專利名稱：草烏甲素新粉針劑及其生產方法
技術領域：
本發明涉及一種草烏甲素粉針劑及其生產方法，屬于醫藥制劑技術領域。
背景技術：
草烏甲素是從毛莨科烏頭屬植物滇西都拉(Aconitum BulleyanumDiels)中分離出來的新生物堿——滇西都拉堿甲(Bulleyaconitine A)，現在有報道可以從其他植物獲得，亦可以用半合成的方法制備。目前草烏甲素的制劑有注射液、片劑、口服液、軟膠囊。最早開發的是注射液，臨床上用于風濕性關節炎、類風濕性關節炎、腰肌勞損、肩周炎、四肢扭傷、挫傷等有較好的療效；另外亦可用于癌癥、手術等疼痛癥狀；對帶狀皰疹等也有一定療效。草烏甲素的藥理、毒理作用及臨床療效藥理毒理作用(1)鎮痛作用，草烏甲素的鎮痛作用不同于嗎啡類鎮痛藥，不具有成癮性，其鎮痛作用為中樞性鎮痛藥，并與腦內5-羥色胺水平有關，其作用特點是起效較慢，但持續時間長。用扭體法、熱板法、甲醛致痛法、光熱致痛法等四種實驗表明，草烏甲素鎮痛作用遠比嗎啡和阿司匹林強。(2)抗炎作用，草烏甲素有明顯的抗炎作用，機理與抑制PG釋放有關，其作用特點為持續時間長，并呈量效關系。經多種實驗炎癥模型證實，草烏甲素對炎癥早期的毛細血管滲透性增高、炎性滲出、水腫以及炎癥增殖期的肉芽組織增生均有明顯抑制作用。(3)局部麻醉作用，草烏甲素有較強的局部麻醉作用，為普魯卡因的193倍。(4)解熱作用，草烏甲素有降溫作用。(5)急性毒性，小鼠皮下注射LD50為0.92mg/Kg；大鼠皮下注射LD50為0.51mg/Kg。大鼠一次注射草烏甲素中毒劑量，毒性表現為流涎、嘔吐、呼吸抑制以至發展到窒息死亡，死前有持續抽搐，翻正反射消失，死亡均在給藥后12小時內，存活者24小時后恢復。(6)亞急性毒性，大鼠im連續給藥1～3個月，小劑量給藥對實驗動物無明顯影響。大鼠im連續給藥1～3個月，以相當于臨床人劑量的8～11倍給藥，對血常規、肝和腎功能均無明顯影響，心電圖有一過性變化。大鼠皮下注射連續給藥1～3個月，大劑量給藥接近中毒劑量時，對實驗動物的影響為呼吸抑制、腦水腫、脊髓前角細胞變性的暫時改變、竇性心率減慢至室性心率異常、胃腸黏膜受損。(7)致畸實驗，對小鼠致畸胎實驗用1/10的LD50劑量給藥，未見有畸胎的發生。
藥代動力學(1)大鼠首次iv(3H)草烏甲素，其血藥-時曲線呈開放型三室模型t1/2π＝2.87min、t1/2α＝11.6min、t1/2β＝5hrs。表明草烏甲素很快從中央室分布到周邊室，從體內排出較慢。(2)吸收分布，肝及腎上腺含量最高，其次為腎、肺、脾和心臟，腦含量很低。(3)排泄，給藥后4小時各臟器內含量降低50％，一次給藥劑量在6天內從尿排出46％，從糞便排出21.9％，均以原形排出。
臨床顯示具有下列作用(1)鎮痛消炎；(2)治療風濕性關節炎、類風濕性關節炎、良性關節痛、腰肌勞損、肩周炎、四肢扭傷、挫傷為首選；(3)骨折、外傷、中小手術后止痛；(4)帶狀皰疹、坐骨神經痛；(5)腫瘤疼痛。國內外涉及有關草烏甲素的工藝、處方及高新制劑的專利有1、專利號為98106595.3的草烏甲素軟膠囊及其生產方法；2、公開號為CN1107697A的草烏甲素口服片、膠囊劑；3、申請號為95101728.4的含草烏甲素的復方制劑；4、申請號為03031018.4的草烏甲素粉針劑及生產方法。這些注射液在生產時由于草烏甲素不溶于水及易分解的性質使得處方中使用了乙醇或丙二醇等有機溶劑，導致使用時存在劇烈疼痛及注射部位紅腫等缺陷，從而嚴重影響其應用。公開號為CN1107697A，發明名稱為‘草烏甲素口服片劑、膠囊劑’、專利號為ZL98106595.3，發明名稱為‘草烏甲素軟膠囊及其生產方法’。這些口服制劑存在起效慢及口服時嘴麻等病人依從性差的缺陷。申請號為03031018.4，發明名稱為“草烏甲素粉針劑及生產方法”的專利申請，雖對草烏甲素注射劑的質量有較大的改善，取得一些實質性的進步。但由于草烏甲素的高度不穩定性和較大的毒性，還需進一步提高產品的質量。
