專利名稱：用截短側耳素廢菌體制備氨基葡萄糖鹽酸鹽的方法
技術領域：
本發明涉及一種用截短側耳素廢菌體制備氨基葡萄糖鹽酸鹽的方法。
背景技術：
氨基葡萄糖鹽酸鹽廣泛用于醫藥、化工、食品、飼料及化妝品行業，對人體具有重要的生理功能，能促進人體粘多糖的合成，提高關節滑液的粘性，改善關節軟骨的代謝，被醫學界視為迄今為止僅有的可以根本治療骨關節疾病的物質。制造氨基葡萄糖鹽酸鹽的主要原料是甲殼素，通常甲殼素是由蝦殼、蟹殼制備的，但近年來由于海產品產量的減少，加上蝦殼、蟹殼收集困難，并受到季節性影響，因而不能滿足生產的需求，生產企業都在尋找新的原料來源。
研究發現真菌類菌體，如曲霉、青霉、毛霉或側耳菌中含有豐富的甲殼素。合成獸用抗生素泰妙菌素、沃尼妙林的主要原料是截短側耳素，截短側耳素是擔子菌綱截短側耳菌和帕氏側耳菌發酵代謝的產物，菌體細胞干重占發酵液的4. 0% 4. 5%。干菌體細胞中含截短側耳素25% 36%、甲殼素18% 22%、蛋白質16% 24%、糖類8% 12%、脂類6% 11%，提取截短側耳素后的截短側耳素廢菌體中由于截短側耳素及脂類被提出，甲殼素含量高達24% 31%。目前國內截短側耳素產量約為3000噸，提取截短側耳素后的截短側耳素廢菌體約為12000噸。但由于截短側耳素廢菌體殘留少量截短側耳素(O. 3%左右)被界定為危險固廢，企業大都供電廠焚燒或填埋，既增加生產成本，造成資源浪費、又污染環境，截短側耳素廢菌體的處理已成為各截短側耳素生產企業的棘手問題。發明內容
本發明的目的在于提供一種有效去除廢菌體中殘留截短側耳素、生產成本低、方法簡便的用截短側耳素廢菌體制備氨基葡萄糖鹽酸鹽的方法。
本發明的技術解決方案是一種用截短側耳素廢菌體制備氨基葡萄糖鹽酸鹽的方法，其特征是包括下列步驟(一)殼聚糖制備(1)將截短側耳素廢菌體100kg投入1000L帶有回流裝置的搪瓷反應釜中，截短側耳素廢菌體中甲殼素含量為28. 6%，加入5%鹽酸溶液500L，煮沸保溫lh，抽濾，濾渣用水洗至中性,真空抽干；(2)加入15%氫氧化鈉溶液500L，在80°C水溶液中加熱保溫lh，抽濾，濾渣用水洗至中性,真空抽干；(3)加入42%氫氧化鈉溶液500L，煮沸保溫2.5h，過濾，水洗至中性，抽干；(4)經70°C真空干燥IOh后，得到殼聚糖23.56 kg，含量為89. 6%，收率73. 8%，產品為淡黃色顆粒，脫乙酰度為85. 3% ；(二)氨基葡萄糖鹽酸鹽制備(I)水解將23. 56 kg殼聚糖投入500L帶有回流裝置的搪瓷反應釜中，加入30%鹽酸溶液200L，升溫至95 °C，保溫水解3. 5h ；
(2)脫色反應結束后，水解液冷卻至60 70°C，加入藥用粉末活性炭3. 5 kg，攪拌脫色2h ；
(3)過濾脫色液經板框過濾，濾液再經0.2 y m精過濾器超濾；
(4)、真空濃縮溫度65 70°C，真空度-0.06 -0. 07MPa，回收鹽酸，邊濃縮邊補料，濃縮至氨基葡萄糖鹽酸鹽含量為50%時，停止濃縮；
(5)冷卻結晶濃縮液緩慢冷卻、結晶，攪拌轉速30rpm，冷卻至5 8°C，靜止12h。(6)離心分離離心分離后的晶體用乙醇淋洗，清除晶體表面母液； (7)真空干燥干燥溫度60°C，干燥8h，得到白色氨基葡萄糖鹽酸鹽12. 01 kg。本發明的優點
I、有效去除廢菌體中殘留截短側耳素就可有效去除廢菌體中殘留截短側耳素，半成品殼聚糖和成品氨基葡萄糖鹽酸鹽中均無截短側耳素檢出。2、不需新增菌體破壁設備和工序發酵菌體中含有的截短側耳素是用甲醇或醋酸乙酯萃取的，萃取截短側耳素的同時菌體內的脂類物質也被去除。顯微鏡觀察發現，隨著菌體中截短側耳素及脂類物質的滲出，菌體細胞壁已發生自溶，不需新增菌體破壁設備和工序，破壁后的菌體細胞中蛋白質、核酸等物質容易被去除，有利于殼聚糖的提取和純化。3、通過超濾，濾除大分子雜質經活性炭脫色后的氨基葡萄糖鹽酸鹽溶液，經板框過濾后，濾液再經0. 2 y m精過濾器超濾，濾除殘留大分子膠體蛋白和色素，為氨基葡萄糖鹽酸鹽的產品質量提供了保證。4、綜合利用、變廢為寶通過對截短側耳素廢菌體成分的分析，發現其中含有豐富的甲殼素，找到清除廢菌體中殘留截短側耳素的有效方法，制定出用截短側耳素廢菌體提取殼聚糖及氨基葡萄糖鹽酸鹽制備的技術路線，并實現產業化，解決了困擾截短側耳素生產企業的一大難題。綜合利用、變廢為寶、造福人類、利國利民，為氨基葡萄糖鹽酸鹽的生產開辟了廉價的原料來源。下面結合實施例對本發明作進一步說明。
