專利名稱：鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物制劑及其制備方法，具體的是涉及一種抗血小板凝集藥鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑及其制備方法。
背景技術：
替羅非班(英文名稱Tirofiban)是一種非肽類的血小板糖蛋白GP IIb/IIIa受體拮抗劑，具有抗血小板聚集的作用。其化學名為N-(丁基磺酰基)-O-[4-(4-哌啶基)丁基]-L-酪氨酸，藥學上一般使用其鹽酸鹽一水合物。
鹽酸替羅非班用于治療急性冠脈綜合征(不穩定型心絞痛或非Q波心肌梗塞)病人，也適用于冠脈缺血綜合征病人進行冠脈血管成形術或冠脈內粥樣斑塊切除術，鹽酸替羅非班可減少死亡、心肌梗死、難治性心肌缺血/血運重建的復合終點事件的發生率。本品注射劑于1998年5月首先在美國上市，上市劑型為以氯化鈉為等滲調節劑的注射用濃溶液和大輸液，規格有50ml∶12.5mg、250ml∶12.5mg和500ml∶25mg，上市說明書中記載了該藥的詳細處方。中國專利96197877.5于2004年7月21日授權了該藥物組合物。其中加有枸櫞酸和枸櫞酸鈉作為pH調節劑和穩定劑，實驗證明枸櫞酸和枸櫞酸鈉對制劑有關物質的檢測有干擾，不利于藥品的質量監控。
中國食品藥品監督管理局于2004年8月批準武漢遠大制藥集團股份有限公司生產的鹽酸替羅非班氯化鈉注射液上市，規格為100ml∶5mg。中國專利200410061014.0公開了一種抑制血小板凝聚的注射液及其制備方法，組成為鹽酸替羅非班、水和氯化鈉。
目前國內外上市的鹽酸替羅非班注射液均存在體積、重量較大，運輸不便且容易破損的缺點。并且所上市注射液均為液體制劑，需要經過最終高溫滅菌，對活性成分的穩定性有一定影響，在貯存過程中，活性成份不如固體形式穩定，溶液中易產生不溶性微粒，對患者的用藥帶來安全隱患。凍干粉針劑可以克服以上缺陷，但至今未見到鹽酸替羅非班凍干粉針劑上市的報道。
發明內容
本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種既保證了藥品貯存的穩定性，也有利于其運輸，并且容易測定藥品的有關物質，保證藥品的安全、有效的鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑。
本發明的另一目的是提供了一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法。
本發明的技術方案概述如下一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑，用下述方法制成稱取5.62重量份鹽酸替羅非班一水合物，30～1200重量份乳糖，加1500～4000重量份的水溶解，使溶液pH值為2～3，將所述溶液凍干，制得。
所述乳糖的重量份可以選75～800份，最好是200份。
所述水的重量份可以選2000～3000份。
所述pH值最好是2.3～2.7。
一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法，是由下述步驟組成稱取乳糖30～1200克，加入注射用水1200～3200ml，攪拌使溶解，加入活性炭，所述活性碳的加入量為每100ml溶液加入活性炭0.01克～0.5克，25℃～100℃攪拌10～60分鐘，過濾脫炭，加入鹽酸替羅非班一水合物5.62克，攪拌使溶解，加入注射用水至1500～4000ml，用藥學可接受的酸或堿調節溶液pH值為2～3，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，定量灌裝西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
所述乳糖的克數可以選75～800克，最好是200克。
所述溶液最終加入注射用水至2000～3000ml。
所述pH值最好是2.3～2.7。
本發明的優點是產品質量較溶液劑更加穩定，放置過程中很少產生降解物質；使用前可迅速復溶，復溶后的溶液可見異物和不溶性微粒檢查均符合中國藥典2005版要求；易于貯存和運輸；由于性質穩定，使藥品的有效期延長，并可降低運輸成本，具有明顯的經濟效益。
具體實施例方式凍干粉針劑使用前需要用適當溶劑復溶，然后用于肌肉注射或靜脈注射。復溶后的溶液中應不含有肉眼可見的微粒，出于對患者安全的考慮，同樣希望溶液中含有較少數量的顯微可見的微粒。2005年版中國藥典規定，粉針劑需要進行可見異物和不溶性微粒檢查，并制定了相應的檢測方法。
眾所周知，為減輕靜脈給藥的刺激性，注射液的pH值一般維持在3.0～8.0范圍內，參考此pH值范圍，按照常規方法對鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備過程中，我們發現產品的復溶性不好，復溶后的溶液進行可見異物和不溶性微粒檢查時不合格。經過大量實驗后，我們發現，將凍干前的溶液pH值調節到2.0～3.0時，最終產品的復溶性得到很大的改善。由于本發明的鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑在靜脈注射前需要擴溶到至少100毫升的0.9％氯化鈉注射液或5～10％葡萄糖注射液等中，經實驗證明，擴溶后溶液的pH以達到3以上，且本藥靜脈滴注速度較慢，故不會對患者注射部位造成刺激。我們還發現，用乳糖作為凍干支持劑，最終產品的復溶性優于常用的甘露醇、右旋糖酐等其它賦形劑，最終產品可見異物和不溶性微粒檢查符合中國藥典2005版規定。