發明內容
本發明的目的是提供一種質量更加穩定，注射時無疼痛或疼痛較小的高質量的草烏甲素粉針劑。
本發明的技術方案是一種草烏甲素粉針劑，其特征在于每支粉針劑含有草烏甲素0.1～0.8mg，甘露醇45～150mg，葡萄糖0～100mg，乳酸0.001～0.06mg。
所述乳酸為弱酸性的有機乳酸，以便使產品中草烏甲素的穩定性得到極大的提高。
產品用作肌注時，加入葡萄糖可調節等滲并減輕注射時的疼痛感。
所述草烏甲素粉針劑的生產方法包括以下步驟1)、先將草烏甲素溶于300～500倍的乳酸溶液中，使其完全溶解；2)、根據等滲需要加入葡萄糖或/和甘露醇，使其完全溶解；3)、經過粗濾處理后，用0.2μm以下的濾膜過濾；4)、用現有技術中的冷凍干燥生產法生產凍干粉針劑。
用本發明制備的草烏甲素粉針劑經實驗表明具有下列優點一、穩定性草烏甲素粉針劑在常溫下放置1年，用高效液相法(HPLC)檢驗產品穩定可靠，各項指標均合格，完全符合注射用要求；而注射液(含有機溶劑)則生產不出可用高效液相法(HPLC)檢測合格的產品，迄今只能用分辨差的紫外法檢測才能合格。
二、刺激性用大白兔做刺激性實驗，草烏甲素粉針劑的刺激性為0～1級，即無明顯變化或輕度充血；而注射液則為3～4級，為重度充血并伴有肌肉變性或出現壞死，另還有褐色變性。
三、疼痛用昆明種小白鼠做疼痛實驗，注射草烏甲素粉針劑后，小白鼠一切正常，無疼痛癥狀；而注射草烏甲素注射液后，小自鼠體毛豎起，身體蜷縮，約30％死亡，疼痛癥狀較為明顯。
四、消炎鎮痛本草烏甲素粉針劑與草烏甲素注射液相比，在消炎鎮痛方面的作用基本一致。
實施例1草烏甲素凍干粉針劑，配方草烏甲素 0.2g甘露醇 50g乳酸 0.002g或0.0016ml制備工藝在1萬級的條件下，將草烏甲素先溶于300倍(～60ml)的乳酸溶液中，使其完全溶解；加入注射用水稀釋至600ml，再加入甘露醇50g，使其完全溶解，補加注射用水至1000ml；過濾，濾液經過濾紙及0.4μm的濾膜粗濾處理后，在100級的條件下，用0.2μm以下的濾膜過濾；精濾液送入分裝機，按每支1ml分裝，蓋上帶槽的蓋子，送入冷凍真空干燥機，快速冷至～-40℃，2～3小時，逐步緩慢升溫至～35℃(約需10小時)，塞緊蓋子，取出制品，扎蓋、包裝、檢驗合格后，可制得1000支0.2mg之規格的草烏甲素粉針劑成品。
實施例2草烏甲素凍干粉針劑，配方草烏甲素0.4g甘露醇 100g乳酸0.02g或0.016ml制備工藝在1萬級的條件下，將草烏甲素先溶于300倍(～60ml)的乳酸溶液，并注意使其完全溶解；加入注射用水稀釋至600ml，再加入甘露醇100g，并注意使其完全溶解，調節等滲，補加注射用水至1000ml；過濾，濾液經過濾紙及0.4μm的濾膜粗濾處理后，在100級的條件下，用0.2μm以下的濾膜過濾；精濾液送入分裝機，按每支1ml分裝，蓋上帶槽的蓋子，送入冷凍真空干燥機，快速冷至～-35℃，2～3小時，逐步緩慢升溫至～45℃(約需14小時)，塞緊蓋子，取出制品，扎蓋、包裝、檢驗合格后，可制得1000支0.4mg之規格的草烏甲素粉針成品。
