專利名稱：一種含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物及其制備方法
技術領域：
本發明屬于藥物制劑領域，更具體的說是涉及一種含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物及其制備方法。
背景技術：
阿德福韋[英文名Adefovir，9-(2-phosphonylmethoxyethyl)adenine，簡稱PMEA]是一種新的核苷類抗病毒藥物，化學名9-[2-磷酰甲氧基乙基]腺嘌呤。分子式為C8H12N5O4P，分子量為273.19，具有下述化學結構。
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的，在我國約有1.2億人是乙肝病毒攜帶者，現患乙肝2800萬，有較大一部分人會演變成慢性肝炎、肝硬化或肝癌，嚴重危害著人類健康的疾病，因此開發抗乙肝病毒的藥物具有極其重大的意義。阿德福韋是一類新的核苷類抗病毒藥物，化合物專利為Czech Academy of Sciences的EP 0206459[1986.12.30]和JP 1986275289[1986.12.5]及其等同專利。阿德福韋可以作為DNA合成所需的核苷酸dATP的替代底物，通過競爭病毒多聚酶而進入合成中的DNA，由于阿德福韋并無3′羥基，其后的核苷酸不再能夠連接，迫使病毒DNA鏈的合成終止。在體內外試驗表明具有抗肝DNA病毒、逆轉錄病毒和皰疹病毒的廣譜抗病毒活性。
由于阿德福韋的磷酸基帶負電荷，口服后在腸內吸收不佳。為了提高生物利用度，Bristol-Myers Squibb Co.研究了阿德福韋的前體藥物阿德福韋酯(adefovirdipivoxil)(JP 1992230694，August 19，1992；EP 0481214 April 22，1992)GileadSciences Inc.補充申請了專利WO 9904774(February 4，1999)。相關的前體藥物的研究報道有Starrett et al，J.Med.Chem.，″Synthesis，Oral BioavailabilityDetermination，and in Vitro Evaluation of Prodrugs of the Antiviral Agent9-[2-(Phosphonomethoxy)ethyl]adenine(PMEA)″，371857-1864(1994).；Benzariaet a1.，″New Prodrugs of 9-(2-Phosphonomethoxyethyl)Adenine[PMEA]Synthesisand Stability Studies″，14(3-5)563-565，NUCLS & NUCLT，1995.；Cundy et al.，″Oral bioavailability of the antiretroviral agent 9-(2-phosphonylmethoxyethyl)adenine(PMEA)from three formulations of the prodrugbis(pivaloyloxymethyl)-PMEA in fasted male cynomolgus monkeys″，11(6)839-843，Pharm Res，1994.等等。Gilead Sciences公司在中國申請了阿德福韋酯的有關專利專利公開號CN 1251592(核苷酸類似物組合物)，專利公開號CN 1330547(藥用制劑)。阿德福韋的前藥—阿德福韋酯口服后迅速被酯酶水解釋放出游離的阿德福韋進入門靜脈和全身循環，研究表明阿德福韋酯的生物利用度較阿德福韋高2倍左右。該藥由美國Gilead Sciences公司開發，于2002年9月20日被FDA批準用于治療成人慢性乙肝，商品名為Hepsera。
阿德福韋本身非常穩定，做成阿德福韋酯后吸收增加了但穩定性降低，即使在室溫下也容易分解。研究表明阿德福韋酯是一種難溶于水的具有多種晶型及無定型的固體物質，當制備成硬膠囊和片劑時，常常在自然條件下隨著時間的延長而降解，較高的溫度更容易分解，對本品的運輸、保存有效期和應用等都帶來了很大的不便，影響了藥物質量。另一方面，阿德福韋做成酯后的生產成本也增加了。
發明內容
本發明的一個目的是在克服上述現有技術的缺點和不足，提供一種穩定性好、生物利用度高及生產成本低的含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物。