具體實施例方式一、殼聚糖制備
I、將截短側耳素廢菌體100 kg投入1000L帶有回流裝置的搪瓷反應釜中，截短側耳素廢菌體中甲殼素含量為28. 6%，加入5%鹽酸溶液500L，煮沸保溫lh，抽濾，濾渣用水洗至中性,真空抽干。2、加入15%氫氧化鈉溶液500L，在80 V水溶液中加熱保溫Ih，抽濾，濾渣用水洗至
中性，真空抽干。3、加入42%氫氧化鈉溶液500L，煮沸保溫2. 5h，過濾，水洗至中性，抽干。4、經70°C真空干燥IOh后，得到殼聚糖23. 56 kg，含量為89. 6%，收率73. 8%，產品為淡黃色顆粒，脫乙酰度為85. 3%。二、氨基葡萄糖鹽酸鹽制備
I、水解將23. 56 kg殼聚糖投入500L帶有回流裝置的搪瓷反應釜中，加入30%鹽酸溶液200L，緩緩升溫至95 °C，保溫水解3. 5h.2、脫色反應結束后，水解液冷卻至60 70°C，加入藥用粉末活性炭3. 5 kg，攪拌脫色2h。3、過濾脫色液經板框過濾，濾液再經0. 2 U精過濾器超濾，超濾液透光率達90%以上。4、真空濃縮溫度65 70°C，真空度-0. 06 -0. 07MPa,回收鹽酸。邊濃縮邊補料，濃縮至氨基葡萄糖鹽酸鹽含量為50%時，停止濃縮。5、冷卻結晶濃縮液緩慢冷卻、結晶，攪拌轉速30rpm，冷卻至5 8 °C，靜止12h。6、離心分離離心分離后的晶體用少量乙醇淋洗，清除晶體表面母液。7、真空干燥干燥溫度60°C，干燥8h，得到白色氨基葡萄糖鹽酸鹽12.01 kg，收率 為56. 9%，產品為白色結晶，含量為98. 61%，符合食品級氨基葡萄糖鹽酸鹽質量標準。
權利要求
1. 一種用截短側耳素廢菌體制備氨基葡萄糖鹽酸鹽的方法，其特征是包括下列步驟 (一)殼聚糖制備 (1)將截短側耳素廢菌體100kg投入1000L帶有回流裝置的搪瓷反應釜中，截短側耳素廢菌體中甲殼素含量為28. 6%，加入5%鹽酸溶液500L，煮沸保溫lh，抽濾，濾渣用水洗至中性,真空抽干； (2)加入15%氫氧化鈉溶液500L，在80°C水溶液中加熱保溫lh，抽濾，濾渣用水洗至中性,真空抽干； (3)加入42%氫氧化鈉溶液500L，煮沸保溫2.5h，過濾，水洗至中性，抽干； (4)經70°C真空干燥IOh后，得到殼聚糖23.56 kg，含量為89. 6%，收率73. 8%，產品為淡黃色顆粒，脫乙酰度為85. 3% ； (二)氨基葡萄糖鹽酸鹽制備 (I)水解將23. 56 kg殼聚糖投入500L帶有回流裝置的搪瓷反應釜中，加入30%鹽酸溶液200L，升溫至95 °C，保溫水解3. 5h ； (2)脫色反應結束后，水解液冷卻至60 70°C，加入藥用粉末活性炭3. 5 kg，攪拌脫色2h ； (3)過濾脫色液經板框過濾，濾液再經O.2 μ m精過濾器超濾； (4)、真空濃縮溫度65 70°C，真空度-O.06 -O. 07MPa，回收鹽酸，邊濃縮邊補料，濃縮至氨基葡萄糖鹽酸鹽含量為50%時，停止濃縮； (5)冷卻結晶濃縮液緩慢冷卻、結晶，攪拌轉速30rpm，冷卻至5 8°C，靜止12h。
(6)離心分離離心分離后的晶體用乙醇淋洗，清除晶體表面母液； (7)真空干燥干燥溫度60°C，干燥8h，得到白色氨基葡萄糖鹽酸鹽12.01 kg。
全文摘要
本發明公開了一種用截短側耳素廢菌體制備氨基葡萄糖鹽酸鹽的方法，包括殼聚糖制備、氨基葡萄糖鹽酸鹽制備等步驟。本發明有效去除廢菌體中殘留截短側耳素，不需新增菌體破壁設備和工序，通過超濾，濾除大分子雜質，綜合利用、變廢為寶。
文檔編號C07H5/06GK102977158SQ201210506879
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月3日 優先權日2012年12月3日
發明者陳劍慧, 韓勤更, 付慧萍, 朱菊芬 申請人:江蘇賽奧生化有限公司