定吸 收度，以濃度C對吸收度A回歸，得方程
[0197] A蒸飽水=0? 06956C+0. 001357 (r = 0? 9998)
[0198] APH6._酸緩沖液=0? 094726C-0. 00014(r = 0? 9999)
[0199] A0 54%十二烷基硫酸鈉水溶'液=0? 092432C+0. 005429 (r = 0? 9999)
[0200] 結果表明：3種介質中，黃芩總黃酮在1-8 μg/ml濃度范圍內均呈良好的線性關 系。
[0201] (5)累積溶出百分率（％ )測定
[0202] 溶出介質1000ml，超聲脫氣15分鐘，分別在黃芩總黃酮分散片溶出試驗進行2,5， 10, 20, 30,45min取樣5ml (補入等溫等量介質），經0. 8 y m濾膜過濾，精密量取0. 25ml于 5ml容量瓶，用相應介質定量稀釋至5ml，以相應介質作為空白對照，在相應檢測波長處測 吸光度，計算累積溶出百分率（％ )，結果見表17及圖9。
[0203] 表17.三種溶出介質的累積溶出百分率（n = 3, x土s)
[0204]
[0205] 注：1.水溶液；2. PH6. 8的磷酸緩沖液；3. 0. 54 %十二烷基硫酸鈉水溶液
[0206] 通過比較，以0.54 %十二烷基硫酸鈉水溶液為溶出介質。
[0207] 3、片劑溶出度的測定
[0208](1)儀器與藥品
[0209] UV-1206型紫外分光光度計（日本島津）；ZRS_4智能溶出儀（天津大學無線電 廠）；
[0210] 黃芩總黃酮（江中藥劑所提供）；黃芩總黃酮分散片（自制）。
[0211] ⑵方法與結果
[0212] ①標準曲線的繪制
[0213] 精密稱取干燥至恒重的黃芩總黃酮適量，置100ml量瓶中，加0.54%十二烷基 硫酸鈉溶液稀釋至刻度。用〇. 54%十二烷基硫酸鈉水溶液為空白，在276. 5nm波長分別 測定其吸收度A，以A對濃度C進行線性回歸，得回歸方程：A = 0.092432+0. 005429 (r = 0. 9999)。結果表明黃芩總黃酮在1. 1~7. 7 y g/ml范圍內有良好的線性關系。
[0214] ②溶出度回收率試驗
[0215] 按處方配比精密稱取黃芩總黃酮和空白混合輔料進行回收率實驗，測得平均回收 率為 97.36%。RSD = 1.59%。見表 18。
[0216] 表18.溶出度回收率結果
[0217]
[0218] 平均回收率：X = 97. 36% RSD%= 1. 59
[0219] ③空白干擾試驗：取缺黃芩總黃酮的空白輔料的0. 54%十二烷基硫酸鈉水溶液， 于200~400nm波長掃描，發現在276. 5nm波和長處略有吸收，但可忽略不計。另取不含 十二烷基硫酸鈉的空白輔料的0. 54%十二烷基硫酸鈉水溶液于200~400nm波長掃描，發 現在276. 5nm波和長處無吸收，由此可知空白輔料中的干擾因素為十二烷基硫酸鈉，但可 忽略不計，見圖10、11。
[0220] ④含量測定：取黃芩總黃酮分散片粉末約O.Olg置50ml容量瓶，加95%乙醇40ml 超聲提取30min，放冷后用95%乙醇定容至刻度，濾過，精密吸取lml至10ml容量瓶中，用 95%乙醇稀釋至刻度，用紫外分光光度法在276nm波長處測定吸收度，計算黃芩總黃酮的 含量。
[0221] ⑤溶出度的測定：照中國藥典2000年版附錄溶出度測定法測定黃芩總黃酮分散 片的溶出度（n = 6)，采用漿法，介質為0. 54%十二烷基硫酸鈉水溶液，轉速100r/min，溫 度為37±0. 5°C。分別于2、5、10、20、30、45min取樣5ml，補充等溫等體積的溶出介質。取 樣時用〇. 8 ym微孔濾膜濾過，取濾液0. 25ml于5ml容量瓶中，用溶出介質定容至刻度，于 276. 5nm波長處測吸收度。
[0222] ⑥溶出數據的處理：
[0223] 根據威布爾（Weibull)分布函數F(t) = e (t a)m/t°，經數學處理后得lnln(l/ (l-F(t)) = mln(t-a)-lnt。，參考文獻，用 Visual Basic6. 0 編程計算出 T5。，Td，m 等參數。 其程序代碼見附錄1、2。