本發明是將含有活性成分的阿德福韋或其鹽與載體材料制備成固體分散物。其活性成分阿德福韋或其鹽與載體材料重量比為1∶0.2-1∶100，較好為1∶0.5-1∶10，優選為1∶1-1∶3；所述的載體材料是聚維酮、聚乙二醇、膽固醇、卵磷脂、β-環糊精及其衍生物、蔗糖、甘露醇、山梨醇、枸櫞酸、琥珀酸、膽酸、脫氧膽酸、泊洛沙姆的一種或幾種的組合物；本發明采用的阿德福韋鹽包括藥用上可接受的有機鹽或無機鹽，其中有機鹽為氨基酸鹽、葡甲胺鹽、甲磺酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、膽酸鹽、脫氧膽酸鹽；無機鹽為鈉、鉀、鎂、鋅、鋁等金屬離子鹽以及鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸等無機酸鹽。
本發明的另一個目的是提供一種含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物的制備方法。
本發明的目的是這樣實現的1.阿德福韋鹽的制備方法取阿德福韋，加入溶劑，再加酸或堿攪拌使完全溶解，回收溶劑，以適當的溶劑精制得阿德福韋鹽。
其中酸或堿與阿德福韋的投料按摩爾比為1∶0.5-1∶2，溶劑量為阿德福韋量的3-100倍。所述的溶劑可以是水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙醇、丙二醇、異丙醇的一種或幾種混合物，優選水或乙醇；所述的有機酸可以是氨基酸、甲磺酸、酒石酸、檸檬酸、乙酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸、膽酸、脫氧膽酸等；所述的無機鹽可以是鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸等無機酸鹽等；所述的有機堿可以用氨基酸、葡甲胺等，所述的無機堿可以是鈉、鉀、鎂、鋅、鋁等金屬離子鹽。
2.固體分散物的制備方法本發明采用阿德福韋或其鹽為活性成份，加入載體材料，分別采用熔融法、熔融-溶劑法、研磨法、溶劑法、噴霧干燥法、冷凍干燥法制備阿德福韋或其鹽的固體分散物。其特征在于包括a、熔融法載體材料與藥物的投料重量比為4∶1-50∶1，載體材料可選用聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、泊洛沙姆188、甘露糖醇、木糖醇等。
取載體材料與阿德福韋或其鹽混勻，加熱至熔融，劇烈攪拌，置冰水浴中迅速冷卻成固體，置冷凍箱中0.5-24h，充分固化，干燥，研磨，過50-300目篩，即得本發明固體分散體。
b、研磨法載體材料與藥物的投料重量比為1∶2-1∶100，載體材料可選用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、微晶纖維素(PH102、PH301、PH302等)、環糊精及其衍生物、聚維酮類和乳糖、半乳糖、琥珀酸、膽酸、卵磷脂、脫氧膽酸的一種或幾種組合物。
取載體材料與阿德福韋或其鹽混勻，共置研缽中，研磨，轉速100-600rpm，研磨時間10min-240min。取出，過50-300目，即得本發明固體分散物。
c、溶劑法(噴霧干燥法、冷凍干燥法)c-1溶劑法將阿德福韋或其鹽溶于適當的溶劑中，使之溶解。再將載體材料溶解于適當的溶劑中。將兩者混合均勻，蒸去溶劑使藥物和載體材料同時析出，干燥；或將兩者混合均勻，蒸去適量溶劑，充分固化，干燥，研磨，過50-300目篩使成固體分散體，即得本發明固體分散物。
其中藥物與載體材料的投料重量比為1∶1-1∶100，溶劑量為阿德福韋重量的5-200倍。所述載體材料可選用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、泊洛沙姆188、半乳糖、甘露醇、聚維酮、右旋糖、山梨醇、蔗糖、膽固醇、卵磷脂、β-環糊精及其衍生物的一種或幾種的組合物。所述的溶劑可以是水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙醇、丙二醇、異丙醇的一種或幾種組合物。所述的藥用添加劑可以是十二烷基硫酸鈉，三羥甲基氨基甲烷等。
c-2噴霧干燥法將阿德福韋或其鹽溶于適當的溶劑中使之溶解。再將載體材料溶解于適當的溶劑中。將兩者混合均勻，然后噴霧干燥，除盡溶劑或蒸去適量溶劑，經充分干燥，研磨，過50-300目篩使成固體分散體，即得本發明的固體分散物。
其中載體材料與藥物的投料重量比為1∶1-100∶1，溶劑量為阿德福韋重量的5-200倍。所述載體材料可選用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、泊洛沙姆188、半乳糖、甘露糖醇、聚維酮、右旋糖、山梨醇、蔗糖、膽固醇、卵磷脂、β-環糊精及其衍生物的一種或幾種的組合物。所述的溶劑可以是水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙醇、丙二醇、異丙醇的一種或幾種組合物。所述的藥用添加劑可以是十二烷基硫酸鈉，三羥甲基氨基甲烷等。
