一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，所述方法為將制備得到的“內水相/油相/外水相”預復乳溶液，經過微孔膜過濾，再除去溶劑，洗滌，干燥后得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊；其中，內水相包括小分子親水性藥物和增粘劑。本發明提供的小分子親水性藥物緩釋微囊，粒徑均一，包埋率高，突釋率低，藥物釋放穩定，長效。
【專利說明】一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥領域，涉及一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊及其制備方法，進一步涉及一種尺寸可控的、包埋率較高的包埋有小分子親水性藥物的緩釋微囊及其制備方法。
【背景技術】
[0002]微囊化技術是將固態或液態藥物(通稱囊心物)包裹在天然或合成高分子材料(通稱囊材)中而形成的直徑I?5000μπι的微小囊狀物，稱為微型膠囊簡稱微囊(microcapsule)。這一制備過程通稱微型包囊術(microencapsu Iat1n),簡稱微囊化。粒徑在微米級的叫微囊的，粒徑在納米級的稱為納米囊。
[0003]將藥物微囊化后，可以達到以下目的:1)提高藥物的穩定性，一些易受溫度、pH值、濕度、氧氣等因素影響或易揮發的藥物，制成微囊化制劑后能夠在一定程度上防止藥物分解，提高藥物的化學或物理穩定性；2)緩釋或控釋藥物釋放，針對一些蛋白多肽類藥物半衰期短，需頻繁給藥的問題，設計長效緩釋微囊，可以減少注射次數增加患者順應性，同時避免血藥濃度波動，提高藥物療效，減少不良反應；3)賦予靶向釋藥功能，主要針對一些抗癌藥物副作用大的問題，將其制成微囊型靶向制劑，可以使藥物集中于腫瘤部位，降低毒性作用，提高療效；4)減輕藥物不良氣味，主要針對如大蒜素、魚肝油等具有特殊的氣味的藥物，將其制成微囊后可有效掩蓋藥物的不良氣味，方便患者服用。
[0004]長效緩釋微球微囊可以大大提高患者的順應性，降低副作用。現有技術中緩釋微球的制備方法典型的有凝聚法、熔融擠出法、噴霧干燥法、復乳溶劑蒸發法等。復乳溶劑蒸發法具有包埋率高，不易造成藥物失活、易于控制等優點。
[0005]CN102302455A公開了一種復乳溶劑蒸發法制備長效緩釋微球的方法，引入兩親性材料PLA-PEG用于包載親水性藥物，解決疏水材料PLA、PLGA包載親水性藥物時由于材料的疏水性導致親水性藥物擴散至外水相而使包埋率低、載藥量低、突釋高、副作用大等問題。但是PLA-PEG材料不是FDA批準用于臨床的藥用輔料，因此開發產品難以臨床報批。另外，該申請所采用的復乳制備方法為機械攪拌法，所制備微球粒徑不均一，大小不可控，后期需要篩分，增加生產成本，批次重復性差難以報批等問題。
[0006]CN101269013A公開了一種尺寸均一包埋親水性藥物的聚合物微球的制備方法，該方法是將任選的含藥物的水溶液W1或者藥物顆粒S加入到油相O中乳化制備初乳；再將所得初乳加入到含有穩定劑的外水相W2中，形成“Wi/0/W/’(“內水相/油相/外水相”)預復乳；接著將該預復乳用壓力通過微孔膜，得到復乳液；最后該復乳液經固化后再經離心洗滌和冷凍干燥，即得到聚合物微球。該方法工藝簡單，得到的產品粒徑均一，各批次產品重復性好,易于工業化生產。
[0007]小分子親水性藥物是指分子量在2.5萬以下的藥物，其具有高運動活性，從而在包埋過程中易于向外水相逃逸，從而使包埋率難以提高的特點，所述的典型的小分子親水性藥物主要包括:曲普瑞林、亮丙瑞林、戈舍瑞林、布舍瑞林或其鹽、奧曲肽或其鹽、蘭瑞肽或其鹽、利培酮、降鈣素、生長激素、生長抑素、高血糖素、胃泌素、神經生長因子、艾塞那肽、胸腺五肽、阿霉素、丙氨酰-谷氨酰胺等。
[0008]CN101269013A所公開的方法應用到小分子親水性藥物時，存在如下問題:(I)由于藥物的分子量小，很容易在除去溶劑，進行固化的過程中逃逸到外水相，導致包埋率降低；(2)由于藥物的分子量小，釋放過程中突釋嚴重，很難達到長效緩釋的效果。
[0009]因此，如何開發一種針對于小分子親水性藥物的微囊化方法，解決小分子親水性藥物包埋率低，載藥量低，突釋率高，副作用大的問題，是本領域一個亟待解決的難題。
【發明內容】
[0010]針對現有的微囊化技術無法解決小分子親水性藥物包埋率低，載藥量低，突釋率高，副作用大的問題，本領域開發一種尺寸均一，高包埋率，低突釋率的包埋小分子親水性藥物的長效緩釋微囊及其制備方法。
[0011]本發明所述包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法是通過如下技術方案實現的:
[0012]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法為:
[0013]將制備得到的“內水相/油相/外水相”預復乳溶液，經過微孔膜過濾，再除去溶齊?，洗滌，干燥后得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊；
[0014]其中，內水相包括小分子親水性藥物和增粘劑。
[0015]所述“內水相/油相/外水相”預復乳溶液中，懸浮有結構為“內水相/油相/外水相”的微囊，其中，內水相為微囊的芯材，包括小分子親水性藥物和增粘劑；油相和外水相為微囊的壁材。“內水相/油相/外水相”預復乳溶液，經過微孔膜過濾后得到粒徑均一的“內水相/油相/外水相”復乳溶液，復乳溶液除去溶劑后固化為微囊顆粒，經過洗滌，干燥即可得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。“內水相/油相/外水相”預復乳溶液的形成本發明沒有具體限定，典型但非限制性的:可以先將內水相配制成溶液，加入到油相中乳化制得“內水相/油相”初乳溶液，之后將“內水相/油相”初乳溶液加入到外水相中乳化制得“內水相/油相/外水相”復乳溶液；也可以采用CN101269013A所公開的方法中的步驟Ca)?(b)進行制備。
[0016]在本發明提供的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法中，內水相增粘劑的加入提高了內水相水溶液的粘度，從而減少了小分子親水性藥物向外水相的擴散，大大提高了藥物的包埋率；而高粘度的內水相在藥物的釋放過程中，藥物能夠平穩釋放，減少了藥物突釋。
[0017]內水相水溶液粘度的增大，容易造成內“水相/油相/外水相”預復乳溶液粘度增大，進而容易造成微孔膜過濾堵塞，微孔膜膜前壓力增大，進而會使預復乳溶液以噴射狀通過微孔膜，造成危險。為了降低“水相/油相/外水相”預復乳溶液的粘度，可以采用降低油相粘度，或者提高外水相的添加比例的方式。
[0018]降低油相粘度容易造成小分子親水性藥物包埋率降低的問題，提高外水相比例也容易造成小分子親水性藥物包埋率降低的問題，且容易引起藥物向外水相的逃逸。因此如何選擇一個合適的外水相的添加比例，對于獲得一個包埋率較高的微囊也有很大的影響。
[0019]因此，本發明所述油相和外水相的體積比為1:4?1:10，例如1:4.2,1:4.5、1:4.8、1:5、1:5.3、1:5.7、1:6.2、1:6.6、1:6.8、1:7.4、1:7.8、1:8.1、1:8.6、1:8.9、1:9.5、