[0224](五）成型工藝的研究
[0225] 1、制粒方法的選擇
[0226]制粒是片劑生產的關鍵操作，顆粒質量是片劑質量的重要保證。為了尋找適合工 業化生產的工藝路線，對濕潤法制粒，快速攪拌制粒和流化床制粒三種制粒方法制得的顆 粒和片劑質量進行了比較。
[0227](1)黃芩總黃酮分散片質量評價指標
[0228] 崩解時間：按中國藥典2000版規定，于19_21°C的水中測定崩解度。
[0229] 分散均勻度：根據英國藥典93年版規定，將兩片黃芩總黃酮分散片供試品放入 100ml水中，攪拌至完全分散，應通過710 y的篩網。
[0230] 溶出度：照溶出度測定方法測定。
[0231] 片劑硬度：以片劑硬度測試儀測定，重復測定10次，取其平均值。
[0232] 片重差異：按中國藥典2000年版第二部附錄的規定，測定20片計算平均值。
[0233] 片劑外觀：肉眼觀察分散片片面光滑度，有無花斑、松片、裂片等情況出現。
[0234](2)黃芩總黃酮分散片的處方組成
[0235] 黃芩總黃酮、微晶纖維素、TY、羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮、十二烷基硫酸鈉、微粉 硅膠、5% NT水溶液。
[0236] (3)不同制粒方法壓片
[0237] ①擠壓制粒：按處方量將黃芩總黃酮、微晶纖維素，TY、羧甲基淀粉鈉充分混勻，加 入溶解有十二烷基硫酸鈉的5% NP (吡咯酮）水溶液制成軟材，30目篩制粒，70°C干燥，干 顆粒用30目篩整粒，加入PVPP及微粉硅膠，壓成每片含總黃酮160mg的分散片。
[0238] ②高速攪拌制粒：按處方量將黃芩總黃酮、微晶纖維素、TY、羧甲基淀粉鈉置 HLY-10型混合攪拌制粒機中，先混勻，然后加入含十二烷基硫酸鈉的5% NP(吡咯酮）水 溶液為粘合劑制粒，70°C干燥，干顆粒用30目篩整粒，加入微粉硅膠，PVPP壓制成每片含藥 160mg的分散片。
[0239] ③流化床制粒：按處方量的2倍將黃芩總黃酮，微晶纖維素、TY，羧甲基淀粉鈉置 FL-5型沸騰制粒器中，以含十二烷基硫酸鈉的5% NP (吡咯酮）水溶液為粘合劑制粒，70°C 干燥，干顆粒用30目篩整粒，加入微粉硅膠，PVPP壓制成每片含藥160mg的分散片。
[0240] (4)半成品顆粒質量比較
[0241] ①休止角：休止角是表示粒子間作用力的主要方法之一。休止角的大小可反映顆 粒流動性的好壞。休止角的測定采用固定漏斗法：將漏斗固定于水平放置繪圖紙的上方一 定距離，漏斗下口距繪圖紙的高度為H，小心地將顆粒倒入漏斗中，一直到漏斗下形成的圓 錐體的尖端接觸到漏斗的下口為止，圓錐體底的直徑為2R，則tga =H/R，a角即為休止 角。三種不同制粒方法所制顆粒的休止角見表19。結果表明，流化床制粒所得顆粒流動性 最好，其次為高速攪拌制粒。擠壓制粒所得顆粒流動性較差。
[0242] 表19三種不同制粒方法所制顆粒的休止角
[0243]
[0244] ②三種不同制粒方法所制顆粒的粒度分布
[0245] 不同的制粒方法對顆粒粒度分布有明顯的影響，若細粉細粒過多，壓片時易產生 裂片、松片、邊角毛缺及粘沖等現象，因此應控制顆粒的粒度。試驗結果表明：擠壓制粒的 細粉量（<1〇〇目）達49. 38%，高速攪拌制粒細粉量占15. 98%，流化床制粒的細粉量占 46. 46%。高速攪拌制粒制得的顆粒細粉比較適中，有利于壓片。而擠壓制粒及流化床制粒 細粉量偏高。見表20、21、22及圖12、13、14。
[0246] 表20.擠壓制粒粒徑分布
[0247]
[0248] 表21.高速攪拌制粒粒徑分布
[0249]
[0250] 表22.流化床制粒粒徑分布
[0251]
[0252] (5)不同制粒方法對黃芩總黃酮分散片質量的影響
[0253] 不同的制粒方法所制得的顆粒對黃芩總黃酮分散片的質量具有明顯的影響，高速 攪拌制粒制得的片劑硬度大，外形美觀，完整，且崩解時限符合要求，溶出迅速。擠壓制粒制 得的片劑流動性較差，而流化床制粒制得的片劑硬度達不到要求，且有頂裂現象。見表21.