c-3冷凍干燥法取阿德福韋或其鹽加入載體材料，加入蒸餾水和適量的有機溶劑，攪拌，使溶解，冷凍干燥，凍干時間為8-50h。再研磨，過50-200目篩，即得固體分散物。
其中載體材料與藥物的投料重量比為0.5∶1-100∶1，蒸餾水量與有機溶劑的比例為5∶1-100∶1溶劑的總量為阿德福韋重的3-300倍。所述載體材料還可選用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、泊洛沙姆188、環糊精及其衍生物、聚維酮類、乳糖、甘露醇、水解明膠、纖維素類、聚丙烯酸樹脂類、枸櫞酸、右旋糖、甘露糖、半乳糖、膽酸、甘露醇、山梨醇、蔗糖、膽固醇、卵磷脂、β-環糊精及其衍生物的一種或幾種的組合物。
d、溶劑-熔融法載體材料與藥物的投料重量比為4∶1-50∶1，載體材料可選用聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、泊洛沙姆188、甘露糖醇、木糖醇等。
取阿德福韋或其鹽先溶于適當溶劑中，將此溶液直接加入已熔融的載體材料中攪拌均勻，置冰水浴中迅速冷卻成固體，充分固化，干燥，研磨，過篩。
取載體材料與阿德福韋或其鹽混勻，加熱至熔融，劇烈攪拌，置冰水浴中迅速冷卻成固體，置冷凍箱中0.5-24h，充分固化，干燥，研磨，過50-300目篩，即得本發明固體分散物。
3.固體分散物制成固體制劑的方法取上述固體分散物，加入適當的輔料，制成片劑、膠囊、顆粒劑、微丸、滴丸等固體劑型。
本發明采用不同方法制備的固體分散物置于40℃放置10天進行穩定性比較，測定結果表明，樣品在較高的溫度下穩定性較好。
方法選擇代表性的實施例樣品，置于40℃放置10天，樣品的穩定性測定結果見下表1表1 不同樣品的穩定性測定結果實施例 外觀 有關物質6 沒有變化 0.64％7 沒有變化 0.54％10 沒有變化 0.63％11 沒有變化 0.60％12 沒有變化 0.57％13 沒有變化 0.48％14 沒有變化 0.66％15 沒有變化 0.46％17 沒有變化 0.48％有關物質的測定方法為固定相ODSC-18柱，10u填料，250×4.6mm。
流動相5％甲醇，1％B7，1％磷酸，93％水。柱溫25℃。檢測UV 254nm。
本發明對阿德福韋、阿德福韋酯及固體分散物在大鼠體內的生物利用度也進行了比較性實驗。
方法標準曲線于0.95ml空白大鼠血清中加入不同濃度的PMEA對照品溶液50μl，得到PEMA終濃度為0，20，50，100，200，500和1000ng/ml的標準血清樣品，復管操作，加等體積的10％三氯乙酸同上法沉淀蛋白后，取上清液50μl進樣測定HPLC紫外吸收，色譜條件同上。
Wister大鼠21只隨機分為七組，每組3只，禁食16小時后，分別灌胃不同的樣品，折合阿德福韋30mg/kg，體積為1ml/100g體重，于給藥后10、20、30、45分鐘及1、1.5、2、4、6、8小時取血300μl，室溫放置待血凝后，以10000rpm離心分離血清，加入等體積的10％三氯乙酸，充分振搖后，沉淀蛋白30分鐘以上，以10000rpm離心2分鐘，分離沉淀，取上清液50μl進樣。計算不同時間下的血藥濃度，AUC0-t，以梯形法計算。
表2不同樣品的吸收程度(AUC)結果。
樣品 分散材料AUC(h.ng/ml) 相對比例阿德福韋 - 129254.3 1.00阿德福韋酯 - 226795.4 1.75實施例14 乙二醇6000181922.5 1.41實施例13 聚維酮64581.5 0.50實施例17 卵磷酯227944.7 1.76結果表明，實施例14和17得到的阿德福韋固體分散物的生物利用度與阿德福韋酯類似，明顯高于阿德福韋本身，參見附圖1。
附圖1大鼠體內血藥濃度時間曲線圖。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明做進一步的說明，實施例僅為解釋性的決不意味著它以任何方式限制本發明的范圍。
實施例1取阿德福韋2.73g，加入乙醇50ml，再加谷氨酸1.47g，加熱攪拌使完全溶解，過濾，回收溶劑，濃縮至約30ml，加入10ml水，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韋谷氨酸鹽。