1:9.7 等。
[0020]本發明所述內水相和油相的體積比為1:1?1:10，例如1:1.5、1:2.2、1:2.6、1:3.4、1:3.8、1:4.2、1:4.5、1:4.8、1:5、1:5.3、1:5.7、1:6.2、1:6.6、1:6.8、1:7.4、1:7.8、1:8.1,1:8.6,1:8.9,1:9.5,1:9.7 等。
[0021]本發明所述“內水相/油相/外水相”預復乳溶液的制備方法優選為:將內水相加入油相中乳化得到初乳液，再將初乳液加入外水相中乳化得到預復乳溶液。
[0022]初乳液乳化制備預復乳溶液的乳化過程可選用普通的乳化方式如均質、超聲、機械攪拌等。通過所述常規的乳化方法制得的預復乳溶液的懸浮顆粒的粒徑一般大于微孔膜的膜孔徑，在膜前壓力的作用下這些粒徑大于膜孔徑的預復乳懸浮顆粒通過微孔膜，便可得到復乳溶液，多次重復微孔膜過濾操作，即可得到粒徑大小與均一性滿足要求的復乳溶液。
[0023]因此通過選擇不同膜孔徑的微孔膜可以達到控制產品粒徑大小和均一性的目的。
[0024]本發明所述的內水相溶液、油相溶液和外水相溶液的溶度的選擇對于高包埋率和低突釋率的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的獲得也有一定的影響。
[0025]內水相溶液中增粘劑的濃度過大會引起內水相粘度的增大，進而影響“內水相/油相/外水相”預復乳溶液的粘度，粘度過大的預復乳溶液不利于微孔膜的過濾；增粘劑的濃度過小造成內水相粘度較低，起不到減少小分子親水性藥物向外水相擴散的作用。而內水相溶液中小分子親水性藥物的濃度過大，容易向外水相的擴散，造成浪費；濃度過低，包埋率降低，微囊壁材含量高，造成藥物的副作用增大。
[0026]本發明所述內水相為水溶液；所述水溶液中溶解有增粘劑和小分子親水性藥物。內水相中增粘劑的濃度優選為20?300mg/mL,例如22mg/mL、27mg/mL、35mg/mL、47mg/mL、60mg/mL、78mg/mL、93mg/mL、108mg/mL、125mg/mL、147mg/mL、159mg/mL、165mg/mL、178mg/mL、195mg/mL、225mg/mL、248mg/mL、267mg/mL、281mg/mL、295mg/mL 等。
[0027]本發明所述增粘劑選自天然膠類物質、蛋白類物質或天然多糖類物質中的任意I種或至少2種的組合。
[0028]所述天然膠類物質選自阿拉伯膠、卡拉膠、明膠、黃芪膠、黃原膠中的任意I種或至少2種的組合。所述蛋白類物質選自白蛋白、酪蛋白、球蛋白、纖維蛋白中的任意I種或至少2種的組合。所述天然多糖類物質選自纖維素、糊精、淀粉、甘露糖、瓊脂中的任意I種或至少2種的組合。
[0029]本發明所述增粘劑的組合典型但非限制性的實例有阿拉伯膠和明膠的組合，黃原膠和球蛋白的組合，酪蛋白和纖維蛋白的組合，纖維素和白蛋白的組合，瓊脂和淀粉的組合，卡拉膠和甘露糖的組合，糊精和黃芪膠的組合，酪蛋白和瓊脂的組合，淀粉和明膠的組合，白蛋白、卡拉膠和瓊脂的組合，酪蛋白、明膠和球蛋白的組合，淀粉、甘露糖和酪蛋白的如A坐坐
-- 口寸寸O
[0030]本發明所述內水相中小分子親水性藥物的分子量為0.1kDa?22kDa，例如
0.217kDa、0.8kDa、2kDa、4kDa、5kDa、8kDa、lOkDa、13kDa、15kDa、17kDa、20kDa、21kDa 等，優選為0.1?15kDa，進一步優選為0.1?lOkDa。所述內水相中小分子親水性藥物的濃度為I ?100mg/mL，例如 2mg/mL、8mg/mL、13mg/mL、16mg/mL、28mg/mL、32mg/mL、36mg/mL、40mg/mL、44mg/mL、53mg/mL、65mg/mL、73mg/mL、75mg/mL、82mg/mL、88mg/mL、95mg/mL 等。
[0031]本發明所述典型但非限制性的小分子親水性藥物的實例有曲普瑞林、亮丙瑞林、戈舍瑞林、布舍瑞林或其鹽、奧曲肽或其鹽、蘭瑞肽或其鹽、利培酮、降鈣素、生長激素、生長抑素、高血糖素、胃泌素、神經生長因子、艾塞那肽、胸腺五肽、阿霉素、丙氨酰-谷氨酰胺坐寸ο
[0032]本發明所述油相為聚合物材料的有機溶劑溶液。所述油相中，每10mL有機溶劑中含有I?20g聚合物材料，例如每10mL有機溶劑中含有的聚合物材料的量為3g、5g、9g、13g、16g、19g 等。
[0033]油相中聚合物材料的濃度過高造成油相粘度增大，進而會使“內水相/油相/外水相”預復乳溶液的粘度增大，不利于微孔膜過濾；油相粘度過低，內水相的包覆效果不好，容易造成小分子親水性藥物向外水相的擴散。
[0034]所述聚合物材料的分子量為I萬?6萬，例如1.5萬、1.9萬、2.3萬、2.8萬、3.6萬、4.2萬、4.8萬、5.1萬、5.3萬、5.8萬等；進一步優選地，所述聚合物材料選自聚乳酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物、聚己內酯、聚原酸酯、聚酸酐、聚磷腈、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯中的任意I種或至少2種的組合，所述組合例如聚乳酸和聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物的組合，聚己內酯和聚原酸酯的組合，聚酸酐和聚甲基丙烯酸酯的組合，聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物和聚甲基丙烯酸酯的組合，聚己內酯和聚原酸酯的組合，聚己內酯、聚原酸酯和聚酸酐的組合等。
[0035]本發明所述有機溶劑選自在水中的溶解度小于10wt%的有機溶劑，優選自二氯甲烷、三氯甲烷、二硫化碳、二甲苯、甲苯、乙酸乙酯、丙酸乙酯、乙酸丙酯中的任意I種或至少2種的組合，所述組合例如二甲苯和乙酸乙酯的組合，丙酸乙酯和二氯甲烷的組合，三氯甲烷和乙酸丙酯的組合，甲苯和三氯甲烷的組合，三氯甲烷、二硫化碳和乙酸乙酯的組合等。
[0036]本發明所述外水相為穩定劑的水溶液，所述穩定劑選自聚乙烯醇、聚甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯(TweenSO)、聚氧乙烯山梨糖醇酐月桂酸酯(TWeen20)、十二烷基磺酸鈉(SDS)中的任意I種或至少2種的組合，所述組合例如聚乙烯醇和聚甘油脂肪酸酯的組合，聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯和聚氧乙烯山梨糖醇酐月桂酸酯的組合，聚甘油脂肪酸酯和十二烷基磺酸鈉的組合，聚乙烯醇、聚甘油脂肪酸酯和聚氧乙烯山梨糖醇酐月桂酸酯的組合等等。
[0037]外水相中穩定劑的作用是保證復乳溶液在過膜后的穩定性，穩定劑濃度過高會導致原有乳滴破碎生成更小的乳滴，穩定劑濃度過低起不到穩定作用，易導致乳滴之間的聚并導致大乳滴生成。因此穩定劑過高或過低都會伴有乳滴的破碎，內水相藥物外泄及乳滴粒徑不均一，最終導致低藥物包埋率及粒徑不均一的載藥微球微囊。
[0038]優選地，所述外水相中穩定劑的濃度為0.1?10wt%,例如0.2wt%、0.9wt%>
