一種桑黃口服液的制備方法及專用培養基的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種桑黃口服液的制備方法及專用培養基，從根本上解決了用生物發酵技術填補野生桑黃不足的現狀，還提高了口服液中桑黃主要成分的含量。培養基以天然植物為主，天然綠色無化學殘留，微量元素多，營養全面；葡萄糖與蔗糖、白糖、紅糖之一的二糖共同添加，讓成分全面持久；3、用植物油來替代傳統的化學消泡劑，既有營養，又無化學殘留；4、口服液在生產和加工灌裝過程中，全程不采用高溫、干燥、萃取、破碎等傳統或現代的物理或化學方法，不僅有效地保留了口服液中所有的活性成分，而且使活性成分不被損傷或被破壞；從制備搖瓶種至產品灌裝都不添加任何防腐劑、增稠劑、穩定劑、著色劑等添加劑，該口服液有效成分含量高。
【專利說明】
一種桑黃口服液的制備方法及專用培養基
技術領域
[0001]本發明涉及一種口服液的制備方法，具體是一種桑黃口服液的制備方法及專用培養基。
【背景技術】
[0002]桑黃是一種名貴珍稀的藥用真菌，因寄生于桑樹上，初長成時呈褐黃色而得名桑黃，桑黃分布在東亞地區，包括我國、日本、韓國、朝鮮、俄羅斯等。
[0003]桑黃的藥用在我國從漢朝就已經開始，《本草綱目》介紹桑黃“利五臟，宣腸胃氣，排毒氣”。在日本、韓國，桑黃的知名度如同我國的桑黃。
[0004]桑黃的成分特別復雜，含有多糖、黑色素、過氧化酶、麥角留醇、芳樟醇、三萜酸、脂肪酸類、芳香酸、原兒茶酸、丁香酸、咖啡酸、柚皮素、香豆素等成分。
[0005]桑黃有提高免疫力、誘導癌細胞自行凋亡、抑制癌細胞的增殖及轉移、減輕化療和放療副作用的功能，有護肝、調整和降低血糖濃度、降血脂、防止動脈硬化、防止心腦血管病的發生的作用，有預防和治療類風濕性關節炎、抑制尿酸、對痛風有良好效果的功效，對過敏及久治不愈的濕疹也有療效。有關研究表明，桑黃及其提取物對人體無毒無害，即使長期大劑量服用亦無任何毒副作用。
[000?]目前已有一些關于桑黃口服液的專利，如福建農林大學在2008年申請的“一種桑黃保健口服液的制備方法” (CN100438882C)。以桑黃菌為出發菌株，進行液體發酵，獲得桑黃發酵醪，然后將發酵醪中的菌絲用熱水浸提法獲得桑黃多糖的提取液，并與發酵液一起制成濃縮液，最后將濃縮液調配成適口性良好的保健口服液。后來有人研究了復方桑黃口服液及制備方法。但多數口服液的制備過程中采用化學合成培養基，而且在發酵過程中采用化學消泡劑處理發酵產生的泡沫，另外口服液中常會添加防腐劑、增稠劑、穩定劑、著色劑等添加劑。口服液生產灌裝過程中，會采用高溫、干燥、萃取、破碎等傳統或現代的物理化學方法，會破壞活性成分。
【發明內容】
[0007]本發明的目的是提供一種桑黃口服液的制備方法及專用培養基，從根本上解決了用生物發酵技術填補野生桑黃不足的現狀，還提高了口服液中桑黃主要成分的含量，為食品工業和制藥行業，為人民的健康提供了新的保障和途徑。
[0008]本發明的技術方案是這樣實現的:一種桑黃口服液的制備方法，步驟如下:
1)制備搖瓶種:將培養基裝入三角燒瓶內，裝液量25-35%，封口后在121-123 °C的溫度下滅菌35分鐘，待培養基溫度降到20-28°C時，在無菌條件下將斜面菌種接入三角瓶內上搖床培養，當菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜菌時，備用；
2)發酵罐培養:將培養基裝入發酵罐中，裝液量為發酵罐總容量的55-75%，當罐溫升至
121-123°C、罐壓0.11-0.13Mpa時，滅菌50min，然后通冷卻水降溫，待罐內溫度降到30V時停止，調整罐壓0.05Mpa，進入培養狀態；
將培養好的搖瓶種菌種接入罐內進行培養，接種量5-15%，罐溫20-28°C，罐壓0.04-
0.05MPa，氣體流量1.5m3/h，罐內培養36_48h時，取樣檢驗；
繼續培養5-7d，當菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、PH5-6左右、殘糖量降至0.3%左右時，培養結束，進行分裝。所述分裝是在無菌無塵車間內，采用冷鏈專用灌裝設備，將發酵液灌至滅過菌的瓶內。
[0009]進一步地，將步驟I)的搖瓶種接入種子罐放大培養，再擴接到發酵罐培養。
[O 010 ]進一步地，所述的糖為葡萄糖與二糖的混合，其各占5 O %質量百分比。所述的二糖為蔗糖、白糖或者紅糖。
[0011]進一步地，視產品需要或者工藝要求，分裝前也可過濾除去菌球。
[0012]進一步地，步驟I)搖瓶培養基配方:以重量百分比計為:桑木0.5-1.5%、麩皮0.5-1.5%、玉米1.5-2.5%、黃豆1.5-2.5%、燕麥0.5-1.5%、糖1.5-2.5%，酵母粉 1-2%，蜂花粉0.Ι-Ο.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水。