[0254] 表23.不同制粒方法對黃芩總黃酮分散片質量影響
[0255]
[0256] (6)三種不同制粒方法片劑的溶出度比較試驗
[0257] 不同制粒方法制得的顆粒質量不同，我們采用相同壓力壓片，然后進行溶出度比 較。
[0258] ①三種不同制粒方法的累積溶出百分率的測定
[0259] 累積溶出百分率的測定采用槳法：取0. 54%的十二烷基硫酸鈉水溶液1000ml為 溶出介質，分別在溶出試驗進行2, 5,10, 20, 30,45min取樣5ml (立即補入等溫等量介質）， 經0. 8 y m濾膜過濾，精密量取0. 25ml于5ml容量瓶，用0. 54%的十二烷基硫酸鈉水溶液定 量稀釋至5ml，以0. 54%的十二烷基硫酸鈉水溶液作為空白對照，在276. 5nm波長處測定吸 光度，計算累積溶出百分率（％)。.結果三種不同制粒方法制得的片劑的累積溶出百分率 無明顯的差異，見表24及圖15。
[0260] 表24.三種不同制粒方法的累積溶出百分率
[0261]
[0262] ②三種不同制粒方法所制黃芩總黃酮分散片溶出度！^。的單因素分析
[0263] 以溶出度T5。為指標，對三種不同的制粒方法制得的分散片進行單因素方差分析， 結果表明三種制粒方法無明顯的差異，見表25。
[0264] 表25.不同制粒方法所制分散片的T5。
[0265]
[0266] 表26.方差分析表
[0267]
[0268] 通過以上三種制粒方法的比較，確定采用高速攪拌制粒法，并對制粒工藝參數進 行考察。
[0269] 2、高速攪拌制粒工藝參數的研究
[0270] 影響高速攪拌制粒的因素有：攪拌槳、制粒刀的轉速，攪拌與制粒時間。因分散片 所需的顆粒較小，因此我們選擇漿葉開低速，制粒刀開高速。
[0271] (1)混合時間的確定：固體間的混合不能達到完全的均勻排列，只能達到宏觀的 均勻性，因此常常用統計分析的方法。在這里我們采用標準差 〇或方差〇2,是較常用的簡 單方法。
[0272] 〇 = [l/(n-l) E (Xi-x)2]1/2
[0273] 〇 2= 1/(n_l) E (x「x)2
[0274] n表不抽樣次數，乂;表不某一組分在第1次抽樣的分率，x表不樣品中某一組分的 平均分率，以 x = 1/n E Xl代替某一組分的理論分率。在〇、〇 2的計算過程中，受取樣次 數，取樣位置，加入分率等的影響，具有隨機誤差。
[0275] 計算結果：〇或〇 2值越小，越接近于平均值；這些值為0時，此混合物達到完全 混合。
[0276] 試驗方法：于不同時間從容器中三個不同部位取樣，取樣量約O.Olg，測定含量， 計算出〇值。結果表明3分鐘后〇、〇 2值已較小，因此混合時間定為3分鐘。見表27.
[0277] 表27.不同混合時間的〇、〇2值
[0278]
[0279] (2)制粒時間的確定：目測法，以制得的顆粒均勻為準。
[0280] 試驗方法：按處方稱取主藥與輔料下料，將盛器合攏進行快速攪拌混合3分鐘，然 后將漿葉開低速，制粒刀開高速，再將5 % NP (吡咯酮）水溶液從視窗加入，從視窗觀察，當 粒度均勻時停機，倒出濕顆粒，于70°C烘箱中干燥。
[0281] 3、助流劑用量的確定
[0282] 為了改善顆粒的流動性，可加入適量助流劑，其用量，可通過測定休止角來確定。 微粉硅膠作助流劑的一般用量為0. 15%-3%，微粉硅膠不同用量的休止角見表28和圖16。
[0283] 表28.微粉硅膠不同用量對助流效果的影響
[0284]
[0285] 由圖16可知，當微粉硅膠的用量達1 %后，顆粒的流動性較好，再增加用量對休止 角影響較小，。當微粉硅膠的用量在1 %以上時可加速片劑的崩解，有利于藥物的吸收，因此 我們選擇助流劑用量為1. 3%。
[0286] 4、顆粒的吸濕性考察
[0287] 顆粒的吸濕性對壓片有重要的影響，