1.3wt%、l.7wt%、2.5wt%、3.3wt%、3.8wt%、4.5wt%、6.5wt%、7.8wt%、8.6wt%、9.6wt%、9.9wt%
坐寸ο
[0039]本發明所述微孔膜為親水性膜，通過選擇不同微孔膜的膜孔徑，可以達到控制微囊粒徑大小的目的。本發明所述親水性微孔膜的膜孔徑為0.5?200 μ m，例如0.8 μ m、1.5um、2.2um、2.6um、3.5um、6um、12um、24um、35um、50um、68um、82um、108um、135 μ m、168 μ m、184 μ m、195 μ m 等。
[0040]親水性微孔膜是本領域技術人員所熟知的，典型的親水性微孔膜有親水性聚四氟乙烯微孔膜、親水性聚醚砜微孔膜、親水性聚丙烯微孔膜等等，本發明所述親水性微孔膜均可通過商購獲得。
[0041]優選地，所述微孔膜過濾的膜前壓力為I?2000kPa，例如2?20kPa、9?85kPa、16 ?106kPa、32 ?50kPa、80 ?200kPa、150 ?360kPa、185 ?850kPa、207 ?750kPa、540 ?1052kPa、872 ?1520kPa、985 ?1687kPa、1050 ?1850kPa、1350 ?1985kPa 等。
[0042]對于微孔膜過濾的膜前壓力，本發明不作具體限定。本領域技術人員可以根據“內水相/油相/外水相”預復乳溶液的粘度，以及微孔膜的孔徑對微孔膜過濾時的膜前壓力進行選擇。如果預復乳溶液的粘度過大，造成了微孔膜的堵塞，微孔膜過濾膜前壓力的增大將會引起預復乳溶液的噴射，進而造成微囊粒徑不均一的問題。
[0043]本發明所述微孔膜過濾至少進行I次，優選至少進行4次，例如進行6次、10次、17次、25次等。
[0044]預復乳溶液經過微孔膜過濾I次后，得到I次復乳溶液；1次復乳溶液可以繼續作為預復乳溶液進行2次微孔膜過濾，得到2次復乳溶液，以此類推，可以將預復乳溶液重復進行多次微孔膜過濾，直至得到的復乳溶液的粒徑大小與均一性滿足要求。因為乳液進行微孔膜過濾時的流速高達1mL.S-1,因而進行微孔膜過濾的過程大多是瞬間完成，因此，微孔膜過濾可多次重復進行。
[0045]預復乳溶液經過微孔膜過濾后得到復乳溶液，之后將復乳溶液中的溶劑去除，固化為微囊顆粒，經洗滌干燥后即可得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。所述洗滌優選為離心洗滌，所述干燥優選為冷凍干燥。在去除溶劑、洗滌、干燥的過程中，復乳液的體積會縮小，但由于體積、粒徑是同等程度的縮小，因此我們最后得到的微囊仍然是粒徑大小均一，可控的。
[0046]所述溶劑的去除可采用減壓蒸發、常溫常壓攪拌揮發或溶劑萃取等方法中的任意I種。
[0047]作為優選技術方案啊，本發明所述包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法包括如下步驟:
[0048]( I)將聚合物材料溶于有機溶劑中，形成油相O ;將增粘劑和小分子親水性藥物溶于水中，形成內水相W1;將穩定劑溶于水中，形成外水相W2 ；
[0049](2)將內水相W1加入油相O中，乳化得到W1A)型初乳液；所述內水相W1和油相O的體積比為1:1?1:10 ;
[0050](3)將W1A)型初乳液加入到外水相W2中，形成W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:4?1:10 ;
[0051](4)將W1AVW2型預復溶液乳進行微孔膜過濾，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0052](5)除去W1AVW2型復乳溶液中的有機溶劑，經離心洗漆，冷凍干燥，得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0053]本發明還提供了一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊，所述微囊由前述方法制備得到。
[0054]本發明所述包埋小分子親水性藥物緩釋微囊包埋率在90%以上；突釋率在15%以下，能持續釋放4周至12周。由于內水相中添加了增粘劑，內水相溶液的粘度增大，減少了小分子親水性藥物向外水相的擴散，提高了包埋率；且內水相粘度的增大，穩定了小分子親水性藥物的釋放速度，降低了突釋率。
[0055]本發明所述藥物包埋率的計算公式為:
[0056]包埋率=微球中實際藥物含量/制備時投入的總藥量X 100%。
[0057]本發明所述包埋小分子親水性藥物緩釋微囊尺寸均一、可控。由于本發明采用了微孔膜過濾技術，可以通過控制微孔膜孔徑的大小以及過濾過程中的膜前壓力來控制產品的粒徑，實現微囊尺寸的可控性和均一性。
[0058]優選地,所述微囊的平均粒徑為50nm?100 μ m,優選為200nm?70 μ m ;
[0059]優選地,所述微囊的粒徑分布系數Span值< 1.0,優選為< 0.8。
[0060]本發明所述粒徑分布系數Span值按照下式進行計算:
uW w1
[0061]Ψ—二~-——
dso
[0062]其中，d1(l和d9(l表示累積到10%和90%體積的樣品的粒徑值，d50是粒徑平均值。
[0063]與現有技術相比，本發明具有如下有益效果:
[0064](I)本發明通過加入在內水相中添加增粘劑，提高內水相粘度，可以減少小分子親水性藥物向外水相擴散，從而大大提高包埋率；還減少了藥物在釋放過程的突釋現象，保證藥物平穩釋放；
[0065](2)本發明通過對內水相、油相和外水相的濃度以及混合比例、微孔膜過濾的膜前壓力以及膜孔徑等條件的優化配置，獲得了包埋率在90%以上，藥物突釋率低于20%的粒徑可控，均一的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊；
[0066](3)本發明提供的小分子親水性藥物緩釋微囊，粒徑均一，直徑分布系數在0.8以內，藥物釋放穩定，長效，能持續釋放4周至12周；
[0067](4)本發明克服了現有技術中小分子親水性藥物緩釋微囊的包埋率低，突釋率高，粒徑不均一，不可控的問題，制備了粒徑均一的小分子親水性藥物長效緩釋微囊，且制備方法操作簡單，條件溫和，重復性好，所使用的原料也為FDA批準用于臨床的藥用輔料，非常有利于藥物療效的穩定性和工業化放大生產。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0068]圖1本發明所述包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法的流程示意圖；
[0069]圖2實施例1制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的電鏡照片；
[0070]圖3實施例1制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的粒徑分布圖；
[0071]圖4實施例1制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的藥物體外釋放圖；
[0072]圖5實施例4制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的電鏡照片；