實施例2取阿德福韋2.73g，加入乙醇25ml和25ml水，再加精氨酸1.74g，加熱攪拌使完全溶解，過濾，回收溶劑，濃縮至約30ml，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韋精氨酸鹽。
實施例3取阿德福韋2.73g，加入水30ml，再加濃鹽酸3ml，加熱攪拌使完全溶解，過濾，加入乙醇20ml，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韋鹽酸鹽。
實施例4取阿德福韋2.73g，加入乙醇25ml和25ml水，再加氫氧化鈉0.8g，加熱攪拌使完全溶解，過濾，加乙醇25ml，放冷，在0℃下析晶，收集，干燥，得阿德福韋鈉鹽。
實施例5取阿德福韋2.73g，加聚乙二醇4000和聚乙二醇6000的混合物(1∶2)2.7g，置研缽中，研磨粉碎，轉速300rpm，研磨時間30min，再加入聚乙二醇4000和聚乙二醇6000的混合物(1∶2)5.4g，繼續研磨30分鐘，過80目篩，即得阿德福韋的固體分散物。
實施例6取阿德福韋2g，加聚乙二醇4000和聚乙二醇6000的混合物(1∶1)20g，置燒杯中，水浴加熱使熔融，攪拌均勻，迅速冷卻固化，充分固化后，干燥，粉碎，過80目篩，即得阿德福韋的固體分散物。
實施例7加泊洛沙姆188 40g，置燒杯中，水浴加熱使熔融。取阿德福韋精氨酸鹽2g，加適量乙醇溶解后，滴加入泊洛沙姆中，充分攪拌均勻，迅速冷卻固化，充分固化后，減壓充分干燥，粉碎，過80目篩，即得阿德福韋的固體分散物。
實施例8加泊洛沙姆188 40g，置燒杯中，水浴加熱使熔融。取阿德福韋鈉鹽2g，加適量水溶解后，滴加入泊洛沙姆中，充分攪拌均勻，迅速冷卻固化，充分固化后，減壓充分干燥，粉碎，過80目篩，即得固體分散物。
實施例9將8g聚乙二醇4000溶解于80ml水中，取阿德福韋鈉鹽2g，加熱攪拌使完全溶解后，蒸去水份，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例10將8g卵磷脂溶解于100ml乙醇中，加阿德福韋谷氨酸鹽2g，加熱充分攪拌使完全溶解后，蒸去乙醇，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例11將10gβ-環糊精溶解于100ml水中，加阿德福韋鹽酸鹽2g，加熱攪拌使完全溶解后，蒸去水后，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例12將8g聚維酮溶解于100ml水中，加阿德福韋精氨酸鹽2g，加熱攪拌使完全溶解后，蒸去水后，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例13加阿德福韋2g，加水100ml，加精氨酸2g，加熱使溶解，再將8g聚維酮溶解于其中，蒸去水后，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例14加阿德福韋2g，加水100ml，加NaOH 0.8g，加熱使溶解，調至約pH8再將8g聚乙二醇6000溶解于其中，蒸去水后，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例15加阿德福韋2g，加水和乙醇各50ml，加熱至約50℃，滴加鹽酸使完全溶解，再將4g卵磷酯溶解于其中，蒸去水后，殘留物干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例16加阿德福韋2g，加水和乙醇各50ml，精氨酸2g，加熱攪拌使完全溶解，再將4g卵磷酯，4g山梨醇，4g甘露醇溶解于其中，直接噴霧干燥，再充分干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例17將8g卵磷脂溶解于150ml乙醇中，加阿德福韋谷氨酸鹽2g，1g右旋糖，1g甘露醇，1g膽固醇，加熱充分攪拌使完全溶解后，直接噴霧干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例18將6g卵磷脂溶解于200ml丙酮中，加阿德福韋2g，2g膽酸，1g甘露醇，1g膽固醇，加熱充分攪拌使完全溶解后，直接噴霧干燥后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
將6gβ-環糊精溶解于100ml水中，加阿德福韋鹽酸鹽2g，4g右旋糖，4g甘露醇，加熱攪拌使完全溶解后，冷凍干燥16小時后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例20加阿德福韋2g，加水100ml，加精氨酸2g，4g山梨醇，4g甘露醇，加熱使溶解，再將2g聚乙二醇6000溶解于其中，冷凍干燥16小時后，研磨，過80目篩即得固體分散物。
