專利名稱：富含三萜類化合物糖肽的生理功能調節劑的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種制備生理功能調節劑的制備方法。
背景技術：
已有技術 云芝是一種富含三萜類化合物糖肽的名貴藥材，能夠促進蛋白質和核酸的 合成，具有很強的免疫及生理調節功能，能夠保肝、抗病毒、抗腫瘤。已有技術生理功能調 節劑，是對人體及動物機體有益的一種生理功能調節劑。已有技術的不足之處，是其中所含 三萜類化合物糖肽少，以致其生理調節功能效果不夠理想。
發明內容
所要解決的技術問題是提供一種富含三萜類化合物云芝糖肽生理功能調節劑制備方法。 解決其技術問題的技術方案，富含三萜類化合物云芝糖肽的生理功能調節劑的制備方法, 包含如下步驟
A、制備云芝發酵液分以下五步進行
a、 制備斜面培養云芝菌種將植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及瓊脂粉按照重量比植 物蛋白胨酵母膏葡萄糖；瓊脂粉水=10: 4: 30: 20: 1000的比例，配制成斜面培養基， 裝入試管，加溫至121°C滅菌30分鐘，制成斜面培養基，冷卻至27nC,制成30a-80"斜面， 按照重量比云芝菌種斜面培養基=1: IOO的比例，將云芝菌種接入斜面培養基中，在27t 溫度下靜止培養5天，得到斜面培養云芝菌種；
云芝菌種采用中國微生物菌種保藏中心的保藏號為CMGCC NO. 5.161雜色云芝菌株， 經過篩逸，得到富含三萜類化合物云芝糖肽的去芝菌株作為菌種。
b、 制備搖瓶培養云芝菌種將植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及磷酸二氫鉀按照重量 比植物蛋白胨酵母膏葡萄糖磷酸二氫鉀水=10: 1: 30: 0.6: 1000的比例配置成搖 瓶培養基，裝入搖瓶，加溫至121。C滅菌30分鐘，冷卻至27-C,按照重量比斜面培養云芝菌 種搖瓶培養基=10: IOO的比例，將步驟Aa所得的斜面培養云芝菌種接入搖瓶培養基中， 在溫度為27°C轉速為80-120轉/分的搖床上培養4天，得到搖瓶培養云芝菌種；
C、制備一級種子培養云芝菌種按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氫鉀水=20: 20:
40.6: IOOO的比例配置成一級種子培養基，裝入種子罐中，加溫至12rc滅菌30分鐘，冷卻 至27。C，按照重量比搖瓶培養云芝菌種 一級種子培養基=10: 100的比例，將步驟Ab所得 的搖瓶培養云芝菌種接入一級種子培養基中，在溫度為27°(:，通氣條件下，培養3天，得到 一級種子培養云芝菌種；
d、 制備二級種子培養云芝菌種按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氫鉀水=20: 20:
0.6: 1000的比例，配置成二級種子培養基，裝入種子罐中，加溫至i2rc滅菌3o分鐘，冷
卻至27。C，按照重量比一級種子培養云芝菌種二級種子培養基=5: IOO的比例，將步驟Ac 所得的一級種子培養云芝菌種接入二級種子培養基中，在溫度為27aC通氣條件下，培養3天， 得到二級種子培養云芝菌種；
e、 制備云芝深層發酵液按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氫鉀水=20: 20: 0.6: 1000的比例配置成云芝深層發酵液培養基，裝入發酵罐中，加溫至121°C滅菌30分鐘，冷 卻至27"C,按照重量比二級種子培養云芝菌種云芝深層發酵液培養基=5: 100的比例，將 步驟Ad所得的二級種子培養云芝菌種接入云芝深層發酵液培養基中，在溫度27°C，通氣條 件下，培養3天，得到含三萜類化合物云芝糖肽的云芝深層發酵液；
B、 制備植物蛋白云芝發酵液
按照重量比植物蛋白粉云芝深層發酵液=(8-20): IOO的比例,將植物蛋白粉加入步驟 Ae所得的云芝深層發酵液中，煮沸30-60分鐘，得到植物蛋白云芝發酵液；
植物蛋白可以使用大豆蛋白粉、花生蛋白粉、玉米蛋白粉、碗豆蛋白粉、棉籽蛋白粉、 菜籽蛋白粉；小麥蛋白粉和芝麻蛋白粉；
C、 制備云芝發酵酶解液將步驟B所得的植物蛋白云芝發酵液冷卻至55"C，按照重量 比酶植物蛋白云芝發酵液=(0.5-5): 1000的比例，將酶加入植物蛋白云芝發酵液中，以 25-120轉/分鐘的速度攪拌0. 5-30小時，得到富含三萜類化合物糖肽的云芝發酵酶解液；