[0073]圖6實施例5制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的電鏡照片。
【具體實施方式】
[0074]為便于理解本發明，本發明列舉實施例如下。本領域技術人員應該明了，所述實施例僅僅是幫助理解本發明，不應視為對本發明的具體限制。
[0075]實施例1
[0076]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0077](I)將300mg明膠溶于ImL水中，后將40mg醋酸曲普瑞林溶于上述明膠水溶液作為內水相W1 ;將0.1g分子量為6萬的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)溶于1mL 二氯甲烷(MC)中，作為油相O ;以50mL的0.lwt%的聚乙烯醇(PVA)水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0078](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0079]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:5 ;
[0080](4)將W1AVW2型預復乳溶液在300kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0081](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，在磁力攪拌作用下，固化5h，使MC完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0082]性能表征:
[0083](I)掃描電鏡
[0084]將制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊重新分散在水中，利用場發射掃描電鏡(日本JEOL SEM公司)觀察微囊的表面形貌，電鏡結果如圖2所示(圖2為實施例1制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的電鏡照片)，實施例1制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；
[0085]( 2 )平均粒徑和粒度分布
[0086]將離心好的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊滴加到激光粒度儀中，進行平均粒徑和粒徑分布系數span值的測定，測試結果如圖3所示(圖3為實施例1制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的粒徑分布圖)；經測定，微囊的平均粒徑為28.76μπι，粒度分布系數span 值為 0.649。
[0087](3)包埋率
[0088]采用RP-HPLC法檢測包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的包埋率:
[0089]樣品處理:取適量的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的樣品，加入0.2mL的乙腈和0.8mL的純水或者醋酸鹽緩沖液(pH=7.0)，震蕩使之充分溶解，過0.45 μ m水系膜即為待測樣品溶液；
[0090]包埋率計算公式為:包封率=微球中實際藥物含量/制備時投入的總藥量X 100% ;經測定，微囊的包埋率為96.2%。
[0091](4)藥物體外釋放性能
[0092]準確稱量8?1mg凍干載藥微囊，加入ImL pH7.2的PBS緩沖液；樣品管置于37°C水浴恒溫振蕩器振搖(120rpm);定期離心分離，取出1.0mL上清液，同時補入1.0mL新鮮PBS緩沖液，測定釋放介質中的藥物含量；
[0093]計算公式為:釋放度=釋放介質中所含的藥量/系統中的總藥量X 100% ;經測定該微囊第I天的突釋為9.5%, 35天之內持續釋放累積達到73.6%，測試結果如圖4所示(圖4為實施例1制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的藥物體外釋放圖)。
[0094]實施例2
[0095]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0096](I)將20mg淀粉溶于ImL水中，后將Img重組人生長激素(分子量22kDa)溶于上述淀粉水溶液作為內水相W1，將Ig分子量為I萬的聚乳酸與分子量為I萬的聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物的混合物(質量比為1:1)溶于5mL 二硫化碳中，作為油相O ;以50mL的0.lwt%的聚甘油脂肪酸酯水溶液為外水相W2 ;將孔徑為0.5 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0097](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:5 ;
[0098]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0099](4)將W1AVW2型預復乳溶液在2000kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0100](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，在磁力攪拌作用下，固化5h，使二硫化碳完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0101]性能表征:
[0102](I)掃描電鏡，測試方法與實施例1相同，電鏡掃描結果顯示，實施例2制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；
[0103](2)平均粒徑和粒度分布，測試方法與實施例1相同，經測定，微囊的平均粒徑為315nm,粒度分布系數span值為0.653 ；
[0104](3)包埋率，測試方法與實施例1相同，經測定，微囊的包埋率為90.8% ；
[0105](4)藥物體外釋放性能，測試方法與實施例1相同，經測定，第I天突釋為10.2%，35天之內持續釋放累積達到80.4%。
[0106]實施例3
[0107]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0108](I)將200mg阿拉伯膠和明膠的混合物(質量比為5:1)溶于ImL水中，后將50mg阿霉素(分子量543Da)溶于上述阿拉伯膠水溶液作為內水相W1 ;將0.1g的分子量為4萬的聚原酸酯溶于ImL三氯甲烷中，作為油相O ;以4mL的10wt%的聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯水溶液為外水相W2 ;將孔徑為200 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0109](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:1 ;