下面結合具體實施例對本發明作進一步的說明實施例1處方鹽酸替羅非班一水合物5.62g乳糖200g制成1000支取處方量的乳糖，加1600ml注射用水，攪拌使溶解，加入0.1％(g/ml)的針用活性炭，于50℃攪拌30分鐘，過濾脫炭，加入處方量的鹽酸替羅非班，攪拌使溶解，加入注射用水至2000ml，用鹽酸或氫氧化鈉調節溶液pH值為2.5，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，測定半成品含量，定量灌裝于西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
檢查1.可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法，符合規定。
2.不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法，符合規定。
實施例2處方鹽酸替羅非班一水合物5.62g乳糖 75g制成1000支取處方量的乳糖，加1200ml注射用水，攪拌使溶解，加入0.01％(g/ml)的針用活性炭，于25℃攪拌60分鐘，過濾脫炭，加入處方量的鹽酸替羅非班，攪拌使溶解，加入注射用水至1500ml，用鹽酸調節溶液pH值為2，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，測定半成品含量，定量灌裝于西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
檢查1.可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法，符合規定。
2.不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法，符合規定。
實施例3
處方鹽酸替羅非班一水合物5.62g乳糖800g制成1000支取處方量的乳糖，加3200ml注射用水，攪拌使溶解，加入0.5％(g/ml)的針用活性炭，于100℃攪拌10分鐘，過濾脫炭，加入處方量的鹽酸替羅非班，攪拌使溶解，加入注射用水至4000ml，用氫氧化鈉調節溶液pH值為3，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，測定半成品含量，定量灌裝于西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
檢查1.可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法，符合規定。
2.不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法，符合規定。
實施例4處方鹽酸替羅非班一水合物5.62g乳糖30g制成1000支取處方量的乳糖，加約1200ml注射用水，攪拌使溶解，加入0.01％(g/ml)的針用活性炭，于50℃攪拌30分鐘，過濾脫炭，加入處方量的鹽酸替羅非班，攪拌使溶解，加入注射用水至1500ml，調節溶液pH值為2.3，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，測定半成品含量，定量灌裝于西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
檢查1.可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法，符合規定。
2.不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法，符合規定。
實施例5處方鹽酸替羅非班一水合物5.62g乳糖1200g制成1000支取處方量的乳糖，加3200ml注射用水，攪拌使溶解，加入0.5％(g/ml)的針用活性炭，于50℃攪拌45分鐘，過濾脫炭，加入處方量的鹽酸替羅非班，攪拌使溶解，加入注射用水至4000ml，用鹽酸或氫氧化鈉調節溶液pH值為2.7，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，測定半成品含量，定量灌裝于西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
檢查1.可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法，不符合規定。
2.不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法，不符合規定。
實施例6處方鹽酸替羅非班一水合物5.62g乳糖800g制成400支取處方量的乳糖，加1600ml注射用水，攪拌使溶解，加入0.1％(g/ml)的針用活性炭，于50℃攪拌45分鐘，過濾脫炭，加入處方量的鹽酸替羅非班，攪拌使溶解，加入注射用水至3000ml，用鹽酸或氫氧化鈉調節溶液pH值為2.5，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，測定半成品含量，定量灌裝于西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