酶可以使用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、葡聚糖酶、淀粉酶、 纖維素酶中的一種或幾種；
D、 滅酶將步驟C所得云芝發酵酶解液升溫至90-C-100°C，加溫10-30分鐘進行滅酶;
E、 干燥將步驟D所得的滅酶后的云芝發酵酶解液，以進風溫度為80°C-180aC的噴霧 干燥機烘干，至其中水分重量含量小于10%，得到成品。
有益效果本發明應用于制備富含三萜類化合物云芝糖肽的生理功能調節劑。有益效果 是，所制成的富含三萜類化合物糖肽的生理功能調節劑，具有多種生物活性，能夠去除植物蛋白的抗營養因子，可以增強免疫力和抗病能力，促進生長，可以用于人的營養、保健，也 可以用于動物詞料；其中的富含三萜化合物云芝糖肽能明顯降低金葡菌、大腸桿菌、痢疾桿 菌等致病菌感染，用于斷奶仔豬可防止仔豬紅白痢的發生，促進腸道絨毛細胞的發育，提高 消化率，增進食欲，減少斷奶應激，從而提高仔豬成活率和窩重；用于哺乳母豬，可提高采 食量和泌乳量；用于禽類喂養，可保障腸道健康，減少應激，提高料肉比。
具體實施例方式
具體實施方式
，包含如下步驟
A、制備云芝發酵液分以下五步進行
a、 制備斜面培養云芝菌種按照重量比植物蛋白胨酵母膏葡萄糖瓊脂粉水 =10: 4: 30: 20: 1000的比例，配制成斜面培養基，裝入試管，加溫至121°C滅菌30分鐘， 制成斜面培養基，冷卻至27nC，制成60"斜面，按照云芝菌種斜面培養基=1: IOO的重量比，
將云芝菌種接入斜面培養基中，在27。C溫度下靜止培養5天，得到斜面培養云芝菌種；
云芝菌種釆用中國微生物菌種保藏中心的保藏號為CMGCC NO. 5.161雜色云芝菌株， 經過篩選，得到富含三萜類化合物云芝糖肽的云芝菌株作為菌種。
b、 制備搖瓶培養云芝菌種按照重量比植物蛋白胨酵母膏葡萄糖磷酸二氫鉀 水=10: 1: 30: 0.6: 1000的比例配置成搖瓶培養基，裝入搖瓶，加溫至121°C滅菌30分鐘， 冷卻至27。C，按照斜面培養云芝菌種搖瓶培養基=10: 100的比例，將步驟Aa所得的斜面 培養云芝菌種接入搖瓶培養基中，在溫度為27。C轉速為60轉/分的搖床上培養4天，得到搖 瓶培養云芝菌種；
C、制備一級種子培養云芝菌種按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氫鉀水=20: 20:
0.6: 1000的比例配置成一級種子培養基，裝入種子罐中，加溫至12rc滅菌30分鐘，冷卻 至27"C,按照重量比搖瓶培養云芝菌種 一級種子培養基=10: 100的比例，將步驟Ab所得 的搖瓶培養云芝菌種接入一級種子培養基中，在溫度為27"C，通氣條件下，得到一級種子培 養云芝菌種
d、制備二級種子培養云芝菌種按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氫鉀水=20: 20: 0.6: 1000的比例，配置成二級種子培養基，裝入種子罐中，加溫至12rC滅菌30分鐘，冷 卻至27"C，按照重量比一級種子培養云芝菌種二級種子培養基=5: IOO的比例，將步驟Ac 所得的一級種子培養云芝菌種接入二級種子培養基中，在溫度為27°C通氣條件下，培養3天，
得到二級種子培養云芝菌種；e、制備云芝深層發酵液按照重量比豆粕葡萄糖磷酸二氫鉀水=20: 20: 0.6: 1000的比例配置成云芝深層發酵液培養基，裝入發酵罐中，加溫至121""C滅菌30分鐘，冷 卻至27°C，按照重量比二級種子培養云芝菌種云芝深層發酵液培養基=5: 100的比例，將 步驟Ad所得的二級種子培養云芝菌種接入云芝深層發酵液培養基中，在溫度27°C，通氣條 件下，培養3天，得到含三萜類化合物云芝糖肽的云芝深層發酵液；
B、 制備植物蛋白云芝發酵液
按照重量比植物蛋白粉云芝深層發酵液=10: lOO的比例,將大豆蛋白粉加入步驟Ae所 得的云芝深層發酵液中，煮沸60分鐘，得到植物蛋白云芝發酵液；
C、 制備云芝發酵酶解液將步驟B所得的植物蛋白云芝發酵液冷卻至55。C，按照重量 比酶植物蛋白云芝發酵液=4: 1000的比例，將酸性蛋白酶加入植物蛋白云芝發酵液中，以 100轉/分鐘的速度攪拌20小時，得到富含三萜類化合物糖肽的云芝發酵酶解液；
D、 滅酶將步驟C所得云芝發酵酶解液升溫至100"C，加溫30分鐘進行滅醵；