[0110]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:4 ;
[0111](4)將W1AVW2型預復乳溶液在IkPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0112](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，在磁力攪拌作用下，固化5h，使三氯甲烷完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0113]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0114]掃描電鏡顯示實施例3制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為176.5 μ m，粒度分布系數span值為0.692 ;微囊的包埋率為90.2% ;第I天突釋為11.3%，35天之內持續釋放累積達到 82.5%ο
[0115]實施例4
[0116]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0117](lMf50mg白蛋白溶于ImL水中，后將20mg醋酸亮丙瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1 ;將2g的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL 二甲苯中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚氧乙烯山梨糖醇酐月桂酸酯水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0118](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0119]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0120](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0121](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，在磁力攪拌作用下，固化5h，使三氯甲烷完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0122]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0123]掃描電鏡如圖5 (圖5為實施例4制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的電鏡照片)所示，實施例4制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為33.2 μ m,粒度分布系數span值為0.648 ;微囊的包埋率為95.8%，第I天突釋為9.3%, 35天之內持續釋放累積達到82.6%。
[0124]實施例5
[0125]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0126](I)將50mg纖維素溶于ImL水中，后將Img蘭瑞肽溶于上述水溶液作為內水相W1 ；將Ig的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL乙酸乙酯中，作為油相O ;以10mL的2wt%的十二烷基磺酸鈉水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0127](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0128]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0129](4)將W1AVW2型預復乳溶液在6kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0130](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，用IL的0.9%NaCl攪拌4h萃取乙酸乙酯，固化5h，使乙酸乙酯完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0131]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0132]掃描電鏡如圖6 (圖6為實施例5制備的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的電鏡照片)所示，實施例5制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.8 μ m,粒度分布系數span值為0.623 ;微囊的包埋率為95.8%，第I天突釋為9.3%, 35天之內持續釋放累積達到82.6%。
[0133]實施例6
[0134]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0135](I)將50mg卡拉膠溶于ImL水中，后將10mg丙氨酰-谷氨酰胺(分子量217)溶于上述水溶液作為內水相W1，將Ig的分子量為2萬的聚乙二醇溶于1mL乙酸丙酯中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0136](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0137]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0138](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0139](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，用IL的0.9%NaCl攪拌4h萃取乙酸丙酯，固化5h，使乙酸丙酯完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0140]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0141]掃描電鏡顯示實施例6制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為31.8 μ m，粒度分布系數span值為0.657 ;微囊的包埋率為94.5%，第I天突釋為10.7%，35天之內持續釋放累積達到84.9%ο
[0142]實施例7