檢查1.可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法，不符合規定。
2.不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法，不符合規定。
穩定性比較試驗樣品1.中國授權專利96197877.5實施例3注射液2.中國公開專利200410061014.0實施例1注射液3.本發明實施例1凍干粉針劑檢測方法含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版附錄VD)測定。
色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.025mol/L磷酸二氫鉀溶液(用三乙胺調節pH值為6.5)-乙腈(75∶25)為流動相；檢測波長為227nm。理論板數按鹽酸替羅非班峰計算應不低于2000。鹽酸替羅非班峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。
測定法取本品，分別加流動相制成每1ml中約含替羅非班0.05mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取鹽酸替羅非班對照品適量，同法測定，按外標法以峰面積計算含量。
有關物質取本品適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含替羅非班0.05mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照含量測定項下方法，取對照溶液100μl注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的20％；再取供試品溶液和對照溶液各100μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。供試品溶液色譜圖如有雜質峰，量取各雜質峰面積，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0％)。
可見異物按照中國藥典2005版二部附錄IX H方法。
不溶性微粒按照中國藥典2005年版二部附錄IX C方法。
試驗方法取試驗樣品，置于烘箱中，恒溫60℃放置60天，分別于第10天、30天、60天定時取樣考察上述指標。(見表1)表1
本發明鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑由于活性成分以固體存在，表現出比對比樣品更好的穩定性。
注射用鹽酸替羅非班豚鼠過敏性實驗試驗藥物按照實施例1制得注射用鹽酸替羅非班，規格5mg(替羅非班計)，批號041121，含量99.7％。供試品溶液配制取注射用鹽酸替羅非班1瓶，加入0.9％NaCl注射液100ml溶解。
試驗動物白色豚鼠，雄性，體重250～300g，由沈陽藥科大學實驗動物研究中心提供。
試驗方法取健康無傷豚鼠18只，體重250～300g，隨機均分成3組。按無菌操作，給藥組隔日腹腔注射鹽酸替羅非班、0.9％NaCl注射液和1％卵白蛋白溶液各0.5ml，共3次。然后各組再分為兩組，每組3只，于首次注射后的第14天和第21天，由上肢外側靜脈皮膚切開，分別注射鹽酸替羅非班、0.9％NaCl注射液和1％卵白蛋白溶液各1.0ml進行攻擊，觀察動物注射后30min內有無抓鼻、豎毛、呼吸困難、痙攣、休克甚至死亡等過敏反應癥狀。按表2進行過敏反應分級。
表2豚鼠過敏反應級數
反應級數2級以上(包括2級)時，可認為過敏試驗不合格。
試驗結果如表3所示重復使用注射用鹽酸替羅非班，未引起受試動物出現過敏反應。
表3注射用鹽酸替羅非班過敏試驗結果
結論注射用鹽酸替羅非班對豚鼠無致敏作用。
注射用鹽酸替羅非班體外溶血實驗試驗藥物按照實施例1制得注射用鹽酸替羅非班，規格5mg(替羅非班計)，批號041121，含量99.7％。供試品溶液配制取注射用鹽酸替羅非班1瓶，加入0.9％NaCl注射液100ml溶解。
試驗動物白色家兔，沈陽藥科大學實驗動物中心提供。
試驗方法取兔血(或羊血)數毫升，放入含玻璃珠的三角燒瓶中振搖10分鐘，或用玻璃棒攪動血液，除去纖維蛋白原，使成脫纖血液。加入0.9％氯化鈉溶液約10倍量，搖勻，1000-1500r/min離心15分鐘，除去上清液，沉淀的紅細胞再用0.9％氯化鈉溶液按上述方法洗滌2-3次，至上清液不顯紅色為止。將所得紅細胞用0.9％氯化鈉溶液配成2％的混懸液，供試驗用。再取潔凈試管7支，進行編號，1-5號管為供試品管，6號管為陰性對照管，7號管為陽性對照管。按表4所示依次加入2％紅細胞懸液、0.9％氯化鈉溶液或蒸餾水，混勻后，立即置37±0.5℃的恒溫箱中進行溫育，開始每隔15分鐘觀察1次，1小時后，每隔1小時觀察1次，一般觀察3小時。按下列順序加入各種溶液表4、體外溶血試驗
表5、體外溶血結果判定
試驗結果結果表明注射用鹽酸替羅非班各濃度在15分鐘～3小時內對家兔紅細胞均無溶血或凝聚反應。蒸餾水組在各時間點全溶血，見表6。
