無抗生物發酵飼料及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：一、制備混合種液的步驟：將發酵乳酸短桿菌的種子培養液與產朊假絲酵母的種子培養液混合后接種于混合種子培養基中，培養得到混合種液；二、制備混合發酵培養基的步驟：將飼料原料滅菌后待用；三、分段發酵步驟：先好氧發酵再厭氧發酵。本發明的有益之處在于：采用發酵乳酸短桿菌與產朊假絲酵母兩種微生物混合發酵處理原料，不僅增加了飼料中總的蛋白和氨基酸含量，同時分解了纖維素等非淀粉類物質，大大提高了無抗生物發酵飼料的生物效價；多菌種混合發酵，實現了以菌治菌、以菌治病、促進畜禽生長和抗病的目標，有效解決了飼料中抗生素殘留和病原菌株耐藥性問題。
【專利說明】無抗生物發酵飼料及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種飼料及其制備方法，具體涉及一種采用乳酸菌和酵母菌混合發酵處理多種蛋白性原料混合物的方法，以及由該方法直接獲得的無抗生物發酵飼料。
【背景技術】
[0002]傳統飼料的生產，采用麩皮、玉米、小麥、豆柏、棉柏、菜柏等作為原料，由于原料本身不能提供抗生素，為了提高畜禽防病、抗病的能力，往往需要往飼料中添加抗生素；眾所同知，抗生素對動物還有促進生長的作用，所以，抗生素在傳統飼料的生產中得到了廣泛的應用。
[0003]抗生素在飼料中的應用，因其存在殘留和病原菌株的耐藥性問題，將會給人類健康帶來巨大的災難。因此，無抗生物發酵飼料在國內外的研究一直不斷。
[0004]據報道，目前國內主要用于生產菌體蛋白的微生物有曲霉菌、根霉菌、假絲酵母菌、乳酸桿菌、乳酸鏈球菌、枯草桿菌、賴氨酸產生菌、擬內孢霉、白地霉等。目前選育出的菌種有:
[0005](I)酵母菌:酵母耐酸能力強，個體大，易回收，常用的酵母菌有熱帶假絲酵母菌、產朊假絲酵母菌、皮狀絲孢酵母菌、樹狀酵母。
[0006](2)放線菌:放線菌具有很強的分解纖維素的能力，可直接利用纖維原料生產單細胞蛋白，常用的放線菌有諾卡氏菌、高溫放線菌。
[0007](3)霉菌:霉菌可產生高活性的纖維素酶，降解飼料原料中的纖維素，常用的霉菌有白地霉、黑曲霉、康寧木霉、綠色木霉。
[0008](4)擔子真菌等。主要用于生產食用真菌等。
【發明內容】
[0009]為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種無抗生素添加，但具有以菌治菌、以菌治病、促進畜禽生長和抗病作用的無抗生物發酵飼料，以及該無抗生物發酵飼料的制備方法。
[0010]為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案:
[0011]一種無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0012]一、制備混合種液的步驟:
[0013](I)、將發酵乳酸短桿菌(Brevibacterium Iactofermentum-QF-1),保藏編號為CCTCC N0:M2013453，保藏日期為2013年9月28日，保藏單位:中國典型培養物保藏中心，保藏單位地址:中國.武漢.武漢大學，置于乳酸菌液體培養基中，在37°C條件下進行三級種子培養，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得發酵乳酸短桿菌的三級種子培養液；
[0014](2)、將產朊假絲酵母(Candida utilis QF-2)，保藏編號為 CCTCC N0:M2013454,保藏日期為2013年9月28日，保藏單位:中國典型培養物保藏中心，保藏單位地址:中國.武漢.武漢大學，置于麥芽汁液體培養基中，在28°C條件下進行三級種子培養，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得產朊假絲酵母的三級種子培養液；
[0015](3)、將發酵乳酸短桿菌的三級種子培養液與產朊假絲酵母的三級種子培養液按照體積比1:0.01~I的比例混合，得混合種子培養液；
[0016](4)、將混合種子培養液按照體積比1:10的比例接種于混合種子培養基中，在28~30°C條件下進行培養，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得到混合種液；
[0017]二、制備混合發酵培養基的步驟:
[0018](I)、將飼料原料烘干或壓榨至含水量為25~35%，得到混合發酵培養基；
[0019]前述飼料原料包括:麩皮、玉米、小麥、米糠、豆柏、棉柏、菜柏、豆腐渣等，既可以對單一原料進行發酵，也可以對若干原料的混合物進行發酵，根據具體情況而定；
[0020](2 )、向混合發酵培養基中添加CaCO3 ；
[0021](3)、加水調節混合發酵培養基的濕度至50~60% ；
[0022](4)、自然pH值，滅菌后待用；
[0023]三、分段發酵步驟:
[0024](I)、將混合種液按照體積比1:10的比例接種于混合發酵培養基中；