[0143]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0144](I)將50mg黃芪膠溶于ImL水中，后將Img醋酸亮丙瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1 ;將0.1g的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL丙酸乙酯中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0145](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0146]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為11:100 ;
[0147](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0148](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，用IL的0.9%NaCl攪拌4h萃取丙酸乙酯，固化5h，使丙酸乙酯完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0149]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0150]掃描電鏡顯示實施例7制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.8 μ m，粒度分布系數span值為0.662 ;微囊的包埋率為94.1%，第I天突釋為9.8%，35天之內持續釋放累積達到83.7%。
[0151]實施例8
[0152]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0153](I)將50mg黃原膠溶于ImL水中，后將Img醋酸亮丙瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1，將Ig的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL 二氯甲烷與三氯甲烷的混合物(體積比為3:1)中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0154](2)將內水相巧加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0155]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0156](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0157](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，在磁力攪拌作用下，固化5h，使MC完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0158]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0159]掃描電鏡顯示實施例8制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.9 μ m，粒度分布系數span值為0.655 ;微囊的包埋率為94.7%，第I天突釋為9.8%，35天之內持續釋放累積達到83.2%。
[0160]實施例9
[0161]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0162](I)將50mg酪蛋白溶于ImL水中，后將Img醋酸亮丙瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1 Jflg的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL二氯甲烷中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0163](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0164]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0165](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0166](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，在磁力攪拌作用下，固化5h，使MC完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0167]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0168]掃描電鏡顯示實施例9制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為33.4 μ m，粒度分布系數span值為0.638 ;微囊的包埋率為94.6%，第I天突釋為10.8%，35天之內持續釋放累積達到81.9%。
[0169]實施例10
[0170]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0171](I)將50mg球蛋白溶于ImL水中，后將Img醋酸亮丙瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1 ;將Ig的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL 二甲苯中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0172](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0173]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0174](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0175](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，用IL的0.9%NaCl攪拌4h萃取二甲苯，固化5h，使二甲苯完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0176]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0177]掃描電鏡顯示實施例10制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.9 μ m，粒度分布系數span值為0.642 ;微囊的包埋率為94.1%，第I天突釋為10.3%，35天之內持續釋放累積達到83.4%。
