一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆甾醇的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明公開了一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆留醇的制備方法，屬于留醇制造領域。
【背景技術】
[0002]留醇，是從玉米、大豆中經過物理提純而得，具有營養價值高、生理活性強等特點。植物留醇可通過降低膽固醇減少心血管病的風險。其廣泛應用在食品、醫藥、化妝品、動物生長劑及紙張加工、印刷、紡織等領域，特別是在歐洲作為食品添加劑非常普遍。植物甾醇主要存在于植物油脂部分中，可以利用原料組成及理化特性方面的差異，提取植物留醇類物質。常見的提取方法有:溶劑結晶法、皂化法、絡合法、酶法、超臨界co2萃取法、微波輔助提取法及超聲輔助提取法等。
[0003]植物留醇具有降低膽固醇、消炎、退熱、抗潰瘍、抗腫瘤及抑菌等作用。植物留醇是一種結構和生化特性與膽固醇相似的留醇類物質。這種“類脂肪”廣泛存在于植物的根、莖、葉和果實中，在人體內不能合成，唯一的途徑是通過膳食攝取。其廣泛應用于醫學、工業、日化、農業，是一種多用途純天然的物質。
[0004]目前留醇及其衍生物在食品中的應用多集中于食用油、黃油、人造奶油、肉制品等脂溶性食品中，主要是由于植物留醇具有一定的油溶性，并且絕大多數植物留醇衍生物改善的是植物留醇的親油性，而植物留醇的水不溶性，導致其在水基質食品，應用還受到很大限制，因此，改善植物留醇的水溶性非常必要。
【發明內容】
[0005]本發明主要解決的技術問題:針對目前植物留醇的水不溶性和低油溶性，導致其在水基質食品，應用還受到很大限制，而且化學改性催化劑毒性較大，對環境污染大，反應溫度高，反應副產物多的問題，提供了一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆留醇的制備方法，本發明從大豆中用微波法提取留醇，并制得催化劑，將留醇和琥珀酸酐進行酯化反應，再用富含氨基酸的魚子醬進行酯化產物進行改性，即可得到水溶性好的留醇，本發明的改性大豆甾醇由于含有親水性基團而改善了原本豆留醇的水不溶性，可以應用在水基質的食品中，而且改性反應中加入的催化劑綠色無污染，反應副產物少，制備成本低廉。
[0006]為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是:
1.(1)取300?500g大豆油加工脫臭餾出物，按固液比為3:1向流出物中加入甲醋化試劑，放入微波提取儀中，以600W的功率在0.2?0.3MPa的壓力下微波輔助甲醋化反應2?3min后，放入冰箱中，設置溫度為4?6°C，冰析結晶5?6h后過濾得粗大豆甾醇；
2.(2)稱取30?35g上述制得的粗大豆甾醇連同100?150mL環己酮一起倒入250mL燒杯中，移入水浴鍋中加熱至55?65°C，放置在高速攪拌機上，以800?900r/min的轉速攪拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷卻至室溫并過得到濾餅，再將濾餅按上述步驟反復操作3?5次后放入烘箱中干燥至恒重，備用； 3.(3)取3?5g十二烷基硫酸鈉放入研缽中，加入其體積2?3倍的濃度為0.0lmol/L的鹽酸溶液，在通風櫥中研磨3?5min后放入馬弗爐，在300?400°C下煅燒1?2h制得十二烷基硫酸催化劑；
4.(4)取30?50g雷山魚醬放入500mL燒杯中，加入200?300mL溫度為40?50 °C的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻后放入超聲振蕩儀中，以200?300W的功率超聲振蕩30?40min后放入螺旋離心機中，以7000?8000r/min的轉速離心處理10?20min分離去除濾渣得上清液；
5.(5)將備用的濾餅和琥珀酸酐按摩爾比為1:1.5進行混合后溶于兩者總質量2?3倍的甲苯中，移入油浴鍋中加熱至110?120°C，保溫反應10?20h，將反應液過硅膠柱層析得到大豆留醇琥珀酸單酯；
6.(6)將400?500mL體積比為2:1的二氯甲烷和乙腈混合液裝入具塞錐形瓶中，再加入2?5g制得的十二烷基硫酸催化劑，移入冰水浴中，在2?4°C下加入40?50g大豆甾醇琥珀酸單酯，用玻璃棒緩慢攪拌并在攪拌狀態下分3?5次滴入30?50mL離心分離得到的上清液，控制滴加速度使其30?35min內滴加完畢，繼續攪拌5?lOmin后，過濾去除濾渣將濾液放入旋轉蒸發器中，升溫至85?95°C，旋蒸去除溶劑后即得一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆甾醇。