實施例3草烏甲素凍干粉針劑，配方草烏甲素 0.8g甘露醇 100g葡萄糖 60g乳酸 0.04g或0.033ml制備工藝在1萬級的條件下，將草烏甲素先溶于500倍(～100ml)乳酸溶液，并注意使其完全溶解；加入注射用水稀釋至1800ml，再加入甘露醇、葡萄糖，并注意使其完全溶解；補加注射用水至2000ml，過濾，濾液經過濾紙及0.4μm的濾膜粗濾處理后，在100級的條件下，用0.2μm以下的濾膜過濾；精濾液送入分裝機，按每支2ml分裝，蓋上帶槽的蓋子，送入冷凍真空干燥機，快速冷至～-45℃，2～3小時，逐步緩慢升溫至～35℃(約需14小時)，塞緊蓋子，取出制品，扎蓋、包裝、檢驗、合格，可制得1000支0.8mg之規格的草烏甲素粉針成品。
實施例4草烏甲素凍干粉針劑，配方草烏甲素3.0g甘露醇 825g乳酸0.66ml按下列工藝實施，即得凍干粉針劑產品15000支在1萬級的條件下，將乳酸0.66ml先溶于60～70℃的1350ml注射用水中，注意使其完全溶解；再加入拌有5g甘露醇并一起研細的草烏甲素，注意使其完全溶解，并用預留的前述剛配出的溶液分數次洗研缽，洗凈后合并溶液；加入60～70℃的注射用水稀釋至3000ml，再加入甘露醇，并注意使其完全溶解，補加60～70℃的注射用水稀釋至總量～4500ml；過濾，濾液經過濾紙及0.4μm的濾膜粗濾處理后，在100級的條件下，用0.2μm以下的濾膜過濾；精濾液送入分裝機，按每支0.3ml分裝(2ml的西林瓶)，蓋上帶槽的蓋子，送入冷凍真空干燥機，快速冷至～-40℃，2～3小時，開啟真空泵減壓，逐步緩慢升溫至～40℃(約需10小時)，塞緊蓋子，取出制品，扎蓋、包裝、檢驗、合格，可制得15000支草烏甲素0.2mg之規格粉針成品。
實施例5草烏甲素凍干粉針劑，配方草烏甲素 6.0g甘露醇 1650g乳酸 1.32ml按下列工藝實施在1萬級的條件下，將乳酸1.32ml先溶于60～70℃的3000ml的注射用水中，注意使其完全溶解；再加入拌有10g甘露醇并一起研細的草烏甲素，注意使其完全溶解，并用預留的前述的剛配出的溶液1000ml分數次洗研缽，洗凈后合并溶液；加入60～70℃的注射用水稀釋至10000ml，再加入甘露醇，并注意使其完全溶解，補加60～70℃的注射用水稀釋至總量33000ml；過濾，濾液經過濾紙及0.4μm的濾膜粗濾處理后，在100級的條件下，用0.2μm以下的濾膜過濾；精濾液送入分裝機，按每支1ml分裝(2ml的西林瓶)，蓋上帶槽的蓋子，送入冷凍真空干燥機，快速冷至～-40℃，2～3小時，開啟真空泵減壓，逐步緩慢升溫至～40℃(約需10小時)，塞緊蓋子，取出制品，扎蓋、包裝、檢驗、合格，可制得30000支草烏甲素0.2mg之規格粉針成品。
本發明的藥學及藥理毒理研究結果如下一、產品的質量研究1、產品中有關物質烏頭堿屬于復雜的二萜生物堿，草烏甲素是雙酯類烏頭堿，一般有麻辣感，毒性極大。結構中有兩個酯健，親脂性比較強，易溶于氯仿、苯、無水乙醇、醚等有機溶劑，極難溶于水。由于化合物本身的堿性，使得分子中的酯健在受熱時易水解，在100℃的水溶液中很易水解失去一個酯健(乙酸酯健)，到160℃時可繼續失去另一個酯健。由于這時的結構發生了變化，藥物的活性、安全性、穩定性就會相應發生變化。作為一個藥品，穩定、安全、有效是最基本的要求，且必需同時達到。
目前草烏甲素注射液的國家試行標準，只能采用分辨率很低的紫外分光光度法測定含量，因其雜質量太高(＞2％)，含量也不穩定，若用HPLC法測定，則不符合藥品的基本要求。另由于草烏甲素注射液劑型和處方的不科學，導致產品在加工、貯存等過程中，會不斷水解而產生雜質，因此，在標準轉正的過程中，也不能使用HPLC法測定，仍只能采用分辨率很低的紫外分光光度法測定其含量。
