從柑橘皮、果中提取橙皮苷和新橙皮苷的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物提取領域，尤其是一種從柑橘皮、果中提取黃酮的方法。
【背景技術】
[0002]柑橘是蕓香科柑橘屬重要的植物，主要是利用其果肉而很少對效果和果皮進行綜合利用，大多數被當作廢物填埋處理。由于柑橘果、皮含有較多生物活性物質，因此對其的利用已經越來越廣泛。橙皮苷(Hesperidin)是柑橘果皮中的天然黃酮類化合物，采用堿浸酸析法從臍橙中提取出的橙皮苷純度為80.3%，得率為1.55%。新橙皮苷(Neohesperidin)是由橙皮素與新橙皮糖形成的糖苷，目前提取新橙皮苷的方法包括超聲輔助提取法、索氏提取法、和水浴回流提取法。辛弗林(Synephrine)是枳實生物堿類物質的主要成分，辛弗林的含量隨著柑橘果實的成熟而減少，因此一般選取未成熟的果實即落果來作為提取原料；辛弗林的提取方法有加熱回流法、超聲提取法和微波提取法。
【發明內容】
[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種高效從枳實小果和柑橘皮混合物中同時提取分離橙皮苷、新橙皮苷的方法，將柑橘皮和枳實小果干燥、粉碎，按1:1比例混合后，用水滲漉提取；然后取藥渣進行橙皮苷提取，橙皮苷含量可達98%以上，收率為6.0%以上；取滲漉液進行新橙皮苷提取，得到新橙皮苷提取物含量達90%以上，收率為2.0%以上。為了解決該技術問題，本專利具體實施步驟如下:
一、柑橘皮、苦橙枳實小果前處理
收集柑橘皮、干燥、粉碎，過篩，備用；收集枳實小果干燥、粉碎，過篩，備用。將柑橘皮粉和枳實小果粉按質量比1:1比例混合，置于提取罐中，按料液比1:(10-30)的比例，用30%-50%的乙醇水溶液進行滲漉提取，控制溫度40-45°C，滲漉提取10_12h ;過濾；然后往濾液中添加0.01-0.1%的果膠酶，50 °C下攪拌30min，然后將溫度調到70 °C，處理15_30min，將果膠酶殺滅；然后過濾，將藥渣和濾液分離；藥渣用于橙皮苷提取，濾液用于新橙皮苷提取。
[0004]所述過篩的篩網為10目、或者60目、或者100目；
所述滲漉提取可以進行3次。
[0005]二、橙皮苷提取、分離、純化
將上述藥渣用pH值為10.0-11.0堿液浸泡，進行提取；所得提取液用HC1調至pH值為2.0-3.0，放置，沉淀；將沉淀用水洗滌至中性，以料液比1: (50-60)g/mL加入甲醇，用稀NaOH溶液調體系pH為10.0-11.0，30°C下反應30min，常壓過濾，再用稀鹽酸調濾液pH為3.0-5.0，在15°(:以下靜置1211重結晶；重結晶后的晶體即為橙皮苷產品。該產品中橙皮苷含量可達98.0%，橙皮苷收率為6.0%以上。
[0006]
所述堿液為NaOH或者Ca (0H)2。
[0007]所述結晶和重結晶，溫度要控制在15°C以下，以確保橙皮苷收率和純度。
[0008]三、新橙皮苷提取、分離、純化
取步驟一所述的濾液過強酸性苯乙烯型陽離子柱，收集離子柱流出液，然后用水洗。將離子柱流出液和水洗液混合，進大孔吸附樹脂，經水洗后，先用20%低碳醇洗滌，再用65%低碳醇洗脫，將洗脫液濃縮，在15°C以下放置，用(NH4)2S04/NaCl助析，得新橙皮苷粗品；將新橙皮苷粗品用水洗滌至中性，以料液比1: (50-60) g/mL加入甲醇，用稀NaOH溶液調體系pH為10.0-11.0，30°C下反應30min，常壓過濾，再用稀鹽酸調濾液pH為3.0，在15°C以下靜置12h重結晶；析出類白色針狀晶體；抽濾，烘干，得新橙皮苷；用HPLC檢測，該產品中橙皮苷含量可達90.0%以上，橙皮苷收率為2.0%以上。
[0009]所述強酸性苯乙烯型陽離子柱優選001X7陽離子柱；
所述大孔吸附樹脂優選D101 ;
所述結晶和重結晶，溫度要控制在15°C以下，以確保新橙皮苷收率和純度。
[0010]所述的滲漉、提取、酶解、過濾、層析吸附、洗脫、結晶、重結晶都為已知技術。
[0011]本發明具有下列優點和特性:
1、綜合利用資源
將枳實小果和柑橘皮按1:1比例混合進行滲漉提取，提取后的藥渣中提取橙皮苷，濾液中提取新橙皮苷，實現了橙皮苷、新橙皮苷同步綜合提取。
[0012]2、組合技術新穎
通過本技術方案，將枳實小果、柑橘皮粉碎物按質量比1:1比例混合，按料液比滲漉提取后，從藥渣中提取橙皮苷，從濾液中提取新橙皮苷，得到橙皮苷含量可達98.0%以上，收率為6.0%以上；得到新橙皮苷提取物含量可達90%以上，新橙皮苷收率為2.0%以上。尤其是橙皮苷和新橙皮苷提取同步提取，是利用滲漉濾液，新橙皮苷采用先陽離子層析柱，再D101大孔樹脂柱，然后采用20%低碳醇洗滌，再用65%低碳醇洗脫，取65%低碳醇洗脫液濃縮，用濃縮液質量5%的(NH4)2S04/NaCl助析，結晶；將粗晶用甲醇溶解，經重結晶得到產品。所有結晶和重結晶步驟都是在15°C以下進行。這些技術特征組合在一起，橙皮苷和新橙皮苷提取物在含量和收率2個指標上產生了意想不到的效果。這些結果是技術組合方案種各技術特點互相支持、共同作用才實現的，已知技術沒有報道，也沒有該組合技術方案的技術啟示，不是簡單的疊加，具有突出的實質性特點和顯著的進步。
【具體實施方式】
[0013]以下所述實例詳細地說明了本發明。
[0014]實施例1 前處理
將苦橙第三次生理落果的枳實小果作為提取原料，干燥，用高速多功能粉碎機粉碎，取粉碎物過10目的篩，備用。將苦橙皮干燥，粉碎，過10目篩，備用。準確稱取枳實小果粉碎物25.0g和苦橙皮粉碎物25.0g置于燒杯中，加入500mL 30%乙醇水溶液，放入水浴鍋中44°C下浸泡水浴提取10h，過濾，得提取液。往提取液中加入0.5g果膠酶處理，50°C下攪拌30min，然后將水浴鍋調至70°C，處理30min，將果膠酶充分滅活。待其冷卻后在紗布輔助下，用雙層濾紙抽濾，得濾液和濾渣，濾渣用于提取橙皮苷，濾液用于提取新橙皮苷。
[0015]橙皮苷提取
取上述濾渣100g，加2000ml的水，30°C下邊攪拌邊加入1.75g Ca (0H) 2，攪拌0.5h后