[0013]進一步地，步驟I)和步驟2中培養基的pH值為5.5-7.5。
[0014]進一步地，所述步驟2)培養基的配方為:原料按重量百分比為:桑木0.5-1.5%，麩皮0.5-1.5%，玉米 1.5-2.5%，黃豆 1.5-2.5%，燕麥0.5-1.5%，糖 1.5-2.5%，酵母粉1-2%，蜂花粉0.1 -0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.3-0.6%，余量為水。
[0015]進一步地，步驟I)中搖床轉速180-240r/min，搖床培養是20-28 °C下振蕩培養7_10天。
[0016]進一步地，步驟I)和步驟2)中培養基的制備方法為:桑木鋸末用篩濾去雜物煮汁過濾，樹皮、樹枝、樹葉、麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補足水，裝入三角燒瓶內。
[0017]進一步地，步驟2)中，當罐溫升至800C時，先打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態。
[0018]本發明的有益效果為:1、改變了以往發酵的化學合成培養基，而是以天然植物為主，天然綠色無化學殘留，微量元素多，營養全面;2、傳統配方中只添加葡萄糖這樣的單糖，現改為葡萄糖與蔗糖、白糖、紅糖之一的二糖共同添加，讓成分全面持久;3、傳統發酵中用消泡劑來處理發酵產生的泡沫，該技術用植物油來替代，既有營養，又無化學殘留；4、口服液在生產和加工灌裝過程中，全程不采用高溫、干燥、萃取、破碎等傳統或現代的物理或化學方法，不僅有效地保留了口服液中所有的活性成分，而且使活性成分不被損傷或被破壞；5、口服液中改變以往添加防腐劑、增稠劑、穩定劑、著色劑等添加劑的方法，從制備搖瓶種至產品灌裝都不添加任何不符合國家要求的化學添加劑;6、該種方法生產的口服液經權威檢測部門檢測有效成分含量高;7、采用液體發酵的方法，縮短了生產周期，產量高，成分好。
【具體實施方式】
[0019]下面結合具體實施對本發明作進一步解釋說明。
[0020]實施例1
1、搖瓶種配方:原料按重量的百分比為:桑木(鋸末、樹皮、樹葉、樹枝)0.5%，麩皮0.5%，玉米2.5%，黃豆2.5%，燕麥0.5%，糖2.5%(其中，糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%)，酵母粉1%，蜂花粉0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水，pH值為5.5。
[0021 ] 2、方法:桑木鋸末用篩濾去雜物煮汁過濾，樹皮、樹枝、樹葉、麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補足水，裝入三角燒瓶內，裝液量30%左右，將棉塞(把棉花用紗布包好做成的)或硅膠塞塞入瓶口，用牛皮紙包好后進行高壓滅菌，排凈冷空氣后升溫至121°C，計時35min，待表針歸零時打開排氣閥開啟鍋蓋。當瓶中培養基溫度降到25°C時，在無菌條件下用接種鏟將斜面菌種接入三角瓶內，接完菌的三角瓶移入培養室上搖床培養，搖床轉速200r/min，25°C下振蕩培養8天，當菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜囷時，備用。
[0022]二、發酵罐培養
1、培養基:原料按重量的百分比為:桑木0.5%，麩皮1.5%，玉米2.5%，黃豆1.5%，燕麥
0.5%打漿過濾，糖(其中糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%) 1.5%，酵母粉1%，蜂花粉0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.6%，余量為水，pH值為5.5。制備方法同搖瓶培養基。
[0023]2、液體發酵培養方法和條件:將原料按比例稱重，處理方法同搖瓶種，攪拌均勻，上料滅菌。裝液量為發酵罐總容積的60%。當罐溫升至80°C時，打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態，罐溫升至121-123°C、罐壓0.12Mpa時，計時開始，滅菌50min，計時結束通冷卻水降溫，罐內溫度降到30 0C時停止降溫，調整罐壓0.05Mpa，進入培養狀態。將培養好的搖瓶種或種子罐菌種接入罐內進行培養，接種量10%，罐溫280C，罐壓0.04Mpa，氣體流量1.5m3/h，罐內培養36h時，取樣檢驗。繼續培養6天，當菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、PH5-6左右、殘糖量降至0.3%左右時，培養結束，經檢驗合格即可分裝(分裝時視產品需要或工藝要求保留菌球或濾去菌球)。
[0024]三、分裝、旋蓋、燈檢、貼標、裝箱