[0178]實施例11
[0179]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0180](I)將50mg纖維蛋白溶于ImL水中，后將Img布舍瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1 ;將Ig的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL甲苯中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0181](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0182]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0183](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0184](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，用IL的0.9%NaCl攪拌4h萃取甲苯，固化5h，使甲苯完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0185]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0186]掃描電鏡顯示實施例11制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為33.5 μ m，粒度分布系數span值為0.645 ;微囊的包埋率為93.7%，第I天突釋為10.5%，35天之內持續釋放累積達到81.9%。
[0187]實施例12
[0188]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0189](I)將50mg糊精溶于ImL水中，后將Img戈舍瑞林瑞林溶于上述水溶液作為內水相W1 ;將Ig的分子量為2萬的聚甲基丙烯酸酯溶于1mL 二氯甲烷中，作為油相O ;以10mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤,使孔膜充分濕潤；
[0190](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0191]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0192](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0193](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，磁力攪拌作用下，固化5h，使MC完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0194]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0195]掃描電鏡顯示實施例12制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.6 μ m，粒度分布系數span值為0.658 ;微囊的包埋率為92.8%，第I天突釋為9.8%，35天之內持續釋放累積達到81.8%。
[0196]實施例13
[0197]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0198](I)將50mg甘露糖溶于ImL水中，后將Img高血糖素溶于上述水溶液作為內水相W1 ;將Ig的分子量為2萬的聚酸酐溶于1mL 二氯甲烷中，作為油相O ;以60mL的2wt%的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0199](2)將內水相巧加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0200]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:6 ;
[0201](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0202](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，磁力攪拌作用下，固化5h，使MC完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0203]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0204]掃描電鏡顯示實施例13制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為31.7 μ m，粒度分布系數span值為0.627 ;微囊的包埋率為93.6%，第I天突釋為10.2%，35天之內持續釋放累積達到83.4%。
[0205]實施例14
[0206]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0207](I)將50mg瓊脂溶于ImL水中，后將Img降I丐素溶于上述水溶液作為內水相W1 ；將Ig的分子量為2萬的聚丙烯酸酯溶于1mL三氯甲烷中，作為油相O ;以10mL濃度為2wt%的聚乙烯醇與聚甘油脂肪酸酯的混合物(質量比為3:1)的水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性SPG膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0208](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0209]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:10 ;
[0210](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0211](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，磁力攪拌作用下，固化5h，使三氯甲烷完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0212]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0213]掃描電鏡顯示實施例14制備得到的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的球形度良好，粒度均一；激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.8 μ m，粒度分布系數span值為0.652 ;微囊的包埋率為94.3%，第I天突釋為9.8%，35天之內持續釋放累積達到82.4%。
