技術總結
本發明公開了一種中華鱘VTG蛋白抗原及抗體及制備方法和應用,步驟是:1.重組中華鱘VTG蛋白抗原制備:1)設計上游引物,下游引物,擴增結構域截短序列;2)將pMD?18T?VTG質粒及Pet32a(+)空載體分別采用EcoRI和XhoI進行酶切后純化目的片段,將二者連接為Pet32a(+)?VTG轉化DH5a,涂于含有氨芐青霉素的LB培養基上培養;3)將Pet32a(+)?VTG質粒轉化BL21(DE3)感受態細胞,涂于含有氨芐青霉素的LB固體培養基上培養;4)將收集的菌體沉淀,用含8M尿素的蛋白緩沖液重懸沉淀,過濾收集上清得到重組蛋白。2.重組中華鱘VTG蛋白抗原免疫日本大耳兔獲得中華鱘VTG蛋白抗體。3.中華鱘VTG蛋白抗原及抗體的用途。中華鱘VTG蛋白抗體與VTG蛋白抗原免疫性好,效價能達到1:1000,檢測結果陽性率高,具有良好的臨床適用性。
技術研發人員:冷小茜;危起偉;李創舉;杜浩;葉歡
受保護的技術使用者:中國水產科學研究院長江水產研究所
文檔號碼:201610932965
技術研發日:2016.10.24
技術公布日:2017.05.10