在國家規定的標準凈化無菌無塵車間內，采用冷鏈專用灌裝設備，將發酵液灌至30-150mL的滅過菌的瓶內，旋蓋后進行燈檢、貼標、裝箱。
[0025]實施例2
1、搖瓶種配方:原料按重量的百分比為:桑木(鋸末、樹皮、樹葉、樹枝)1.0%，麩皮1.0%，玉米1.5%，黃豆2%，燕麥1.5%，糖1.5%(其中，糖為葡萄糖和紅糖，各占50%)，酵母粉2%，蜂花粉0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水，pH值為6.5。
[0026]2、方法:桑木鋸末用篩濾去雜物煮汁過濾，樹皮、樹枝、樹葉、麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補足水，裝入三角燒瓶內，裝液量30%左右，將棉塞(把棉花用紗布包好做成的)或硅膠塞塞入瓶口，用牛皮紙包好后進行高壓滅菌，排凈冷空氣后升溫至123°C，計時35min，待表針歸零時打開排氣閥開啟鍋蓋。當瓶中培養基溫度降到28°C時，在無菌條件下用接種鏟將斜面菌種接入三角瓶內，接完菌的三角瓶移入培養室上搖床培養，搖床轉速200r/min，28°C下振蕩培養7天，當菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜囷時，備用。
[0027]二、發酵罐培養
1、培養基:原料按重量的百分比為:桑木1.5%，麩皮I %，玉米2%，黃豆2%，燕麥1%打漿過濾，糖(其中糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%)2%，酵母粉1%，蜂花粉0.15%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.4%，余量為水，pH值為6.5。制備方法同搖瓶培養基。
[0028]2、液體發酵培養方法和條件:將原料按比例稱重，處理方法同搖瓶種，攪拌均勻，上料滅菌。裝液量為發酵罐總容積的70%。當罐溫升至80°C時，打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態，罐溫升至123°C、罐壓0.1IMpa時，計時開始，滅菌50min，計時結束通冷卻水降溫，罐內溫度降到30°C時停止降溫，調整罐壓0.05Mpa，進入培養狀態。將培養好的搖瓶種或種子罐菌種接入罐內進行培養，接種量10%，罐溫28 °C，罐壓0.04Mpa，氣體流量1.5m3/h，罐內培養36h時，取樣檢驗。繼續培養7天，當菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、PH5-6左右、殘糖量降至0.3%左右時，培養結束，經檢驗合格即可分裝(分裝時視產品需要或工藝要求保留菌球或濾去菌球)。
[0029]三、分裝、旋蓋、燈檢、貼標、裝箱
在國家規定的標準凈化無菌無塵車間內，采用冷鏈專用灌裝設備，將發酵液灌至30-150mL的滅過菌的瓶內，旋蓋后進行燈檢、貼標、裝箱。
[0030]實施例3
1、搖瓶種配方:原料按重量的百分比為:桑木(鋸末、樹皮、樹葉、樹枝)1.5%，麩皮1.5%，玉米2.5%，黃豆1.5%，燕麥1.5%，糖2.5%(其中，糖為葡萄糖和白糖，各占50%)，酵母粉1%，蜂花粉0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水，pH值為7。
[0031 ] 2、方法:桑木鋸末用篩濾去雜物煮汁過濾，樹皮、樹枝、樹葉、麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補足水，裝入三角燒瓶內，裝液量30%左右，將棉塞(把棉花用紗布包好做成的)或硅膠塞塞入瓶口，用牛皮紙包好后進行高壓滅菌，排凈冷空氣后升溫至121°C，計時35min，待表針歸零時打開排氣閥開啟鍋蓋。當瓶中培養基溫度降到20°C時，在無菌條件下用接種鏟將斜面菌種接入三角瓶內，接完菌的三角瓶移入培養室上搖床培養，搖床轉速200r/min，20°C下振蕩培養10天，當菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜囷時，備用。
[0032]二、發酵罐培養
1、培養基:原料按重量的百分比為:桑木0.5%，麩皮1.5%，玉米2.5%，黃豆1.5%，燕麥1.5%打漿過濾，糖(其中糖為葡萄糖和蔗糖，各占50%)2.5%，酵母粉1%，蜂花粉0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.6%，余量為水，pH值為5.5。制備方法同搖瓶培養基。