[0025](2)、先在30~32°C條件下好氧發酵12h，然后在35~37°C條件下厭氧發酵48~72h，當混合物pH下降至3.5~4.0的穩定狀態，且菌體數目達到IO7~108CFU/g時，停止發酵；
[0026](3)、發酵物在40~62°C條件下烘干，包裝得到成品。
[0027]前述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，前述乳酸菌液體培養基的配制如下:
[0028]
【權利要求】
1.無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 一、制備混合種液的步驟: (1)、將發酵乳酸短桿菌，保藏編號為CCTCCNO:M 2013453，置于乳酸菌液體培養基中，在37°C條件下進行三級種子培養，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得發酵乳酸短桿菌的三級種子培養液； (2)、將產朊假絲酵母，保藏編號為CCTCCNO:M 2013454，置于麥芽汁液體培養基中，在28°C條件下進行三級種子培養，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得產朊假絲酵母的三級種子培養液； (3)、將發酵乳酸短桿菌的三級種子培養液與產朊假絲酵母的三級種子培養液按照體積比1:0.01~I的比例混合，得混合種子培養液； (4)、將混合種子培養液按照體積比1:10的比例接種于混合種子培養基中，在28~30°C條件下進行培養，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得到混合種液； 二、制備混合發酵培養基的步驟: (1)、將飼料原料烘干或壓榨至含水量為25-35%，得到混合發酵培養基； (2)、向混合發酵培養基中添加CaCO3； (3)、加水調節混合發酵培養基的濕度至50~60%； (4)、自然pH值，滅菌后待用；` 三、分段發酵步驟: (1)、將混合種液按照體積比1:10的比例接種于混合發酵培養基中； (2)、先在30~32°C條件下好氧發酵12h，然后在35~37°C條件下厭氧發酵48~72h，當混合物pH下降至3.5~4.0的穩定狀態,且菌體數目達到IO7~108CFU/g時,停止發酵； (3)、發酵物在40~62°C條件下烘干，包裝得到成品。
2.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述乳酸菌液體培養基的配制如下:
3.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述麥芽汁液體培養基的配制如下: 將未加酒花的發酵啤酒的原料，稀釋至12白利度，于666.4KPa壓力下滅菌30min。
4.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述混合種子培養基的配制如下: 玉米淀粉5g 尿素IgCaHPO4 0.5g 蒸懼水稀釋至IOOmL 自然pH值 666.4KPa壓力下滅菌30min。
5.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述三級種子培養的步驟為: (I )、將發酵乳酸短桿菌/產朊假絲酵母接種于5mL乳酸菌液體培養基/麥芽汁液體培養基中，培養16h,得一級種子培養液； (2)、將5mL—級種子培養液接種于IOOmL乳酸菌液體培養基/麥芽汁液體培養基中，培養16h，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得二級種子培養液； (3)、將IOOmL二級種子培養液接種于IOL乳酸菌液體培養基/麥芽汁液體培養基中，培養16h，培養至細胞濃度>109CFU/mL，得發酵乳酸短桿菌/產朊假絲酵母的三級種子培養液。
6.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述發酵乳酸短桿菌的三級種子培養液與產朊假絲酵母的三級種子培養液按照體積比1:0.1的比例混合 O
7.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述混合發酵培養基中還添加有CaHPO4、飼用礦物添加劑和飼用維生素中的任意一種，或任意兩種的混合物，或三種同時添加。
8.根據權利要求7所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述飼用礦物添加劑的原料組成及重量配比如下:
9.根據權利要求1所述的無抗生物發酵飼料的制備方法，其特征在于，所述混合發酵培養基的滅菌方法為:105°C蒸汽間歇式滅菌2~3次，每次lh，每次間歇3~4h。
10.一種無抗生物發酵飼料，其特征在于，由權利要求1至9任意一項所述的方法制備而來。
【文檔編號】A23K1/00GK103719537SQ201310700069
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月18日 優先權日:2013年12月18日
【發明者】黎漢兵 申請人:四川宜賓全福飼料有限公司