表6、注射用鹽酸替羅非班體外溶血試驗結果
結論體外試驗條件下，注射用鹽酸替羅非班各濃度在15分鐘～3小時內對家兔紅細胞均無溶血或凝聚作用。
注射用鹽酸替羅非班靜脈注射血管刺激性試驗試驗藥物按照實施例1制得注射用鹽酸替羅非班，規格5mg(替羅非班計)，批號041121，含量99.7％。供試品溶液配制取注射用鹽酸替羅非班1瓶，加入0.9％NaCl注射液100ml溶解。
試驗動物白色家兔，雌雄不限(雌未孕)6只，體重2.0～2.5kg，外耳殼正常。沈陽藥科大學實驗動物研究中心提供。
試驗方法取白色家兔，雌雄不限(雌未孕)6只，體重2.0～2.5kg，均分成2組，每組3只。將家兔固定于固定箱內。給藥組將注射用鹽酸替羅非班用一次性滅菌輸液裝置經左側耳緣靜脈以5ml/kg、0.5ml/min靜滴給藥，對照組經左側耳緣靜脈以5ml/kg、0.5ml/min靜滴0.9％NaCl注射液，連續給藥三天。給藥期間每日觀察血管注射部位及整個外耳殼有無變化。在末次給藥后24小時處死動物，取給藥處血管及周圍組織，以10％甲醛液固定，切片染色，切片部位為進針部位。
試驗結果肉眼觀察結果給藥組未見血管充血、出血、組織水腫、壞死。0.9％NaCl注射液對照組血管也未見異常病理改變。
病理組織檢查結果給藥組、0.9％NaCl注射液對照組動物耳緣靜脈血管內無血栓形成，血管內皮細胞及周圍組織未見水腫、炎性浸潤或壞死等異常改變。表明注射用鹽酸替羅非班對家兔靜脈血管無刺激作用。
結論注射用鹽酸替羅非班對家兔靜脈血管無明顯刺激作用。
權利要求
1.一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑，其特征是用下述方法制成稱取5.62重量份鹽酸替羅非班一水合物，30～1200重量份乳糖，加1500～4000重量份的水溶解，使溶液pH值為2～3，將所述溶液凍干，制得。
2.根據權利要求1所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑，其特征是所述乳糖的重量份為75～800份。
3.根據權利要求2所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑，其特征是所述乳糖的重量份為200份。
4.根據權利要求1所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑，其特征是所述水的重量份為2000～3000份。
5.根據權利要求1所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑，其特征是所述pH值為2.3～2.7。
6.一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法，其特征是由下述步驟組成稱取乳糖30～1200克，加入注射用水1200～3200ml，攪拌使溶解，加入活性炭，所述活性碳的加入量為每100ml溶液加入活性炭0.01克～0.5克，25℃～100℃攪拌10～60分鐘，過濾脫炭，加入鹽酸替羅非班一水合物5.62克，攪拌使溶解，加入注射用水至1500～4000ml，用藥學可接受的酸或堿調節溶液pH值為2～3，0.22μm微孔濾膜無菌精濾，定量灌裝西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得。
7.根據權利要求6所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法，其特征是所述乳糖的克數為75～800。
8.根據權利要求7所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法，其特征是所述乳糖的克數為200。
9.根據權利要求6所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法，其特征是所述加入注射用水至2000～3000ml。
10.根據權利要求6所述的一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑的制備方法，其特征是所述pH值為2.3～2.7。
全文摘要
本發明公開了一種鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑及其制備方法，鹽酸替羅非班凍干粉針注射劑用下述方法制成取乳糖30～1200克，加入注射用水使溶解，加入活性炭，25℃～100℃攪拌10～60分鐘，過濾脫炭，加入鹽酸替羅非班一水合物5.62克，攪拌，加入注射用水至1500～4000ml，調節溶液pH值為2～3，無菌精濾，定量灌裝西林瓶中，半壓塞，冷凍干燥，無菌全壓塞，壓鋁塑蓋，包裝即得，本發明的產品質量較溶液劑更加穩定，放置過程中很少產生降解物質；使用前可迅速復溶，復溶后的溶液可見異物和不溶性微粒檢查均符合中國藥典2005版要求，易于貯存和運輸，藥品的有效期長，并可降低運輸成本，具有明顯的經濟效益。
文檔編號A61P7/00GK1742725SQ20051001529
公開日2006年3月8日 申請日期2005年9月30日 優先權日2005年9月30日
發明者閆志剛, 黃牧童, 姚俊平, 張曦賾 申請人:天津南開允公醫藥科技有限公司