eq)和S氣甲 橫酸甲醋（MeOTf) (0. 11ml ;2eq)。將反應介質在85°C下攬拌一夜，然后在娃藻±上 過濾。添加水，將產物用AcOEt萃取。將有機相干燥（Na2S04)然后在真空下蒸發。將殘余 物通過色譜法在硅膠上純化（洗脫液：環己燒/AcOEtl/0-95/5)然后用丙酬研磨W獲得白 色固體狀3P-(對甲氧基節氧基）-17a-甲基-孕締醇酬（80mg;35% )。
[0296]
陽297] 3目-(對甲氣基韋氣基）-17g-韋基-孕備醇刪的合成連施例
[029引 17a-芐基-孕締醇酬按如上所述合成。
[0299] 向17a-芐基-孕締醇酬（1. 9g;4. 66mmol;leq.)的無水甲苯（45ml)溶液中連 續添加Mg0(373mg;9. 3mmol;2eq. )、2-(4-甲氧基節氧基）-4-甲基哇嘟（2. 6g;9. 33mmol; 2eq)和S氣甲橫酸甲醋（MeOTf) (1. 06ml;9. 33mmol;2eq)。將反應介質在40°C下攬拌一夜， 然后在娃藻±上過濾。添加水，將產物用AcOEt萃取。將有機相干燥（Na2S〇4)然后在真空 下蒸發。將殘余物通過色譜法在硅膠上純化（洗脫液：環己燒/AcOEt9/1)然后用丙酬研 磨W獲得白色固體狀3P-(對甲氧基節氧基）-17a-芐基-孕締醇酬（1.18g;49% )。
[0300]
陽30。 B.孕備醇刪祈牛物不被轉化為祈牛自孕備醇刪的其化活忡類固醇的能力
[030引 材料巧方法 陽30引 代謝的體外測試
[0304] 可選擇地，可向表達代謝培養物中的孕締醇酬的酶的任何細胞系施用所述化合 物，然后在細胞內或細胞培養基上通過GC/MS測量孕締醇酬代謝物的含量并將運些濃度與 僅接受載體或孕締醇酬的細胞培養物中代謝物的濃度進行比較。
[0305] 在該實施例中，使用CK)細胞系。運些細胞源自具有需要在下游類固醇中代謝孕 締醇酬的所有酶的卵巢。
[0306] 通過GC/MS測量C冊培養基中別孕締醇酬（A化0)、表別孕締醇酬巧PIALL0)、孕締 醇酬（PREG)、DHEA和睪酬燈EST0)的含量。
[0307]結果 陽30引 下游活忡類固醇中的體外轉化被限制的孕備醇刪祈牛物。
[0309] 本發明人利用CK)細胞中的體外測試分析了孕締醇酬衍生物的代謝。
[0310] 向運些細胞施用孕締醇酬（1yM)48小時在培養基中產生了別孕締醇酬和表別孕 締醇酬的明顯增加（表1)。
[0311]
[0312]表 1
[0313] 利用CK)細胞中的體外測試來測試C3被節氧基取代的孕締醇酬衍生物。
[0314] 結果顯示于下表2。結果表示為由用孕締醇酬處理的CM)細胞的變化百分比或表 示為pg/ml(0 =濃度低于檢測極限）。
[031 引
[0引引表2
[0317]如表2所示，化合物68, 3 0 -(對甲氧基節氧基）-17a-甲基-孕締醇酬，不在孕 締醇酬中代謝，和化合物63和41不在孕締醇酬中明顯代謝（代謝<1 % )。包含3-節氧基 功能（取代或非取代）的孕締醇酬衍生物不顯示可檢測的孕締醇酬衍生物DHEA和睪酬的 代謝W及顯示別孕締醇酬和表別孕締醇酬的極低代謝。運些結果表明C3中OBn-R基團的 存在避免了孕締醇酬衍生物轉化為孕締醇酬和孕締醇酬衍生物，特別是其孕締醇酬是前體 且具有促妊娠、產生雄性征、雌激素、糖皮質激素的活性或神經調節性質的代謝物。
[031引 參考文獻
[0319] 遍及本申請，多個參考文件描述了本發明所屬的領域的現狀。因此運些參考文件 的公開通過引用引入本公開。
[0320]AirdRB.Theeffectofdesoxycorticosteroneinepilepsy.TheJournalof NervousandMentalDisorders. 1944 ;99:501 - 510.