E、 干燥將步驟D所得的滅酶后的云芝發酵酶解液，以進風溫度為1209C的噴霧干燥 機烘干，至其中水分重量含量小于10%，得到成品。
權利要求
1、富含三萜類化合物云芝糖肽的生理功能調節劑的制備方法，其特征在于包含如下步驟A、制備云芝發酵液分以下五步進行a、制備斜面培養云芝菌種將植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及瓊脂粉按照重量比植物蛋白胨∶酵母膏∶葡萄糖∶瓊脂粉∶水＝10∶4∶30∶20∶1000的比例，配制成斜面培養基，裝入試管，加溫至121℃滅菌30分鐘，制成斜面培養基，冷卻至27℃，制成30°-80°斜面，按照重量比云芝菌種∶斜面培養基＝1∶100的比例，將云芝菌種接入斜面培養基中，在27℃溫度下靜止培養5天，得到斜面培養云芝菌種；云芝菌種采用中國微生物菌種保藏中心的保藏號為CMGCC N0.5.161雜色云芝菌株，經過篩選，得到富含三萜類化合物云芝糖肽的云芝菌株作為菌種。b、制備搖瓶培養云芝菌種將植物蛋白胨、酵母膏、葡萄糖及磷酸二氫鉀按照重量比植物蛋白胨∶酵母膏∶葡萄糖∶磷酸二氫鉀∶水＝10∶1∶30∶0.6∶1000的比例配置成搖瓶培養基，裝入搖瓶，加溫至121℃滅菌30分鐘，冷卻至27℃，按照重量比斜面培養云芝菌種搖瓶培養基＝10∶100的比例，將步驟Aa所得的斜面培養云芝菌種接入搖瓶培養基中，在溫度為27℃轉速為80-120轉/分的搖床上培養4天，得到搖瓶培養云芝菌種；c、制備一級種子培養云芝菌種按照重量比豆粕∶葡萄糖∶磷酸二氫鉀∶水＝20∶20∶0.6∶1000的比例配置成一級種子培養基，裝入種子罐中，加溫至121℃滅菌30分鐘，冷卻至27℃，按照重量比搖瓶培養云芝菌種一級種子培養基＝10∶100，將步驟Ab所得的搖瓶培養云芝菌種接入一級種子培養基中，在溫度為27℃，通氣條件下，培養3天，得到一級種子培養云芝菌種；d、制備二級種子培養云芝菌種按照重量比豆粕∶葡萄糖∶磷酸二氫鉀∶水＝20∶20∶0.6∶1000的比例，配置成二級種子培養基，裝入種子罐中，加溫至121℃滅菌30分鐘，冷卻至27℃，按照重量比一級種子培養云芝菌種二級種子培養基＝5∶100的比例，將步驟Ac所得的一級種子培養云芝菌種接入二級種子培養基中，在溫度為27℃通氣條件下，培養3天，得到二級種子培養云芝菌種；e、制備云芝深層發酵液按照重量比豆粕∶葡萄糖∶磷酸二氫鉀∶水＝20∶20∶0.6∶1000的比例配置成云芝深層發酵液培養基，裝入發酵罐中，加溫至121℃滅菌30分鐘，冷卻至27℃，按照重量比二級種子培養云芝菌種云芝深層發酵液培養基＝5∶100的比例，將步驟Ad所得的二級種子培養云芝菌種接入云芝深層發酵液培養基中，在溫度27℃，通氣條件下，培養3天，得到含三萜類化合物云芝糖肽的云芝深層發酵液；B、制備植物蛋白云芝發酵液按照重量比植物蛋白粉∶云芝深層發酵液＝(8-20)∶100的比例，將植物蛋白粉加入步驟Ae所得的云芝深層發酵液中，煮沸30-60分鐘，得到植物蛋白云芝發酵液；C、制備云芝發酵酶解液將步驟B所得的植物蛋白云芝發酵液冷卻至55℃，按照重量比酶∶植物蛋白云芝發酵液＝(1-5)∶1000的比例，將酶加入植物蛋白云芝發酵液中，以25-120轉/分鐘的速度攪拌0.5-30小時，得到富含三萜類化合物糖肽的云芝發酵酶解液；D、滅酶將步驟C所得云芝發酵酶解液升溫至90℃-100℃，加溫10-30分鐘進行滅酶；E、干燥將步驟D所得的滅酶后的云芝發酵酶解液，以進風溫度為80℃-180℃的噴霧干燥機烘干，至其中水分重量含量小于10％，得到成品。
全文摘要
富含三萜類化合物糖肽的生理功能調節劑的制備方法，涉及一種制備生理功能調節劑的制備方法。所要解決的技術問題是，提供一種制備富含三萜類化合物糖肽的生理功能調節劑的制備方法。解決其技術問題的技術方案，包含如下5個步驟制備云芝發酵液，包含制備斜面培養云芝菌種、制備搖瓶培養云芝菌種、制備一級種子培養云芝菌種、制備二級種子培養云芝菌種及制備云芝深層發酵液；制備植物蛋白云芝發酵液；制備云芝發酵酶解液；滅酶及干燥。本發明應用于制備富含三萜類化合物云芝糖肽的生理功能調節劑。有益效果是所制成的生理功能調節劑，具有多種生物活性，能去除植物蛋白抗營養因子，增強免疫力和抗病能力，促進生長，可用于人的營養、保健，也可用于動物飼料。
文檔編號A23L1/305GK101601434SQ200810069828
公開日2009年12月16日 申請日期2008年6月13日 優先權日2008年6月13日
發明者麗 任 申請人:麗 任