而用本發明方案生產出的草烏甲素粉針劑產品，經過多批的試驗，產品質量穩定，有關物質檢查達到藥品質量要求，即雜質總量＜1.0％，結果見下表。
草烏甲素凍干粉針劑有關物質檢查結果
注表中百分含量后括號中的數字為在該保留時間段檢出的主要雜質個數。
2、產品的質量標準根據新藥研究的要求，制訂了產品的質量標準，其中規定有關物質項供試品溶液如顯雜質峰，雜質峰面積總和應不得大于對照溶液草烏甲素主峰的面積(1.0％)。
含量測定，照高效液相色譜法《中國藥典》2000版，二部，附錄VD測定。應為90％～110％。含量測定結構見下表。
含量測定結果
3、產品穩定性1)光穩定性試驗本品在強光照射下，外觀無明顯變化，溶液的顏色也沒有明顯的變化，但有關物質明顯增加，含量明顯下降。表明本品對光不穩定。但遠好于水針，也較普通粉針好。
2)高溫試驗本品經40℃十天，有關物質有一定增加，含量下降5％，溶液顏色無明顯變化。表明本品對熱不夠穩定。但遠好于水針，也較普通粉針好。
3)高濕度試驗本品高濕下無明顯吸濕增重現象，RH92.5％十天外觀無明顯變化，溶液顏色無明顯改變，表示量含量及有關物質無明顯改變，表明本品濕穩定性好。與水針和普通粉針基本一致。
4)加速試驗本品經40℃六個月，有關降解物略有增加，含量下降在合格范圍內，溶液顏色無明顯變化。表明本品穩定性較好。而水針劑在相同條件下，幾乎全部水解，普通粉針降解物也嚴重超標。
5)室溫留樣試驗本品經25℃六個月，各項指標無明顯變化。表明本品穩定性好。而水針劑在相同條件下，有一定水解，普通粉針降解物也略有增加。
綜上所做的試驗表明，本發明的粉針穩定性大為增加，能保障產品的質量。達到預期的發明目的。
二、刺激性用大白兔做刺激性實驗，本草烏甲素粉針的刺激性為0～1級，即無明顯變化或輕度充血；而注射液為3～4級，即為重度充血、伴有肌肉變性或出現壞死、有褐色變性。
三、疼痛用昆明種小白鼠做疼痛實驗，注射草烏甲素粉針后，小白鼠一切正常，無疼痛癥狀；而用注射液后，小白鼠體毛豎起，身體蜷縮，約30％死亡。
四、消炎鎮痛該草烏甲素粉針和草烏甲素注射液在消炎鎮痛方面的作用基本一致。
權利要求
1.一種草烏甲素粉針劑，其特征在于每支粉針劑含有草烏甲素 0.1～0.8mg甘露醇 45～150mg葡萄糖 0～100mg乳酸 0.001～0.06mg。
2.根據權利要求1所述的草烏甲素粉針劑，其特征在于它通過下列工藝步驟制得1)、將草烏甲素先溶于300～500倍的乳酸溶液中，使其完全溶解；2)、根據等滲需要加入葡萄糖或/和甘露醇，使其完全溶解；3)、經過粗濾處理后，用0.2μm以下的濾膜過濾；4)、用冷凍干燥生產法生產凍干粉針劑。
全文摘要
本發明提供一種草烏甲素粉針劑，其特征在于每支粉針劑含有草烏甲素0.1～0.8mg，甘露醇45～150mg，葡萄糖0～100mg，乳酸0.001～0.06mg，并經溶解、過濾、冷凍干燥生產法制得草烏甲素粉針劑。本發明提供的草烏甲素粉針劑產品，經過多批的試驗，雖然對光、對熱不夠穩定，但綜合穩定性較好，產品質量穩定，有關物質的檢測均達到藥品質量要求，即雜質總量＜1.0％，另外該產品還具有刺激性小，注射時不疼痛，消炎鎮痛效果明顯等優點。
文檔編號A61K9/14GK1765361SQ200410079538
公開日2006年5月3日 申請日期2004年10月29日 優先權日2004年10月29日
發明者楊兆祥 申請人:昆明紫晨生物技術有限公司