[0321]AirdRB,GordanGS.Anticonvulsivepropertiesofdesoxycorticosterone. JournaloftheAmericanMedicalAssociation. 1951 ; 145:715 - 719
[0322]BaulieuEE(1991)Neurosteroids:Anewfunctioninthebrain.BiolCell 71:3-10.
[032引 FalkensteinE,TillmannHC,QiristM,FeuringMandWehlingM.Multiple actionsofsteroidhormones-afocusonrapid,nongenomiceffects.Pharmacol Rev. 2000Dec;52 (4) : 513-56.
[0324]Garcla-EstradaJ,Luqul打S,FernandezAM,Garcia-SeguraLM.Dehydroepiandr osterone，pregnenolone and sex steroids down-regulate reactive astroglia in the male rat brain after a penetrating brain injury. Int J Dev Neurosci.1999 Apr ; 17巧）：145-51.
[032引 Gasior M,Carter RB,Witkin JM.Neuroactive steroids:potential therapeutic use in neurological and psychiatric disorders.Trends Pharmacol Sci. 1999 Mar ;20 (3) : 107-12. Review.
[0326]Giannis A.，HeretschP.，Sarli V. andS巧校elA.，?Synthesis of Cyclopamine Using a Biomimetic and Diastereoselective Approach. Angew Chem Int Ed Engl. 2009, 48 (42) ,7911-7914.
[0327] Glazier, E.民..Bromination with Cupric Bromide. II. 1，2Bromination in the F*resence of an Olefinic Bond ;J.0rg.Qiem. 1962, 27, 4397 - 4399.
[0328] Gursoy E, Cardoune 1 A, Kalimi M. Pregnenolone protects mouse hippocampal(HT-22) cells against glutamate and amyloid beta protein toxicity. Neurochem Res. 2001 Jan ;26(1): 15-21.
[0329] Green CJ, Halsey MJ, Precious S, Wardle廠Smith B.Alphaxolone-alphadolone anesthesia in laboratory animals. Laboratory Animals. 1978 ; 12:85 - 89.
[0330] Gyermek L,Genther G,Fleming N. Some effects of progesterone and related steroids on the central nervous system. International Journal of Neuropharmacology. 1967 ;6:191 - 198.
[0331] Jones E. R?比and WilsonD.A.，S化dies in化e steroid group. Part LXXVI. The methylation of enol acetates and bromo-ketones. Nuclear magnetic resonance spectra of ll-ket〇-steroids. J. Qiem. Soc.，1965, 2933-2944.
[033引Lambert JJ,BelelliD,PedenDR,Vardy AW,Peters JA. Neurosteroid modulation of GABAA receptors. Progress in Neurobiology. 2003 ;71:67 - 80.
[033引 Majewska MD, Harrison NL, Schwartz RD, Barker JL and Paul SM Steroid hormone metabolites are barbiturate-1ike modulators of the GABA receptor. Science (Wash DC) (1986)232:1004 - 1007.
[0334] Marshall C. W. , Kritchevsky T. H. , Lieberman S. , and Gallagher T. F. Preparation of 17-Ketosteroids from Enol Acetates of 20-Ketosteroids. J. Am. Qiem. Soc.，1948, 70巧），pp 1837 - 1839
[0335] Mathis C,Paul SM, Crawley JN. The neurosteroid pregnenolone sulfate blocks NMDA antagonist-induced deficits in a passive avoidance memory task. Psychopharmacology化erl). 1994 Oct ; 116(2):201-6.
[0336] Nwoye, E. 0. and Dudley, G. B. A method for the synthesis of para-methoxybenzyl (PMB)ethers under effectively neutral conditions. Chem. Commun. 2007, 1436-1437.
[0337] Paul SM, Purdy畑?Neuroactive steroids FA沈B J. 1992Mar ;6巧）：2311-22. Review.
[033引 Poon KWC. and Dudley G. B.，Mix-and-Heat Benzylation of Alcohols Using a Bench-Stable Pyridini