[0033]2、液體發酵培養方法和條件:將原料按比例稱重，處理方法同搖瓶種，攪拌均勻，上料滅菌。裝液量為發酵罐總容積的55%。當罐溫升至80°C時，打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態，罐溫升至121-123°C、罐壓0.13Mpa時，計時開始，滅菌50min，計時結束通冷卻水降溫，罐內溫度降到30 0C時停止降溫，調整罐壓0.05Mpa，進入培養狀態。將培養好的搖瓶種或種子罐菌種接入罐內進行培養，接種量10%，罐溫280C，罐壓0.05Mpa，氣體流量1.5m3/h，罐內培養36h時，取樣檢驗。繼續培養5天，當菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、PH5-6左右、殘糖量降至0.3%左右時，培養結束，經檢驗合格即可分裝(分裝時視產品需要或工藝要求保留菌球或濾去菌球)。
[0034]三、分裝、旋蓋、燈檢、貼標、裝箱
在國家規定的標準凈化無菌無塵車間內，采用冷鏈專用灌裝設備，將發酵液灌至30-150mL的滅過菌的瓶內，旋蓋后進行燈檢、貼標、裝箱。
[0035]以上所述，僅為本發明較佳的【具體實施方式】，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1.一種桑黃口服液的制備方法，其特征在于，步驟如下: 1)制備搖瓶種: 將培養基裝入三角燒瓶內，裝液量25-35%，封口后在121-123°c的溫度下滅菌35分鐘，待培養基溫度降到20-28°C時，在無菌條件下將斜面菌種接入三角瓶內上搖床培養，當菌液微稠，菌液色澤淡黃色或橙褐色，菌絲球清晰可見，周邊毛刺明顯，鏡檢無雜菌時，備用； 2)發酵罐培養: 將培養基裝入發酵罐中，裝液量為發酵罐總容量的55-75%，當罐溫升至121-123°C、罐壓0.11-0.13Mpa時，滅菌50min，然后通冷卻水降溫，待罐內溫度降到30°C時停止，調整罐壓至0.05MPa，進入培養狀態； 將培養好的搖瓶種菌種接入罐內進行培養，接種量5-15%，罐溫20-28°C，罐壓0.04-0.05MPa，氣體流量1.5m3/h，罐內培養36_48h時，取樣檢驗； 繼續培養5-7天，當菌球清晰可見，周邊毛刺明顯，菌液呈淡黃色、PH5-6左右、殘糖量降至0.3%左右時，培養結束，進行分裝。2.根據權利要求1所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，將步驟I)的搖瓶種接入種子罐放大培養，再擴接到發酵罐培養。3.根據權利要求1所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，分裝前過濾除去菌球。4.一種桑黃口服液的制備方法中搖瓶種專用培養基，其特征在于，步驟I)搖瓶培養基配方:以重量百分比計為:桑木0.5-1.5%、麩皮0.5-1.5%、玉米1.5-2.5%、黃豆1.5-2.5%、燕麥0.5-1.5%、糖1.5-2.5%，酵母粉1-2%，蜂花粉0.1-0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，余量為水。5.—種桑黃口服液的制備方法中發酵罐培養專用培養基，其特征在于，所述步驟2)培養基的配方為:原料按重量百分比為:桑木0.5-1.5%，麩皮0.5-1.5%，玉米1.5-2.5%，黃豆1.5-2.5%，燕麥0.5-1.5%，糖1.5-2.5%，酵母粉 1_2%，蜂花粉0.1-0.2%，磷酸二氫鉀0.2%，植物油0.3-0.6%，余量為水。6.根據權利要求4或5所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，所述的糖為葡萄糖與二糖的混合，其各占50%質量百分比，所述的二糖為蔗糖、白糖或者紅糖。7.根據權利要求4或5所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，培養基的pH值為5.5~7.5o8.根據權利要求1所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，步驟I)中搖床轉速180-240r/min，搖床培養是20-28 °C下振蕩培養7_10天。9.根據權利要求4或6所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，步驟I)和步驟2)中培養基的制備方法為:桑木鋸末用篩濾去雜物煮汁過濾，樹皮、樹枝、樹葉、麩皮直接煮汁過濾，玉米、黃豆、燕麥浸透無硬心后打漿過濾去渣，將過濾后的汁液一次加入其它輔料，按比例補足水，裝入三角燒瓶內。10.根據權利要求1所述的桑黃口服液的制備方法，其特征在于，步驟2)中，當罐溫升至80°C時，先打開排氣閥，排出冷空氣，此時排氣閥處于微開狀態。
【文檔編號】A61P3/10GK105963251SQ201610487955
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年6月29日
【發明人】宮晶晶
【申請人】宮晶晶