實施例21顆粒劑處方阿德福韋固體分散物5％，乳糖60％，羧甲基纖維素5％，羥丙甲纖維素25％，阿斯巴甜3％，檸檬香精2％。
制法a將主藥含阿德福韋的固體分散物及輔料分別過100目篩，備用。
b將處方量輔料混合均勻，再與主藥充分混勻。加入2％羥丙甲纖維素適量制軟材，過18目篩，在55℃通風烘箱中干燥2h。
c干顆粒過20目篩整粒，篩去細粉，裝袋即得。
實施例22膠囊劑處方阿德福韋固體分散物5％，微晶纖維素40％，乳糖50％，羧甲基纖維素3％，硬脂酸鎂2％。
制備工藝a將主藥及輔料分別過100目篩，備用。
b將處方量輔料混合均勻，再與主藥充分混勻。加入5％聚維酮適量制軟材，過30目篩，在55℃通風烘箱中干燥2h。
c干顆粒過30目篩整粒，加入硬脂酸鎂，裝膠囊即得。
實施例23片劑處方阿德福韋固體分散體5％，微晶纖維素40％，淀粉50％，交聯聚維酮3％，滑石粉1％，硬脂酸鎂1％。
制備工藝a將主藥及輔料分別過100目篩，備用。
b將處方量輔料混合均勻，再與主藥充分混勻。加入10％淀粉漿適量制軟材，過24目篩，在55℃通風烘箱中干燥2h。
c干顆粒過20目篩整粒，加入滑石粉與硬脂酸鎂，用8mm淺沖壓片。
盡管本發明結合了它的專門的實施例已作了詳細的闡明，但是很明顯對于本技術領域熟練的技術人員仍能作出各種各樣的變化和改進都不會偏離本發明的精神實質和保護范圍。
權利要求
1.一種含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物，其特征是由活性成分阿德福韋或其鹽與載體材料制備成固體分散物。
2.按權利要求1所述的固體分散物，其特征在于所述的活性成分阿德福韋或其鹽與載體材料重量比為1∶0.2-1∶100。
3.按權利要求2所述的固體分散物，其特征在于所述的活性成分阿德福韋或其鹽與載體材料重量比為1∶0.5-1∶10。
4.按權利要求1所述的固體分散物，其特征在于所述的載體材料是聚維酮、聚乙二醇、膽固醇、卵磷脂、β-環糊精及其衍生物、蔗糖、甘露醇、山梨醇、枸櫞酸、琥珀酸、膽酸、脫氧膽酸、泊洛沙姆的一種或幾種的組合物。
5.按權利要求1所述的固體分散物，其特征在于所述的阿德福韋鹽是藥用上可接受的有機鹽或無機鹽。
6.按權利要求5所述的固體分散物，其特征在于所述的有機鹽為氨基酸鹽、葡甲胺鹽、甲磺酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、膽酸鹽、脫氧膽酸鹽；無機鹽為鈉、鉀、鎂、鋅、鋁等金屬離子鹽以及鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸等無機酸鹽。
7.一種含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物的制備方法，其特征在于包括a、熔融法取載體材料與阿德福韋或其鹽混勻，加熱至熔融，劇烈攪拌，置冰水浴中迅速冷卻成固體，充分固化，干燥，研磨，過篩；b、研磨法取載體材料與阿德福韋或其鹽混勻，共置研缽中，研磨，取出，過篩；c、溶劑法(噴霧干燥法、冷凍干燥法)將阿德福韋或其鹽溶于適當的溶劑中，再將載體材料溶解于適當的溶劑中。將兩者混合均勻，蒸去溶劑(噴霧干燥、冷凍干燥)，使藥物和載體材料同時析出，研磨，過篩；d、溶劑—熔融法取阿德福韋或其鹽先溶于適當溶劑中，將此溶液直接加入已熔融的載體材料中攪拌均勻，置冰水浴中迅速冷卻成固體，充分固化，干燥，研磨，過篩。
8.按權利要求7所述的固體分散物的制備方法，其特征在于所述的溶劑是水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙醇、丙二醇、異丙醇的一種或幾種組合物。
全文摘要
本發明公開了一種含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物及其制備方法，由活性成分阿德福韋或其鹽、載體材料組成，其重量百分比為1∶0.2－1∶100。它的制備方法是采用熔融法、溶劑法、熔融－溶劑法、研磨法、噴霧干燥法、冷凍干燥法的一種方法。本發明制備的含活性成分阿德福韋或其鹽的固體分散物穩定性好、生物利用度高、生產成本低，解決了將阿德福韋制成前體藥物阿德福韋酯所帶來的穩定性差、生產成本高的缺點。
文檔編號A61K31/675GK1623551SQ200310107200
公開日2005年6月8日 申請日期2003年12月5日 優先權日2003年12月5日
發明者徐為人, 任曉文, 馬晉, 張士俊, 林巳蘢, 連瀟嫣, 李洪起, 王平保, 王玉麗, 黃瑩, 劉躍鵬 申請人:天津藥物研究院