總共測6次，結果表明，樣品在6小時內吸光度基本沒有變化，RSD=L 1%，說明該方法穩定性良好；
6、本發明采用超聲技術提取藤黃總酸，エ藝流程簡單，操作容易控制，有效縮短提取時間；采用紫外分光光度法檢測藤黃總酸含量可用于藤黃藥材或提取物的質量控制。
具體實施例方式為了使本發明的技術手段、創作特征、工作流程、使用方法達成目的與功效易于明白了解，下面結合具體實施例，進ー步闡述本發明。具體步驟為
I、精密稱取取藤黃藥材細粉50g，加入5-20倍重量的濃度為50%-100%こ醇水 溶液進行混合。2、將混合液在水浴下超聲強化提取，提取頻率為20_70khz，提取溫度為20_60°C， 超聲提取時間為5-20分鐘。3、收集步驟2提取液，過濾，取濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥 得到藤黃總酸粉末。以上步驟即為提取藤黃中藤黃總酸的步驟。4、用紫外分光光度法測定藤黃原料藥、提取物中藤黃總酸的含量。其中紫外分光光度法測定藤黃總酸含量的具體步驟為精密稱取一定量藤黃 藥材或藤黃提取物15mg，置50ml容量瓶中，加入一定量こ醇溶液定容至刻度，
超聲溶解，定容置刻度，搖勻，精密取I. Oml溶液置IOml容量瓶中，加こ醇至刻度作為供試品溶液。精密稱取藤黃酸對照品6.63mg，置于25mL容量瓶中，加甲醇定容，精密移取IOmL至IOOmL容量瓶中，加甲醇定容，制成濃度為26. 52 μ g/ml對照品溶液。精密移取上去對照品溶液2、4、6、8ml分別于IOml容量瓶中，加こ醇定容。以こ醇溶液為空白對照，在360nm處測定對照品溶液的吸光度，以藤黃酸的濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程。表I對照品溶液標準曲線數值表
權利要求
1.一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取方法，其特征在于，包括以下步驟 (I )、原料的制備取藤黃藥材所分泌出的干燥樹脂，粉碎，過40目篩，得原料粗粉待用； (2)、提取在室溫下，將步驟(I)細粉加入5-20倍量的50%-100%こ醇溶液進行混合，將混合液在水浴下超聲強化提取，提取頻率為20-70khz，提取溫度為20-60°C，超聲提取時間為5-20分鐘； (3)、收集步驟2提取液，過濾，取濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥得到藤黃總酸粉末。
2.一種藤黃藥材中藤黃總酸的含量測定方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)、精密稱取一定量藤黃藥材或藤黃提取物，置容量瓶中，加入一定量こ醇溶液，超聲溶解，定容置刻度，搖勻，稀釋至一定倍數，即得樣品溶液； (2)、精密取藤黃酸對照品，用こ醇超聲溶解并定容，用こ醇稀釋至刻度，搖勻，即得藤黃酸對照品溶液； (3)、取步驟(I)中供試品液，步驟(2)作為對照品液，在紫外分光光度計測定吸光度，計算樣品中藤黃總酸含量。
3.根據權利要求2所述的ー種藤黃藥材中藤黃總酸的含量測定方法，其特征在于，紫外分光光度法檢測藤黃總酸所用的溶劑可為甲醇、こ醇、こ腈、堿性水溶液ー種或幾種，檢測波長可在250nm±5nm或360nm±5nm處。
全文摘要
本發明提供了一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取方法及含量測定方法，將藤黃藥材烘干，粉碎后過40目篩，稱取粗粉，與50%-100%乙醇溶液按液料比為5:1~20:1進行混合，在溫度為20~60℃、提取頻率為20-70kHz下提取5~20分鐘得到藤黃總酸提取液，過濾，濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥得到藤黃總酸粉末；采用紫外分光光度法檢測藤黃藥材及提取物中藤黃總酸含量。本發明提取工藝流程簡單，操作容易控制，有效縮短提取時間；紫外分光光度法檢測重復性好、操作簡單、準確度高，可用于藤黃藥材或提取物的質量控制。
文檔編號A61P35/00GK102688268SQ20121020272
公開日2012年9月26日 申請日期2012年6月19日 優先權日2012年6月19日
發明者周安, 彭代銀, 李慶林, 李翔, 王效山, 胡海霞 申請人:彭代銀