[0007]所述的甲醋化試劑是由無水乙醇和甲苯按摩爾比為1:1混合后制得。
[0008]本發明的應用方法:取20?30mL本發明制得的改性大豆甾醇在500ml容器中，再加入5?10mL花生油、3?5mL辛癸酸甘油酯，混合攪拌加熱至100?120°C，形成的透明溶液為油相，再將其倒入在1L的反應容器中，并向其中加入100?150mL去離子水，加熱至80?82°C，以5000?6000r/min轉速下攪拌15?25min，攪拌后所得乳液用高壓均質機以4000?4500psi的壓力處理1?3次，處理后將乳液降溫至20?25°C，之后按水性飲料總重量的0.6?1%添加到飲料中，即可制得植大豆留醇的水性飲料。
[0009]本發明的有益效果是:
(1)本發明的改性大豆留醇改善了原本豆留醇的水不溶性，可以應用在水基質的食品中；
(2)本發明加入的催化劑綠色無污染，反應副產物少，制備成本低廉。
【具體實施方式】
[0010]首先取300?500g大豆油加工脫臭餾出物，按固液比為3:1向流出物中加入甲醋化試劑，放入微波提取儀中，以600W的功率在0.2?0.3MPa的壓力下微波輔助甲醋化反應2?3min后，放入冰箱中，設置溫度為4?6°C，冰析結晶5?6h后過濾得粗大豆留醇；稱取30?35g上述制得的粗大豆留醇連同100?150mL環己酮一起倒入250mL燒杯中，移入水浴鍋中加熱至55?65°C，放置在高速攪拌機上，以800?900r/min的轉速攪拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷卻至室溫并過得到濾餅，再將濾餅按上述步驟反復操作3?5次后放入烘箱中干燥至恒重，備用；取3?5g十二烷基硫酸鈉放入研缽中，加入其體積2?3倍的濃度為0.01mol/L的鹽酸溶液，在通風櫥中研磨3?5min后放入馬弗爐，在300?400 °C下煅燒1?2h制得十二烷基硫酸催化劑；取30?50g雷山魚醬放入500mL燒杯中，加入200?300mL溫度為40?50°C的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻后放入超聲振蕩儀中，以200?300W的功率超聲振蕩30?40min后放入螺旋離心機中，以7000?8000r/min的轉速離心處理10?20min分離去除濾渣得上清液；將備用的濾餅和琥珀酸酐按摩爾比為1:1.5進行混合后溶于兩者總質量2?3倍的甲苯中，移入油浴鍋中加熱至110?120°C，保溫反應10?20h，將反應液過硅膠柱層析得到大豆留醇琥珀酸單酯；將400?500mL體積比為2:1的二氯甲烷和乙腈混合液裝入具塞錐形瓶中，再加入2?5g制得的十二烷基硫酸催化劑，移入冰水浴中，在2?4°C下加入40?50g大豆留醇琥珀酸單酯，用玻璃棒緩慢攪拌并在攪拌狀態下分3?5次滴入30?50mL離心分離得到的上清液，控制滴加速度使其30?35min內滴加完畢，繼續攪拌5?lOmin后，過濾去除濾渣將濾液放入旋轉蒸發器中，升溫至85?95°C，旋蒸去除溶劑后即得一種水溶性魚醬氨基酸改性大豆甾醇。
[0011]所述的甲醋化試劑是由無水乙醇和甲苯按摩爾比為1:1混合后制得。
[0012]實例1
11.首先取300g大豆油加工脫臭餾出物，按固液比為3:1向流出物中加入甲醋化試劑，放入微波提取儀中，以600W的功率在0.2MPa的壓力下微波輔助甲醋化反應2min后，放入冰箱中，設置溫度為4°C，冰析結晶5h后過濾得粗大豆留醇；稱取30g上述制得的粗大豆甾醇連同lOOmL環己酮一起倒入250mL燒杯中，移入水浴鍋中加熱至55°C，放置在高速攪拌機上，以800r/min的轉速攪拌直至粗大豆留醇完全溶解后，使其自然冷卻至室溫并過得到濾餅，再將濾餅按上述步驟反復操作3次后放入烘箱中干燥至恒重，備用；取3g十二烷基硫酸鈉放入研缽中，加入其體積2倍的濃度為0.01mol/L的鹽酸溶液，在通風櫥中研磨3min后放入馬弗爐，在300°C下煅燒lh制得十二烷基硫酸催化劑；取30g雷山魚醬放入500mL燒杯中，加入200mL溫度為40°C的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻后放入超聲振蕩儀中，以200W的功率超聲振蕩30min后放入螺旋離心機中，以7000r/min的轉速離心處理lOmin分離去除濾渣得上清液；將備用的濾餅和琥珀酸酐按摩爾比為1:1.5進行混合后溶于兩者總質量2倍的甲苯中，移入油浴鍋中加熱至110°C，保溫反應10h，將反應液過硅膠柱層析得到大豆甾醇琥珀酸單酯d_400mL體積比為2:1的二氯甲烷和乙腈混合液裝入具塞錐形瓶中，再加入2g制得的十二烷基硫酸催化劑，移入冰水浴中，在2°C下