[0214]比較例I
[0215]一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，包括如下步驟:
[0216](I)將Img醋酸曲普瑞林溶于水溶液作為內水相W1，將Ig的分子量為2萬的聚乳酸溶于1mL 二氯甲烷中，作為油相O ;以10mL的2%wt的聚乙烯醇水溶液為外水相W2 ;將孔徑為50.2 μ m的親水性膜置于水中浸潤，使孔膜充分濕潤；
[0217](2)將內水相W1加入油相O中，均質乳化30s，得到W1A)型初乳液；其中，內水相W1和油相O的體積比為1:10 ;
[0218]UMfW1A)型初乳液加入到外水相W2中，磁力攪拌300rpm攪拌Imin制備W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為11:100 ;
[0219](4)將W1AVW2型預復乳溶液在5kPa的操作壓力下壓過微孔膜裝置，進行微孔膜過濾，過膜時間小于10s，得到W1AVW2型復乳溶液；
[0220](5)在室溫下，將得到的W1AVW2型復乳溶液，磁力攪拌作用下，固化5h，使三氯甲烷完全除去；然后離心洗滌后，空干燥48h，獲得包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
[0221]性能表征的測試方法與實施例1相同，測試結果為:
[0222]激光粒度儀的測試結果顯示微囊的平均粒徑為32.8 μ m，粒度分布系數span值為
0.634 ;包埋率只有6.21%，第I天突釋高達15.6%，35天之內持續釋放累積達到75.1%。
[0223]由實施例1?14和對比例可以看出，本發明提供的包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的包埋率高，突釋率低。
[0224] 申請人:聲明，本發明通過上述實施例來說明本發明的詳細工藝設備和工藝流程，但本發明并不局限于上述詳細工藝設備和工藝流程，即不意味著本發明必須依賴上述詳細工藝設備和工藝流程才能實施。所屬【技術領域】的技術人員應該明了，對本發明的任何改進，對本發明產品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發明的保護范圍和公開范圍之內。
【權利要求】
1.一種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊的制備方法，其特征在于，所述方法為將制備得到的“內水相/油相/外水相”預復乳溶液，經過微孔膜過濾，再除去溶劑，洗滌，干燥后得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊； 其中，內水相包括小分子親水性藥物和增粘劑。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述油相和外水相的體積比為1:4?1:10; 優選地，所述內水相和油相的體積比為1:1?1:10 ; 優選地，所述“內水相/油相/外水相”預復乳溶液的制備方法為:將內水相加入油相中乳化得到初乳液，再將初乳液加入外水相中乳化得到預復乳溶液。
3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述內水相為水溶液； 優選地，所述內水相中增粘劑的濃度為20?300mg/mL ； 優選地，所述增粘劑選自天然膠類物質、蛋白類物質或天然多糖類物質中的任意I種或至少2種的組合； 優選地，所述天然膠類物質選自阿拉伯膠、卡拉膠、明膠、黃芪膠、黃原膠中的任意I種或至少2種的組合； 優選地，所述蛋白類物質選自白蛋白、酪蛋白、球蛋白、纖維蛋白中的任意I種或至少2種的組合； 優選地，所述天然多糖類物質選自纖維素、糊精、淀粉、甘露糖、瓊脂中的任意I種或至少2種的組合； 優選地，所述內水相中小分子親水性藥物的分子量為0.1kDa?22kDa，優選為0.1kDa ?15kDa，進一步優選為 0.1kDa ?1kDa ； 優選地，所述內水相中小分子親水性藥物的濃度為I?100mg/mL。
4.如權利要求1?3之一所述的方法，其特征在于，所述油相為聚合物材料的有機溶劑溶液； 優選地，所述油相中，每10mL有機溶劑中含有I?20g聚合物材料； 優選地，所述聚合物材料的分子量為I萬?6萬；進一步優選地，所述聚合物材料選自聚乳酸、聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物、聚己內酯、聚原酸酯、聚酸酐、聚磷腈、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯中的任意I種或至少2種的組合； 優選地，所述有機溶劑在水中的溶解度小于10wt%，優選自二氯甲烷、三氯甲烷、二硫化碳、二甲苯、甲苯、乙酸乙酯、丙酸乙酯、乙酸丙酯中的任意I種或至少2種的組合。
5.如權利要求1?4之一所述的方法，其特征在于，所述外水相為穩定劑的水溶液，所述穩定劑選自聚乙烯醇、聚甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐月桂酸酯、十二烷基磺酸鈉中的任意I種或至少2種的組合； 優選地，所述外水相中穩定劑的濃度為0.1?10wt%。
6.如權利要求1?5之一所述的方法，其特征在于，所述微孔膜為親水性膜，孔徑為0.5 ?200 μ m ； 優選地，所述微孔膜過濾的膜前壓力為I?2000kPa ； 優選地，所述微孔膜過濾至少進行I次，優選至少進行3次。
7.如權利要求1?6之一所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟: (I)將聚合物材料溶于有機溶劑中，形成油相O ;將增粘劑和小分子親水性藥物溶于水中，形成內水相W1 ;將穩定劑溶于水中，形成外水相W2 ； (2)將內水相W1加入油相O中，乳化得到W1A)型初乳液；所述內水相W1和油相O的體積比為1:1?1:10 ; (3)將W1A)型初乳液加入到外水相W2中，形成W1AVW2型預復乳溶液；所述油相O和外水相W2的體積比為1:4?1:10 ; (4)將Wi/O/%型預復乳溶液進行微孔膜過濾，得到Wi/O/%型復乳溶液； (5)除去W1AVW2型復乳溶液中的有機溶劑，經離心洗滌，冷凍干燥，得到包埋小分子親水性藥物緩釋微囊。
8.—種包埋小分子親水性藥物緩釋微囊，其特征在于，所述包埋小分子親水性藥物緩釋微囊由權利要求1?7中的任一項制備得到。
9.如權利要求8所述的微囊，其特征在于，所述微囊包埋率在90%以上；突釋率在15%以下。
10.如權利要求8或9所述的微囊，其特征在于，所述微囊尺寸均一、可控； 優選地，所述微囊的平均粒徑為50nm?100 μ m,優選為200nm?70 μ m ; 優選地，所述微囊的粒徑分布系數3?&11值< 1.0，優選為< 0.8。
【文檔編號】A61K47/36GK104224753SQ201310253378
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2013年6月24日 優先權日:2013年6月24日
【發明者】王玉霞, 馬光輝, 王寧, 韋祎, 蘇志國 申請人:中國科學院過程工程研究所