一株海洋石油降解菌、發酵所得化合物及其用途
【專利摘要】本發明公開了一株海洋石油降解菌、發酵所得化合物及其用途。命名為Alcanivorax dieselolei T6-6，保藏編號為：CGMCC NO：9033。γ-變形菌綱，海洋螺菌目，烷烴降解菌科，食烷菌屬，柴油食烷菌種；該菌可用于石油烴的降解與清除，環境污染的治理，生產表面活性劑，降低水的表面張力等多種用途；該菌發酵后的次生代謝產物中分離得到一類化合物，其中一種為：dieseloleiT6-6，2-氨基-6-(N-2-羰基-4-十三烷基-環丁烷)己酸，為一種賴氨酸脂。該化合物對不同有機物有乳化活性，對革蘭氏陽性細菌及真菌有抗菌抑菌作用，有較好的細胞毒活性。
CGMCC No.9033
20140409
【專利說明】一株海洋石油降解菌、發酵所得化合物及其用途
【技術領域】
[0001] 本發明涉及微生物領域，尤其涉及一株海洋石油降解菌、發酵所得化合物及其用途。
【背景技術】
[0002] 海洋微生物（marine microorganism)是海洋中個體微小，構造簡單的低等生物的 總稱。包括細菌、真菌、放線菌、霉菌、酵母、病毒、衣原體、支原體、噬菌體和微型藻及微型原 生動物等。90年代以前，關于海洋微生物次生代謝產物的化學研究報道很少，人們研究熱點 一直是陸生真菌資源；到了 90年代以后，關于海洋微生物次生代謝產物的化學研究的報道 顯著增多；其中1998年和2000年發現的新化合物數目最多，海洋微生物來源的新化合物數 目也在增加，許多化合物具有新的骨架，證明了海洋微生物具有獨特的代謝和生理機制，是 潛在的新化合物及藥物先導化合物的豐富資源庫。
[0003] 食烷菌（Alcanivorax)是海洋石油污染環境中重要的烷烴降解菌。目前在世界范 圍內從表層海水到深海沉積物中均分離或檢測到了該屬細菌的存在。該屬目前已報道有6 個種，第一個種Alcanivorax borkumensis SK2是1998年由Yakimov等人分離獲得的，產 一種糖脂類表面活性劑，葡萄糖脂（一個葡萄糖殘基連著四個3-0H脂肪酸）；從黃海表層 海水分離的柴油食燒菌Alcanivorax dieselolei B-5,在以十六燒為唯一碳源的誘導培養 基中均能將發酵液表面張力降低到30mN/m以下，經鑒定為脯氨酸酯（十六烷酸與脯氨酸脫 水縮合形成的線性脂肽）。
[0004] 生物表面活性劑一般是由微生物（尤其是一些細菌和真菌）在一定培養條件下產 生的代謝產物，通常為糖脂、磷脂、多糖脂復合物、脂蛋白-脂多肽、羥基化合物和交聯脂肪 酸等。生物表面活性劑的非極性疏水基團一般是長鏈脂肪酸或是β_羥基脂肪酸、α-烷 基_β -羥基脂肪酸；而極性的親水集團則有多種形式如糖類、氨基酸類、環狀肽類、磷酸 鹽、醇等，它們一般都具有良好的降低表面張力和界面張力的性能。
[0005] 生物表面活性劑具有一些一般化學合成表面活性劑所沒有的獨特性能:一般具有較 低的臨界膠束濃度，用量少、高效;具有生物降解性，無毒，對環境友好;可應用于環保、化妝品、 藥物、食品添加劑；因其化合物性質穩定，故可應用于一些極端環境如高溫、高鹽、高PH值等；
[0006] 生物表面活性劑可分為糖脂、脂肽、脂蛋白、磷脂、脂肪酸、聚合物表面活性劑、粒狀 物表面活性劑。脂肽類生物表面活性劑的親水基團由短肽或氨基酸組成，疏水基團由脂肪酸 組成，一種脂肽往往是多種異構單體組成的混合體。由于脂肽中的脂肪酸鏈長和支鏈數量以 及氨基酸的組成具有多變性，致使脂肽表面活性劑的種類繁多。具有代表性的脂肽有SUrfa ctin, lichenysin, fengycin, iturin, mycosubtiIin 及 baciIlomycin 等。目前發現的月旨膚主 要來自 Bacillus 屬，如 B. subitilis、B. circulans、B. cereus、B. polymyxa、B. mesentericus 等。除了 Bacillus產生脂肽外，其他一些種類的微生物也產脂肽。例如Mycobacterium fortuirum、Streptomyces canus、Pseudomonas fluorescens、Serratiamarcescens 等。
[0007] 表I幾種重要的微生物表面活性劑的來源和性質表
[0008]
【權利要求】
1. 一株海洋石油降解菌Alcanivorax dieselolei T6-6,保藏編號為：CGMCC NO :9033。
2. 權利要求1所述菌株的用途。
3. 權利要求1所述菌株可用于石油烴的降解與清除，及其所述菌株用于石油烴的降解 與清除的方法。
4. 權利要求1所述菌株可用于環境污染的治理，及其所述菌株用于治理環境污染的方 法。
5. 權利要求1所述菌株可降低水的表面張力，及其所述菌株用于降低水表面張力的方 法； 任選的，所述菌株可用于生產生物表面活性劑，及其所述菌株用于生產表面活性劑的 用途。
6. 權利要求1所述菌株可用于革蘭氏陽性細菌及真菌的抗菌抑菌，及其所述菌株用于 革蘭氏陽性細菌及真菌的抗菌抑菌的方法。
7. 權利要求1所述菌株發酵可生產一類化合物，其特征在于，這類化合物的結構式如 下：
當n = 1時，分子式為C18H34N2O3，分子量為326,命名為2-氨基-6-(N-2-羰基-4-壬 基-環丁燒）己酸；當n = 2時，分子式為C2tlH38N2O3，分子量為354，命名為2-氨 基-6-(N-2-羰基-4- i^一烷基-環丁烷）己酸；當n = 3時，分子式為C22H42N2O3,分子 量為382,命名為2-氨基-6-(N-2-羰基-4-十三烷基-環丁烷）己酸，又叫賴氨酸脂 dieseloleiT6-6 ;當n = 4時，分子式為C24H46N2O3，分子量為410,命名為2-氨基-6- (N-2-羰 基-4-十五烷基-環丁烷）己酸。
8. 權利要求7所述的化合物賴氨酸脂dieSel〇leiT6-6,分子式為C 22H42N203，是通過權 利要求1所述的菌株發酵制備得到，其結構式為：
9.權利要求7所述的化合物-賴氨酸脂dieseloleiT6_6用于乳化有機物和革蘭氏陽 性細菌及真菌的抗菌抑菌的用途；及其所述賴氨酸脂dieSel〇leiT6-6用于乳化有機物和 革蘭氏陽性細菌及真菌的抗菌抑菌的方法。
【文檔編號】C12R1/01GK104498379SQ201410354363
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年7月24日 優先權日:2014年7月24日
【發明者】邵宗澤, 史小滿, 王萬鵬 申請人:國家海洋局第三海洋研究所, 中國大洋礦產資源研究開發協會